禹思宇
- 作品数:15 被引量:54H指数:5
- 供职机构:湖南出入境检验检疫局检验检疫技术中心更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目广东省农业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 猪蓝耳病病毒新型变异株的分离及NSP2部分序列分析
- 2006年以来,高致病性猪繁殖与呼吸综合征在我国造成了巨大的经济损失。位于NSP2基因上的30个氨基酸的缺失已成为区分我国2006年以来的PRRSV高致病性毒株和2005年以前的经典流行毒株的特异性标记。然而,本文在广东...
- 黄元禹思宇宣华向华
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征NSP2
- 文献传递
- 分子信标荧光定量PCR检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立被引量:1
- 2015年
- 利用新型荧光探针—分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)的HA和NA基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用实时荧光定量PCR技术检测H3N2亚型SIV。构建重组质粒p SK-H3和p SK-N2并绘制标准曲线。结果显示,该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL;与其它主要相关病毒均不发生交叉反应,批内和批间试验的重复性变异系数(CV)均小于3%,表明该方法灵敏度强、特异性好。此方法的建立将为流感病毒H3N2亚型定型检测提供一种快速有效的方法。
- 禹思宇周宇唐连飞孟芳袁晓芬梁斌
- 关键词:猪流感病毒H3N2亚型实时荧光定量PCR
- RNA聚合酶Ⅱ介导的FCV反向遗传操作系统的建立及RHDV VP60基因的表达
- 应用反向遗传系统实现RNA病毒的拯救,从而在DNA水平上对RNA病毒进行遗传操作,为深入研究RNA病毒的分子生物学及病毒与宿主的相互作用提供了新的手段。绝大多数杯状病毒不能够在体外培养,严重阻碍了这类病毒的研究,猫杯状病...
- 禹思宇
- 关键词:反向遗传系统
- 文献传递
- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量:1
- 2010年
- 〔目的〕建立一种检测进出境环保用微生物菌剂中嗜酸氧化亚铁硫杆菌(acidithiobacillus ferrooxidans,A.ferrooxidans)的实时荧光定量PCR方法。〔方法〕用9K培养基培养A.ferrooxidans标准菌株A.ferrooxidans ATCC23270,并提取基因组DNA作模板;根据GenBank中嗜酸氧化亚铁硫杆菌的16S基因序列设计合成引物和探针,用含有101 bp扩增目标产物的pGEM誖-T Easy载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,建立荧光定量PCR检测方法,并进行方法学的评估。〔结果〕成功建立了嗜酸氧化亚铁硫杆菌的荧光定量PCR检测方法,该方法对嗜酸硫杆菌属中嗜酸氧化硫硫杆菌(Acidithiobacillus thiooxidans,A.thiooxidans)和嗜酸喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus,A.caldus)无交叉反应;最少可检测到100个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内变异系数为0.32%,具有很好的重复性。〔结论〕建立的嗜酸氧化亚铁硫杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法特异性和灵敏度高、重复性好,可作为嗜酸氧化亚铁硫杆菌高通量的快速检测方法。
- 唐连飞肖家勇朱中武孟芳欧阳振宇陈盼白雪禹思宇
- 关键词:嗜酸氧化亚铁硫杆菌实时荧光定量PCR卫生检疫
- 湖南省规模化猪场H1N1猪流感流行病学调查被引量:7
- 2011年
- 为了解H1N1猪流感(SIV)在湖南省规模化猪场中感染和流行情况,2010年6月采用间接ELISA和实时荧光RT-PCR对1 065份猪血清、16 796份猪棉拭子和360份肺脏样品进行检测。结果显示,SIV H1N1抗体阳性率达37.84%,猪场阳性率达100%;H1N1猪流感病毒抗原阳性率为0.12%,SIV在湖南的流行情况有着明显的区域性差异。
- 禹思宇易征璇孟芳欧阳振宇唐连飞朱中武
- 关键词:ELISA实时荧光RT-PCR流行病学调查
- 两株猪博卡病毒的检测及遗传演化分析被引量:1
- 2014年
- 根据Gen Bank公布的猪博卡病毒序列,设计特异性引物,分别对猪博卡病毒(PBo V)的NS1基因、NP1基因、VP1/VP2全基因进行PCR方法测定,所得到的2个阳性样本分别命名为GD4和GD18。各基因遗传分析表明:GD4和GD18株各基因同源性较低,在34.9%~50.5%之间;猪博卡病毒主要分为3个大的分支,GD4和GD18分别处于不同的分支;分别与HQ223038和KF206167亲缘关系较近。
- 周宇唐连飞朱事康朱中武佟铁铸禹思宇刘星陈燕忠邹东辉罗卓军
- 数字RT-PCR技术检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立被引量:3
- 2017年
- 试验旨在利用新型荧光探针——分子信标,建立一种检测猪流感病毒的新方法。根据H3N2亚型猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的H3和N2基因的保守基因序列,分别设计并合成了特异性引物和分子信标探针,利用数字RT-PCR技术检测H3N2亚型SIV。结果显示,该数字RT-PCR检测方法与其他主要相关病毒均不发生交叉反应,重复性良好;对猪H3N2流感病毒而言,最低可检测到106倍稀释的病毒株。数字RT-PCR方法能够对RNA模板定量分析。在H3N2SIV的鉴定上,数字RT-PCR方法较实时荧光定量PCR方法更灵敏、准确。
- 唐连飞禹思宇周宇
- 关键词:猪流感病毒H3N2亚型实时荧光定量PCR灵敏性
- 荧光定量PCR方法鉴别牛、羊奶粉被引量:7
- 2013年
- 建立了应用荧光定量PCR技术鉴别牛、羊奶粉的方法。本方法无需进行奶粉的DNA提取,奶粉经核酸释放剂处理后可直接进行荧光定量PCR检测,并且该方法可对奶粉中牛、羊源性成分进行鉴别。
- 孟芳张卿蔡婧怡禹思宇赵和平朱忠武唐连飞
- 关键词:DNA荧光定量PCR奶粉羊源性成分
- 奶粉中阴沟肠杆菌实时荧光PCR快速检测方法建立被引量:3
- 2016年
- 为建立快速有效的阴沟肠杆菌检测方法,根据Genbank中的阴沟肠杆菌Amp C酶基因序列设计引物和探针,建立了奶粉中阴沟肠杆菌实时荧光PCR快速检测方法。结果显示,该方法只对阴沟肠杆菌Amp C酶基因呈阳性反应,而对其他常见非阳性菌株基因组DNA均呈阴性反应,检测限为20 CFU/m L,对人工污染的奶粉样品检测验证了方法的实用性。建立的实时荧光PCR方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测奶粉中污染的阴沟肠杆菌。
- 周慧平唐连飞蔡文杰谭建锡朱中武禹思宇
- 关键词:阴沟肠杆菌AMPC酶实时荧光PCR
- 猪流感在人际间的传播
- 猪流感病毒是一种能感染猪的A型流感病毒。猪流感能造成急性上呼吸道感染,可继发细菌或是病毒感染。严重的可导致呼吸衰竭。某些毒株感染后,猪仅有轻微的或没有临床症状。虽然该病发病率很高但死亡率低于1%-4%。人感染猪流感偶有发...
- 禹思宇向华张健騑
- 文献传递