王祯祥
- 作品数：11 被引量：43H指数：6
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 固定化青霉素酰化酶的研究被引量：9
- 1992年
- 将巨大芽孢杆菌胞外青霉素酰化酶通过共价键连接到醋酸纤维素载体上,制成的固定化青霉素酰化酶的表观活力达2000 u/g左右(PDAB 法)。水解10%(W/V)的青霉素 G 钾盐溶液,使用30批,保留活力70%以上。6-氨基青霉烷酸(6-APA)总收率平均达88.37%。固定化青霉素酰化酶水解青霉素 G 的最适 pH 为9.95,最适温度为55℃,表观米氏常数为1.093×10^(-2)mol/L,在 pH 5.8—10.7,温度45℃以下酶的活力稳定。
- 徐冠珠王祯祥朱丽钊韩辉李庆中
- 关键词：青霉素酰化酶固定化酶
- 微生物发酵法生产青霉素酰化酶
- 一种用微生物发酵生产青霉素酰化酶的方法。以巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)为出发菌，经物理和化学因子反复诱变处理，得到产胞外青霉素酰化酶高产菌株。在适宜的发酵培养条件下，酶活达700-800单位/1...
- 王祯祥徐冠珠朱丽钊韩文珍门大鹏
- 文献传递
- 固定化青霉素G酰化酶水解头孢菌素G制备7—ADCA的研究被引量：8
- 1997年
- 用聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶水解头孢菌素G制备7-ADCA,固定化酶对头孢菌素G的最适pH为9.0,最适温度50℃。在37℃、pH8.0固定化酶对头孢菌素G的表观米氏常数为1.67×10^(-2)mol/L。最大反应速度为3.01mmol·g^(-1)·min^(-1)。头孢菌素G溶液浓度在2％以上时,对固定化酶有明显的抑制作用。固定化酶水解头孢菌素G的最佳投料浓度为5％～6％,水解时用酶量以每克头孢菌素G投300U以上为好。按上述条件水解头孢菌素G,操作25批后固定化酶保留活力77.8％,7-ADCA平均收率92.68％。
- 徐冠珠韩辉王祯祥高宏庆赵丽
- 关键词：固定化青霉素酰化酶7-ADCA
- 胞外青霉素酰化酶产生菌的选育被引量：7
- 1992年
- 利用纸片显色方法,从土壤中快速筛选出98株产胞外青霉素酰化酶的菌种,经复筛其中10株酶活力较高,经鉴定均属于巨大芽孢杆菌。经单株分离得46号菌,用这株菌进行了产酶条件的研究,在最适产酶条件下,酶活力比开始提高了3.6倍。在此基础上又进行了物理化学因素处理,得突变株 UL-81,酶活力达720u/100ml 发酵液。对原株和突变株进行比较,发现UL-81菌落、细胞形态、诱导剂苯乙酸用量及添加时间等明显不同于原株。在500L 罐发酵酶活达820u/100ml 发酵液,为开始酶活的16倍。
- 王祯祥韩文珍门大鹏王青
- 关键词：巨大芽孢杆菌青霉素酰化酶
- 以聚丙烯腈纤维为载体制备固定化青霉素G酰化酶的研究被引量：10
- 2001年
- 以酸部分水解聚丙烯腈纤维为载体 ,以戊二醛为交联剂 ,共价键结合制备了固定化胞外青霉素G酰化酶。当水解后的载体中 NH2 基含量为 690 μmol g和含水量为 64%时 ,对酶蛋白的固定量达 1 0 0mg g以上 ,固定化酶的活力达 2 30 0IU g ,酶活力总产率为 30 % ,固定化效率为 56%。酶活力的总产率和固定化率随加酶量的增加而降低。该酶可以将浓度为 2 5%～1 2 5%的青霉素G钾盐水解 98%以上。批投青霉素G钾盐为 1 0g,酶负荷为 1 50IU g(PGK) ,经2 0批水解反应后 ,剩余酶活力为 80 %。用二硫基苏醣醇处理固定化酶 ,对水解青霉素G钾盐的操作稳定性有促进作用。固定化酶的室温保存半衰期为 1 30d。用戊二醛和硼氢化钠溶液处理固定化酶后 ,酶活力的室温保存稳定性有所降低。
- 鲜海军王祯祥
- 关键词：青霉素酰化酶固定化酶巨大芽孢杆菌聚丙烯腈纤维
- 新型固定化青霉素酰化酶
- 徐冠珠王祯祥韩辉朱丽钊韩文珍
- 该项技术的特点是：产酶菌株为外泌型的巨大芽孢杆菌。产酶水平高（发酵液酶活在10～15IU/ml、37℃测定，为国内外文献报道的最高水平）；酶液的分离纯化操作简便、液体酶提取收率高（ 80%左右）；固定化酶活力达1000～...
- 关键词：
- 关键词：巨大芽孢杆菌固定化酶
- 固定化巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶酶促合成头孢氨苄的研究被引量：10
- 1996年
- β—内酰胺系列抗菌素抗菌谱广、疗效高、毒副作用小,国际上研究与应用日渐广泛深入。头孢氨苄(Cephalexin)是重要的半合成抗菌素之一,由头孢霉素母核7—氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(简称7-ADCA)和侧链结构物苯甘氨酸或其甲酯(PGME)经酰化而生成。酰化有化学法和酶法两种。采用青霉素G酰化酶或a—氨基酸酯酶或,a—氨酰转移酶的酶法,具有工艺操作简单、无需基团保护、环境污染轻等优点。继日本人于70年代初试验成功酶法之后,80年代初我们开展了这方面研究。制备方面,胞外酶优于胞内酶;使用方面,固定化酶优于固定化细胞。在用具有青霉素G酰化酶活性的固定化大肠杆菌(Escherichia coli)细胞合成头孢氨苄的基础上,又研究了用固定化巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP931胞外青霉素G酰化酶酰化合成头孢氨苄的条件。本文报道这一研究结果。
- 崔福绵朱丽钊韩文珍吴敏王祯祥
- 关键词：头孢氨苄巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶
- 巨大芽孢杆菌BP931胞外青霉素G酰化酶的产生条件被引量：5
- 1996年
- 研究了巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP 931胞外青霉素G酰化酶的产生条件。菌在由葡萄糖0.7％,氮源1号0.5％,酵母膏1.0％和苯乙酸0.8％组成的液体培养基(灭菌前pH9.0,灭菌后pH8.0)中,28℃振荡培养44h。以6-硝基-3-苯乙酰胺基苯甲酸为底物,培养滤液酶活力为9.0IU/ml。诱导物苯乙酸于培养6h后加入,酶活力可以提高到11.0IU/ml。Ca^(2+)、Al^(3+)、Sn^(4+)、Mn^(2+)和Fe^(2+)离子降低酶的形成;Cu^+和C0^(2+)离子显著抑制菌生长,降低酶的形成;Zn^(2+),Cd^(2+)和Hg^(2+)离子完全抑制菌生长和酶形成。
- 崔福绵韩文珍韩辉朱丽钊王祯祥
- 关键词：巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶产酶条件
- 微生物发酵法生产青霉素酰化酶
- 一种用微生物发酵生产青霉素酰化酶的方法。以巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)为出发菌，经物理和化学因子反复诱变处理，得到产胞外青霉素酰化酶高产菌株。在适宜的发酵培养条件下，酶活达700-800单位/1...
- 王祯祥徐冠珠朱丽钊韩文珍门大鹏
- 文献传递
- 聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶性质的研究被引量：9
- 1998年
- 将巨大芽孢杆菌（Bacillusmegaterium）青霉素酞化酶连接到聚丙烯腈纤维载体上，制成固定化青霉素酰化酶。其表现活力约为2000u／g。水解青霉素G的最适温度为50℃；最适PH为9．0；在PHS．5～10．3、温度50℃以下酶的活力稳定；表观米氏常数Ka为1．33×10-8mol／L；最大反应速度Vm为2．564mmol·min-1；苯乙酸为竞争性抑制剂，抑制常数为0．16mol／L。水解10％的青霉素G钾盐溶液，使用20批，保留酶活力80％。
- 韩辉徐冠珠朱丽钊韩文珍王祯祥
- 关键词：巨大芽孢杆菌青霉素酰化酶聚丙烯腈固定化酶
