王林杰
- 作品数：54 被引量：121H指数：6
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划四川省教育厅重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 山羊不同组织中IGFBP-5 mRNA的发育表达模式
- 2011年
- [目的]探讨IGFBP-5基因在山羊出生后不同组织的发育性表达模式。[方法]采用荧光定量PCR,分析了出生后0、15、30、60、90和120d36只南江黄羊(公、母羔各18只)的心脏、肝脏、脾、肺、背最长肌、半膜肌、臂三头肌和股二头肌样品中IGFBP-5mRNA水平。[结果]母羔的IGFBP-5mRNA表达丰度显著高于公羔。各组织IGFBP-5mRNA表达量呈现肝脏>肺>脾(心脏)>肌肉的趋势(P<0.01),脾与心脏间差异不显著(P>0.01),肌肉的表达值最低。随着日龄的增加,各组织中IGFBP-5mRNA丰度均呈现下降-上调-下降的发育性表达模式,而肝脏和肺中的表达模式具有明显的性别差异。[结论]IGFBP-5mRNA主要在内脏,尤其是肝脏中合成,但在各组织的发育性表达模式一致,性别是一个重要的影响因素。
- 李利李秋欧志国王林杰张红平
- 关键词：山羊RT-PCR
- 高糖诱导山羊骨骼肌卫星细胞成脂分化过程中相关基因表达的变化被引量：4
- 2014年
- 本研究采用高糖培养基诱导山羊骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)成脂分化,检测诱导分化过程中脂肪酸合成及成脂分化相关基因表达量,为进一步揭示SMSCs的成脂分化机理提供依据。采用含25mmol·L-1葡萄糖的F12培养基诱导山羊SMSCs成脂分化,油红O染色观察脂肪滴形成,qPCR检测诱导前(0d)和分别在高糖、低糖培养基中培养2、4、6、8、10d时脂肪酸合成及成脂分化相关基因ACC、FAS、C/EBPα、PPARγ、SREBP-1、AdipoQ mRNA的相对表达量。结果表明:油红O染色观察到山羊SMSCs高糖培养6d即形成较多脂肪滴,而低糖培养至10d也无明显脂肪滴形成。ACC、C/EBPα表达量在高糖培养2d后显著升高并维持较高值(P<0.05);SREBP-1、FAS表达量在高糖培养6d后显著升高(P<0.05);PPARγ表达量在高糖培养10d后显著升高(P<0.05);AdipoQ表达量在高糖培养2、8、10d时显著升高(P<0.05)。本试验发现高浓度葡萄糖能直接或间接上调脂肪酸合成及成脂肪分化相关基因的表达,促进山羊SMSCs向类脂肪细胞转化。
- 薛科王林杰陈利王薏琳仲涛李利张红平
- 关键词：山羊骨骼肌卫星细胞成脂分化
- 山羊不同组织及不同发育时期骨骼肌内参基因的表达稳定性分析被引量：14
- 2014年
- 为筛选出山羊不同组织、不同时期骨骼肌及骨骼肌卫星细胞(Skeletal muscle satellite cells,SMSCs)中稳定表达的内参基因,以出生后3日龄的山羊不同组织(心、肝、脾、肺、肾、大脑、大肠、小肠、背最长肌、臂三头肌和半膜肌)和不同时期(3、30、60、90和120 d)的3种骨骼肌(背最长肌、臂三头肌和半膜肌)以及培养至不同阶段(1、3、4和7 d)的山羊SMSCs为研究对象,运用qRT-PCR技术及geNorm分析软件,探索9个内参基因(ACTIN、GAP—DH、TOP2β、YWHAZ、SDHA、PGK1、RP2、RPL4和HPRT1)mRNA的表达稳定性。结果表明,在同一时期的11个组织中,内参基因表达稳定度的排序:HPRT1>RP2>TOP2β>SDHA>GAPDH>ACTIN>YWHAZ>PGK1>RPL4,需要2个内参基因(HPRT1和RP2)共同校正目的基因的表达;在不同发育时期的骨骼肌中,各内参的稳定度:YWHAZ>ACTIN>HPRT1>RPL4>TOP2β>SDHA>PGK1>GAPDH>RP2,需引入3个内参(YWHAZ、ACTIN和HPRT1)才能准确地校正定量结果;在SMSCs中各内参表达的稳定度排序:PGK1>SDHA>ACTIN>RPL4>GAPDH>TOP2β>YWHAZ>RP2>HPRT1,需要3个合适的内参(PGK1、SDHA和ACTIN)作为标准化指标校正定量数据。本试验分别筛选出了能在山羊同一时期不同组织、不同发育时期的骨骼肌及SMSCs中稳定表达的内参基因及需要引入的内参数目,有利于更加准确地校正基因mRNA水平的表达量,为更好地研究基因功能奠定了基础。
- 陈利赵薇占思远李丹李利仲涛王林杰张红平
- 关键词：山羊荧光定量PCR内参基因
- 骨骼肌发育调控相关lncRNAs研究进展被引量：6
- 2016年
- 长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸、无蛋白质编码功能的RNA。相对于研究较多的短链非编码RNA,lncRNA的种类繁多,数量占哺乳动物基因组的绝大部分,功能目前尚不完全清楚。近年来研究发现,lncRNA的功能涉及表观遗传、转录调控、细胞分化、胚胎发育以及疾病发生等诸多方面。本文总结了lncRNA的分类、作用机制及其在骨骼肌发育调控和家养动物中的研究进展。
- 占思远李利王林杰仲涛张红平
- 关键词：长链非编码RNA
- 山羊IGFBP-5基因克隆及特征分析被引量：1
- 2011年
- 为探讨山羊IGFBP-5基因的特点,进一步研究其在山羊上的表达及生长发育中的作用机制,以初生南江黄羊肝脏组织为材料抽提RNA进行克隆测序,并利用ExPasy、NetPhos、NetO-Glyc、SignalP等生物软件分析IGFBP-5基因CDS区及其编码氨基酸的理化性质、结构特点。结果显示,山羊IGFBP-5基因的CDS全长819 bp,编码272个氨基酸残基,相对分子量为30.392 kD,理论等电点pI=8.56,开始19个氨基酸残基构成信号肽,具有2个疏水区、5个亲水区且总平均疏水性值为-0.619,成熟肽定位于细胞外。二级结构以无规卷曲为主(83.8%),α-螺旋和延伸片段分别为13.6%和2.6%。N-端存在IGFBP信号,C-端有Ⅰ型甲状腺球蛋白结构域,发现3个O-糖基化位点,22个磷酸化位点,主要磷酸化方式有CKⅡ、PKA、PKC、MAPK 4种。山羊与其他物种IGFBP-5基因mRNA及氨基酸序列一致性分别在89%和94%以上,其N-端在几个物种中完全一致。山羊和人IGFBP-5蛋白前体分别有特异性的氨基酸插入(Ala102、Leu3)。山羊IGFBP-5蛋白是位于细胞外且具有信号肽的弱亲水性分泌蛋白,磷酸化是调控其功能的主要因素。
- 李利李秋王林杰张红平
- 关键词：南江黄羊克隆生物信息学分析
- 山羊PPARα基因克隆、分子特性及组织差异表达分析被引量：5
- 2018年
- 试验旨在克隆山羊过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activated receptors-alpha,PPARα)基因的CDS区序列,分析其编码蛋白的结构与功能,并探讨其在山羊不同组织中的表达模式。采用RTPCR方法扩增并克隆PPARα基因CDS编码区;通过在线软件对其一级结构、二级结构和三级结构进行生物信息学分析;利用基因序列和编码蛋白构建系统发育树,进行系统发育进化分析;采用实时荧光定量PCR方法检测PPARα基因在简州大耳羊心脏、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏和网膜6个组织中的相对表达情况。结果表明,山羊PPARα基因CDS区全长1 413bp,结构稳定,共编码470个氨基酸。生物信息学分析发现,PPARα蛋白是一种结构较为稳定的带负电的亲水性蛋白,以α-螺旋和无规则卷曲为主,无信号肽和跨膜蛋白,属于膜内蛋白。蛋白序列中总共有49个磷酸化位点,9个糖基化位点。保守结构域中含有明显的DBD区域和LBD区域,蛋白结构高度保守。三级结构预测发现其蛋白结构主要为通过长链卷曲连接的2个明显不同的结构区域,结构均以helix螺旋为主。序列比对结果表明,山羊PPARα氨基酸序列与绵羊和牛的同源性最高。实时荧光定量检测结果表明,PPARα基因在肾脏和肝脏中表达量较高,显著高于其他组织(P<0.05);在网膜组织和心脏中中度表达,显著高于肺脏和脾脏(P<0.05);在肺脏和脾脏中相对低表达;说明山羊PPARα基因可能与体内脂肪氧化、脂质代谢和抗氧化应激等调控功能有关。试验结果为深入研究PPARα基因在山羊中的生理功能和调控机制奠定了理论基础。
- 饶辽源周靖宣王林杰李利张红平仲涛
- 关键词：山羊克隆生物信息学
- 一种新型培养皿摇晃装置
- 本实用新型公开了一种新型培养皿摇晃装置，包括工作台、培养皿固定装置和晃动装置，所述工作台用于安装培养皿固定装置以及晃动装置，工作台包括可活动的工作板和空心台体，工作板上设有多个培养皿固定装置；所述工作台顶部设有方形开口，...
- 张潇何威肖苗张红平李利王林杰仲涛郭家中占思远曹家雪代定卉陈媛
- 文献传递
- 美姑山羊产后30 d内乳成分变化分析被引量：4
- 2019年
- 研究美姑山羊母羊分娩后产生的羊乳中各组成成分随着泌乳时间的推移而产生的变化规律,旨在为羔羊的适时断奶以及制作代乳料提供理论依据。通过乳成分分析仪以及全自动生化分析仪得到了不同时间点的美姑山羊乳中各营养成分质量分数。乳成分中蛋白、乳糖、灰分、非脂固形物和矿物元素的质量分数随时间的推移呈现为先逐渐降低,随后在第10d左右出现轻微上调,到30d之间这一时段又保持在一个相对稳定的水平;乳脂随时间的变化不具明显的规律性。同时分析乳中各成分之间的联系,发现了蛋白质与乳糖,蛋白质与灰分,乳糖与灰分,铁与锌以及钙和磷两两之间存在显著的相关性,总结较优的模拟方程,得到了每组间最佳模拟曲线方程。本研究对美姑母乳早期泌乳阶段变化规律的探索,发现了乳中各成分的变化情况和相互联系,这为今后研制美姑山羊代乳料提供了基础参考数据。
- 周潇陈兴月刘敏王林杰杨世忠陈益沙马说布林代俊
- 关键词：母羊泌乳早期乳成分
- 猪AMPD1基因启动子区域SNP作为猪胴体性状的遗传标记及应用
- 本发明属于猪的遗传标记制备技术领域，具体涉及一种与猪胴体性状相关的分子标记制备及在标记辅助选择上的应用。所述的分子标记由AMPD1基因启动子序列克隆得到，它的核苷酸序列如序列表SEQIDNO：1所示。在序列表SEQIDN...
- 王林杰张红平李利王艳仲涛候郁果王薏林
- 文献传递
- 一种螺旋状羊用药浴池
- 本实用新型涉及动物药浴领域，一种螺旋状羊用药浴池，包括过道、淋浴架以及药浴炉，所述过道为螺旋状结构，所述淋浴架外形与所述过道外形匹配，所述淋浴架与所述过道互不干涉；所述过道边缘设置有围栏和若干支撑柱，所述支撑柱连接所述过...
- 仲涛胡江涛张红平牛丽莉李利王林杰
- 文献传递
