王振焕
- 作品数：19 被引量：55H指数：5
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- 小凹蛋白1上调人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导一氧化氮合酶激活的机制被引量：3
- 2013年
- 目的探讨小凹蛋白1(Cav-1)上调人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导内皮型一氧化氮合酶(eNOS)激活的作用机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,取同代细胞随机分为:(1)对照组;(2)钙敏感受体激动剂精胺(2.0 mmol/L)+Ca2+组;(3)Caveolae结构破坏剂(Filipin,1.5 mg/L)+精胺+Ca2+组;(4)Cav-1 ShRNA+精胺+Ca2+组;(5)空质粒+精胺+Ca2+组;(6)Filipin不同浓度(1.5、2.0、2.5 mg/L)组。免疫印迹检测人脐静脉内皮细胞中eNOS和磷酸化eNOS(p-eNOS)、Cav-1以及eNOS膜蛋白表达;免疫荧光和免疫共沉淀技术检测Cav-1和eNOS表达、共定位以及相互作用。结果不同浓度Filipin不影响eNOS和p-eNOS蛋白表达(P>0.05);精胺作用下细胞内p-eNOS表达增加(P<0.05),此作用可被Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默完全阻断(P<0.05);Fili-pin(1.5 mg/L)或Cav-1干扰处理后,eNOS的膜蛋白表达减少(P<0.05),eNOS的蛋白表达无变化(P>0.05);免疫荧光双标显示Filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默后eNOS在小凹定位减少,核周边局部区域聚集增多。与对照组和精胺+Ca2+组比较,Cav-1 ShRNA处理组Cav-1和eNOS相互作用减弱(P<0.05),其他处理组间的相互作用无统计学意义(P>0.05)。结论人脐静脉内皮细胞中Cav-1上调钙敏感受体介导eNOS激活作用机制可能与Cav-1影响eNOS质膜定位及抑制eNOS向细胞器转位有关。
- 罗小林钟华梁霄王振焕龚艳邓峰美孙志萍何芳
- 关键词：小凹蛋白1内皮型一氧化氮合酶钙敏感受体人脐静脉内皮细胞
- 小凹蛋白-1在脐静脉内皮细胞CaR介导NO生成中的作用和机制被引量：17
- 2011年
- 目的:探讨小凹蛋白-1(Cav-1)在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙敏感受体(CaR)介导NO生成中的作用和机制。方法:利用转染技术将构建的Cav-1干扰质粒(Cav-1 shRNA)转染入HUVECs,随机分为:(1)对照组;(2)CaR激动剂(精胺)组;(3)精胺+Ca2+组;(4)CaR负性变构调节剂(Calhex231)+精胺组;(5)Calhex231+精胺+Ca2+组;(6)非律平(filipin)+精胺组;(7)filipin+精胺+Ca2+组;(8)空质粒(vehicle)+精胺+Ca2+组;(9)Cav-1 shRNA+精胺组;(10)Cav-1 shRNA+精胺+Ca2+组。Western blotting检测Cav-1 shRNA转染后HUVECs中CaR和Cav-1蛋白表达,通过NO荧光探针DAF-FM DA负载HUVECs检测细胞内NO的生成;并在提供充足底物的条件下检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性。结果:Cav-1干扰后,Cav-1蛋白表达降低,同时CaR的膜蛋白表达降低(P<0.05),CaR的浆蛋白表达无变化(P>0.05)。无论细胞外为零钙液或含钙液时,精胺(2 mmol/L)刺激CaR时均引起eNOS活性和NO含量增加(P<0.05),其中细胞外液为含钙液时,eNOS活性和NO含量增加较细胞外为零钙液时更明显(P<0.05),Calhex231(1μmol/L)可阻断(细胞外为零钙液)或降低(细胞外液为含钙液)精胺介导的上述作用(均P<0.05);此作用亦可被filipin(1.5 mg/L)或Cav-1基因沉默减弱(细胞外液为含钙液)(均P<0.05)。结论:HUVECs中Cav-1对CaR介导的NO生成有促进作用,其机制可能与Cav-1影响CaR膜定位及对激动剂反应性有关。
- 王振焕胡清华钟华钟华陈雄英邓峰美何芳
- 关键词：小凹蛋白-1人脐静脉内皮细胞一氧化氮
- 血清转化生子因子β1水平与新疆汉族人原发性高血压的关系被引量：1
- 2009年
- 为探讨新疆汉族原发性高血压(EH)患者血清转化生子因子β1(TGF-β1)水平与血压及高血压之间的关系。在流行病学调查的基础上采用病例-对照研究方法,对新疆300名汉族(150名高血压患者,150名正常对照者)人群进行调查问卷,测量血压、身高、体重等相关指标,用双抗体夹心ELISA法检测两组的血清TGF-β1浓度。结果显示:1.新疆汉族人TGF-β1水平与舒张压成正相关(r=1.141,P<0.05)。2.EH组血清TGF-β1浓度(35.27±12.12ng/mL)与对照组(31.47±11.82 ng/mL)差异没有统计学意义,TGF-β1浓度与性别、年龄无关。3.超重、肥胖、腹部肥胖、高胆固醇、高血糖是新疆汉族人群的高血压危险因素。由此可知,TGF-β1浓度升高可能参与了汉族人EH的发病过程,血清TGF-β1浓度升高可以与其他环境因素(肥胖)发生交互作用,增加了个体患高血压的危险度。
- 赵丹胡清华邓峰美钟华郭淑霞程江张万江张春军王雪雯石晓鹏杨建峰王振焕陈雄英何芳
- 关键词：原发性高血压新疆汉族
- 转化生长因子β_1基因标签单核苷酸多态性与新疆汉族原发性高血压相关性研究
- 2010年
- 何芳邓峰美钟华杨建峰石晓鹏王刚王振焕陈雄英
- 关键词：原发性高血压转化生长因子单体型频率单核苷酸患病风险
- 小凹蛋白-1在脐静脉内皮细胞CaR介导Ca<'2+>内流和NO生成中的作用和机制
- 目的:探讨小凹蛋白-1（Cav-1）在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙受体(CaR)介导Ca2+内流和一氧化氮(NO)生成中的作用和机制。
方法: (1) 用胰酶消化法对HUVECs原代培养并用形态学及免疫...
- 王振焕
- 关键词：小凹蛋白-1脐静脉内皮细胞免疫细胞化学法特异性抗体检测
- 文献传递
- 脂氧素对脂多糖诱导的脐静脉内皮细胞通透性的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究脂氧素对脂多糖诱导的脐静脉内皮细胞通透性的影响。
- 庞花艳黄引平刘忠杰易攀龚建明郝华吴萍周洁蔡蕾黄艳君叶笃筠王振焕
- 关键词：脂氧素类脐静脉毛细血管通透性
- 细胞外钙受体及其在心血管系统中的作用被引量：2
- 2009年
- 细胞外钙受体也称为钙敏感受体(extracellular calcium sensing receptor,CaR),对调节机体细胞外钙的平衡发挥着重要作用。该受体不仅分布在甲状旁腺、骨、肾、肠这些与钙转移和钙稳态调节有关的器官,还广泛分布于许多其他与钙的稳定无关的组织细胞中,并通过PLC,PIK和MAPK等细胞内信号转导途经起着除钙稳态调节以外重要的细胞内作用,如保护细胞抗凋亡、细胞增殖等生物学作用,在心血管系统中,CaR也有重要的生理病理作用,本文综述了近些年关于CaR的结构、功能和信号转导及它在心血管系统中的作用。
- 王振焕何芳
- 关键词：心血管疾病信号转导
- TGF-β1 rs1800469基因多态性与新疆汉族原发性高血压的相关性研究被引量：6
- 2010年
- 为研究转化生长因子β1(TGF-β1)基因单核苷酸多态(SNP)rs1800469及血浆水平与新疆汉族原发性高血压(EH)的关系。采用整群抽取随机抽样的方式,以新疆沙湾县732名汉族人(EH组365人,对照组367人)为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集血样。用双抗体夹心法(ELISA试剂盒)测量TGF-β1血浆浓度。SNaPshot方法进行基因分型。rs1800469基因型及等位基因在EH组和对照组分布差异无显著性(P>0.05)。TGF-β1血浆水平在EH组与对照组各基因型和等位基因之间无差异(P>0.05)。结果表明:在新疆汉族人群中TGF-β1基因rs1800469位点存在C/T分子变异,与原发性高血压缺乏关联。同时TGF-β1基因rs1800469位点多态性与TGF-β1血浆水平不相关。
- 杨建峰石晓鹏赵丹邓峰美王振焕陈雄英王刚何芳
- 关键词：TGF-Β1基因多态性血浆水平高血压新疆汉族单核苷酸多态
- 小凹蛋白-1和钙受体在人的脐静脉内皮细胞的表达被引量：5
- 2010年
- 为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中小凹蛋白-1与细胞外钙受体表达及定位,为进一步功能研究提供理论依据,采用Western-blot和Rt-PCR及免疫荧光技术检测HUVEC中小凹蛋白-1与细胞外钙受体mRNA和蛋白表达及定位。结果显示:(1)形态学观察和免疫细胞化学法测Ⅷ因子抗原,95%以上的细胞呈阳性着色,证实细胞为HUVEC。(2)RT-PCR检测到HUVEC中459bp和260bpmRNA表达,Western-blot测到HUVEC中22KD和150-160KD蛋白表达。(3)免疫荧光检测到小凹蛋白-1与细胞外钙受体定位于人脐静脉内皮细胞膜。由此可知,人的HUVEC中有小凹蛋白-1与细胞外钙受体表达,两者是否共定位及其功能有待进一步研究。
- 王振焕陈雄英胡清华钟华邓峰美何芳
- 关键词：小凹蛋白-1脐静脉内皮细胞
- 转化生长因子β1基因标签单核苷酸多态性与新疆汉族原发性高血压相关性研究
- 目的:研究转化生长因子β(TGF-β)基因标签单核苷酸多态(tSNP)与新疆汉族原发性高血压(EH)的关系。方法:以新疆沙湾县732例汉族人(EH组365例,对照组367例)为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集...
- 何芳邓峰美钟华杨建峰石晓鹏王刚王振焕陈雄英
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