王作云
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技厅项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- p53^(-/-),k-ras基因型小鼠肺癌细胞株的建立与鉴定被引量：2
- 2009年
- 背景与目的:在肺癌的基础研究中,有特定基因变化的肺癌细胞株非常重要。k-ras激活和p53突变在肺癌的发生发展中有重要作用。本研究通过诱导小鼠肺癌生成,对肿瘤进行培养,建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株。方法:用病毒吸入法,对p53loxp/loxp,Loxp-Stop-Loxpk-ras G12D转基因小鼠肺部细胞进行条件性基因敲除,诱导小鼠产生肺癌。通过HE染色和PCR法对小鼠肺癌组织进行组织病理学和基因型鉴定,对肿瘤细胞原代培养建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株,并通过软琼脂克隆形成实验、生长曲线分析和核型分析对细胞株进行验证。结果:成功建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺腺癌细胞株。p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株体外生长速度与人肺腺癌细胞A549生长速度接近,能够在软琼脂中形成肉眼可见的克隆。结论:成功建立p53-/-,k-ras基因型的小鼠肺癌细胞株,为下一步的实验研究打下了基础。
- 孙艺华李立潘俊叶小磊王作云冯艳陈海泉
- 关键词：肺癌小鼠细胞株原代培养
- p53缺失协同K-ras^(G12D)激活对细胞成瘤性的影响被引量：1
- 2009年
- 为研究p53缺失和K-ras突变在肺癌发生中的作用,建立了p53条件性敲除,K-rasG12D条件性激活(p53loxp/loxp、Lox-Stop-Lox-K-rasG12D)的基因嵌合小鼠,获得条件性基因嵌合小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)。体外研究发现,内源性p53缺失协同K-rasG12D的突变激活可促进MEFs的分裂、增殖和转化;体内研究证实,该协同突变激活可快速诱发肺部肿瘤的产生,组织病理学分析表明该肺癌类型为腺癌。上述研究工作为进一步认识p53和K-ras在肺癌发生发展中的作用打下了基础。
- 王作云孙艺华叶小磊李立季红斌刘新垣王毅刚
- 关键词：P53K-RAS细胞转化肺腺癌
