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乳腺组织特异表达h—LTF转基因山羊研究: 2010年; 该研究以改构的hLTF基因为目的基因，利用基因打靶技术将其定位敲入到山羊胎儿成纤维细胞的β-casein基因座，检测阳性的基因打靶克隆扩增后用于体细胞核移植，核移植胚胎体外培养发育到2-细胞期后进行胚胎移植。结果表明，通过研究首次建立了山羊胎儿成纤维细胞和乳腺上皮细胞乳蛋白基因座高效基因打靶的技术体系以及基因打靶体细胞核移植技术体系。经过G418药物抗性筛选后获得了稳定整合人lactoferrin基因的转基因阳性细胞克隆14个，体内成熟卵母细胞作受体的核移植囊胚率为64．8％，体外成熟卵母细胞作受体的核移植囊胚率为51．7％。利用DMSO-SMGT技术制备转基因动物高阳性率为56．5％，获得了转基因小鼠8只、转基因兔155只、转基因山羊2只。在转基因后代的乳腺里，外源基因得到了表达，并且具有生物活性，建立了DMSO-SMGT技术体系。; 潘庆杰柳林李兰闵令江李美玉孙玉江沈伟; 关键词：核移植转基因山羊乳腺生物反应器

德州驴心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的克隆及序列分析被引量：3: 2010年; 本试验对德州驴心脏脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因进行了克隆测序,并与GenBank中11个物种相应基因编码区核苷酸序列、氨基酸序列进行了比对分析,同时通过最小进化法(ME法)、邻接法(NJ法)和非加权组平均法(UPGMA法)对H-FABP基因编码区核苷酸序列进行了物种间分子系统进化树分析。结果表明,德州驴H-FABP基因由4个外显子和3个内含子组成,外显子1、2、3、4大小分别为73、173、1025、7 bp,内含子1、2、3大小分别为3500、1980、1425 bp。CDS序列全长为405 bp,前体氨基酸数为134个;德州驴与马、野猪、人、牛、山羊、牦牛、大鼠、小鼠、红原鸡、绿头鸭、斑马鱼各物种在H-FABP基因编码区核苷酸序列上有较高的保守性,同源性大小分别为96.79%、91.36%、89.14%、88.89%、88.89%、88.64%、84.07%、83.46%、75.80%、74.81%、67.90%;3种方法构建的物种间分子系统进化树基本一致,并且3种分子进化树结果与动物学分类一致,表明H-FABP基因适合于构建不同物种间的系统进化树。; 李雷孙玉江柳林闵令江迟良潘庆杰; 关键词：德州驴 H-FABP基因克隆分子系统进化

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柳林