林桂先
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 发文基金：博士科研启动基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生哲学宗教更多>>
- bFGF基因转染对血管内皮细胞迁移的影响及机制被引量：6
- 2010年
- 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因转染对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)迁移能力的影响,并探讨其可能机制。方法通过基因亚克隆构建真核表达载体pcDNA3.1-bFGF,利用脂质体介导将bFGF基因导入HUVECs内,通过RT-PCR和ELISA法检测基因的表达;bFGF基因转染后的HUVECs通过Transwell小室法检测其迁移能力的变化;W estern blot法检测转染后的细胞Raf-1、细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)和黏着斑激酶(FAK)蛋白表达变化。结果成功构建了表达载体pcDNA3.1-bFGF,该载体转染HUVECs后,bFGF mRNA和蛋白均显著增加。转染bFGF基因可使HUVECs的体外迁移能力增强,上调ERK2和FAK蛋白的表达,但对Raf-1蛋白表达无影响。结论bFGF基因转染能促进血管内皮细胞的迁移,其作用机制可能与上调ERK2和FAK蛋白表达有关。
- 徐彬武晓英林桂先毛建文
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子基因转染血管内皮细胞迁移
- 一种HCV靶向性M1GS核酶的构建及其体外活性被引量：3
- 2011年
- 目的构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS。方法针对HCV基因组的保守区（5′UTR）设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基（M1 RNA）的3′末端,从而构建一类靶向性M1GS核酶。结果体外切割实验表明,所构建的核酶（M1GS-HCV/C67）对HCV5′UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列67~68 nt之间,属于特异性切割。结论构建了一种对HCV5′UTR具有靶向切割活性的M1GS核酶,为胞内反义效应及动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础。
- 张文军刘碧瑜周玉珍林桂先张欣李红枝
- 关键词：丙型肝炎病毒
- P-糖蛋白非多药耐药功能的研究进展
- 2012年
- P-糖蛋白(P-gp)是多药耐药基因MDR1编码的蛋白,其介导肿瘤产生多药耐药性的药泵功能已明确。但它也广泛的分布于人体的肠、肝、肾、等部位的管腔上皮细胞和脑毛细血管内皮细胞以及免疫细胞,其在这些正常细胞中的生理功能却尚未完全明确。本文综述了正常组织中P-gp的表达分布及其在正常组织中非耐药功能的研究进展。P-gp非多药耐药功能的研究将拓展P-gp的功能研究,揭示其与疾病发生的潜在关系,为探索和开发新的药物提供新的研究思路。
- 林桂先毛建文张文军
- 关键词：P-糖蛋白生理功能离子通道
- 碱性成纤维细胞生长因子荧光真核表达载体构建及对过氧化氢诱导血管内皮细胞凋亡的影响
- 2011年
- 背景:已证实外源性碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)可抑制血管内皮细胞凋亡。目的:构建表达bFGF的荧光真核表达载体,探讨其对过氧化氢(H2O2)诱导的血管内皮细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响。方法:通过基因亚克隆构建荧光真核表达载体pcDNA3.1-bFGF-GFP,利用脂质体介导将bFGF基因导入人脐静脉内皮细胞内,通过荧光观察和RT-PCR检测基因的表达。实验分为3组,对照组(转染pcDNA3.1)、过氧化氢组(转染pcDNA3.1+H2O2)和bFGF转染+过氧化氢组(转染pcDNA3.1-bFGF-GFP+H2O2),流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot检测caspase-3 P17活性亚单位和Bax蛋白表达。结果与结论:成功构建荧光真核表达载体pcDNA3.1-bFGF-GFP,该载体转染人脐静脉内皮细胞后,bFGF mRNA显著增加,并可观察到绿色荧光。与对照组相比,过氧化氢组细胞凋亡率和caspase-3 P17活性亚单位、Bax蛋白的表达量都明显增加(P<0.01),而bFGF转染+过氧化氢组的细胞凋亡率和caspase-3 P17活性亚单位、Bax蛋白的表达量则比过氧化氢组显著降低(P<0.01)。证实bFGF基因转染能抑制过氧化氢诱导的血管内皮细胞凋亡,其作用机制可能与调控Bax蛋白表达和caspase-3活性有关。
- 徐彬林桂先武晓英毛建文
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子血管内皮细胞凋亡BAX蛋白
