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从江香猪PHKG2基因超表达载体和RNA干扰载体的构建及其表达被引量：1: 2018年; 旨在克隆从江香猪磷酸化酶激酶γ2(phosphorylase kinase gamma 2,PHKG2)基因编码区,并对PHKG2基因功能进行初步探究。本研究利用RT-PCR法扩增从江香猪PHKG2基因完整CDS区。通过构建pEGFP-N3-PHKG2超表达载体,设计并合成4对针对从江香猪PHKG2基因的RNAi表达载体,瞬时转染至C2C12细胞株和从江香猪肾细胞中,以正常生长的细胞为空白对照,24h后检测各个重组载体的绿色荧光蛋白的表达情况。48h后提取细胞总RNA,利用qRT-PCR方法检测目的基因PHKG2和糖原代谢相关基因糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase,muscle form,PYGM)、肌肉糖原合成酶(glycogen synthase 1(muscle),GYS1)、磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyce rate mutase,PGAM2)基因mRNA的表达情况,并且测定各组细胞中的糖原含量。结果表明,经过双酶切、测序检测以及脂质体瞬时转染至C2C12细胞中,验证超表达载体pEGFP-N3-PHKG2和4对RNAi表达载体均构建成功。转染至从江香猪肾细胞后,相对于空白对照(Blank)和阴性对照(pEGFP-N3),超表达载体pEGFP-N3-PHKG2能极显著提高PHKG2基因的表达量(P<0.01),同时显著上调PGAM2、PYGM基因的表达量(P<0.05),并且显著降低细胞中糖原的含量(P<0.05)。各RNAi载体中,相对于空白对照(Blank)和阴性对照(NC),shRNA-1的干扰效率较高,极显著下调PHKG2基因的表达量(P<0.01),显著下调PGAM2、PYGM、GYS1基因的表达量(P<0.05),并且显著升高细胞中糖原含量(P<0.05)。shRNA-2极显著下调PHKG2基因的表达量(P<0.01);shRNA-3对PHKG2基因的表达也能起到显著的干扰作用(P<0.05);shRNA-4对于所检测的4个基因干扰效果不明显;shRNA-2、shRNA-3、shRNA-4转染细胞后,细胞中糖原含量升高水平不明显。PHKG2基因超表达和RNAi后可分别明显上调和抑制PHKG2、PYGM、PGAM2、GYS1基因的表达,并且分别降低和提高糖原含量,可能是影响从江香猪猪肉品质的重要候选基因,为进一步研究PHKG2基因在细胞糖原代谢通路�; 王圆圆许厚强许厚强陈伟陈伟周迪; 关键词：从江香猪超表达 RNA干扰

贵阳市中小民营企业员工离职原因分析: 现代企业的竞争归根到底是人才的竞争，员工离职问题是人力资源研究关注的问题，同时也是企业所关注的重要问题。员工的离职给企业带来许多不良的影响。本研究通过实证研究的形式，分析了贵阳市民营企业员工离职的主要原因以及相关问题，将...; 杨涛; 关键词：民营企业企业管理人事管理员工离职; 文献传递

含磺酸酯基团的1,4-戊二烯-3-酮类化合物、其制备方法及用途: 本发明公开了一种含磺酸酯基团的1,4-戊二烯-3-酮类化合物，其结构通式(I)如下：其中:苯环上的取代磺酸酯基为邻位、间位、对位；R<Sub>1</Sub>为C<Sub>1-6</Sub>烷基、苯基、邻，间，对位单取代或...; 宋宝安吴琴杨涛胡德禹薛伟金林红; 文献传递

含肟酯类姜黄素衍生物的合成及抗肿瘤活性研究被引量：3: 2013年; 采用生物活性因子拼接的方法将肟酯引入单羰基姜黄素衍生物1,5-二取代芳基-1,4-戊二烯-3-酮化合物中,通过醚化、肟化、酰化,最后酯化合成11个不对称1,5-二取代-1,4-戊二烯-3-酮肟酯类姜黄素衍生物,其结构经IR、1 H NMR和元素分析确证.初步生物活性测试结果表明,部分化合物具有一定的体外抗肿瘤活性.; 薛伟陈玉仇秋娟龚华玉李海畅杨涛; 关键词：姜黄素肟酯抗肿瘤活性

岩溶隧道整体式道床上浮机理及减压排水抗浮对策研究综述: 2021年; 整体式道床普遍应用于轨道交通隧道中。其优点显著,但另一方面,若发生病害,道床、隧道结构治理及修补就面临较大困难。当前国内外已运营的采用整体道床的铁路隧道中,发生道床上浮变形现象并不鲜见,尤其是在岩溶及地下水发育地区的隧道中发生道床上浮概率较大。本文通过对相关研究进行总结,针对轨道交通隧道道床上浮问题,分析道床上浮发生的原因,提出相关应对措施,希望能够引起参建各方重视,加强建设各环节控制,减少道床上浮现象,确保运营安全。; 杨涛赵鸿鹰邹世杰聂中广戴梁; 关键词：岩溶隧道上浮

供给侧改革背景下的工匠精神价值研究: 2017年; 2015年以来,我国经济发展模式逐渐迎来了新的转型和转变。为此,在加强传统需求管理的同时,还要启动供给侧改革。文章首先对供给侧结构改革、工匠精神定义和内涵进行释义,对二者之间的关系进行分析,阐述发扬工匠精神的重要意义,从供给侧结构性改革角度来发掘工匠精神背后的价值,为促进供给侧改革提供精神动力,为新的经济发展常态下建设创新型国家和社会提供可行性意见。; 杨涛

双极型运算放大器宏模型温漂特性的研究: 该文首先介绍了宏模型的建立方法:简化电路法和端口特性构造法,并对各种方法进行了比较研究;运算放大器直流宏模型和交流小信号宏模型以及由两种模型混合构成的混合宏模型,都是用构造法建立的运算放大器的宏模型,文章对各个宏模型进行...; 杨涛; 关键词：宏模型温度漂移运算放大器失调电压模型参数; 文献传递

贵州从江香猪PDK4、FGF10基因的克隆及组织表达分析被引量：11: 2017年; 试验旨在克隆获得PDK4、FGF10基因,并研究大白猪与从江香猪不同组织中PDK4、FGF10基因mRNA的表达差异。采用RT-PCR分别克隆从江香猪PDK4、FGF10基因并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR技术检测PDK4、FGF10基因在大白猪和从江香猪不同组织中mRNA的相对表达量。结果显示,从江香猪PDK4基因的编码区全长1 224bp,编码407个氨基酸;FGF10基因的编码区全长636bp,编码211个氨基酸。经BLAST软件进行同源性比对,发现从江香猪PDK4基因与羊、马、人的核苷酸序列同源性分别为93%、92%和91%;FGF10基因与羊、牛、人、鼠的核苷酸序列同源性分别为94%、93%、93%和90%。由PDK4基因系统进化树可知,从江香猪与牛、绵羊亲缘关系较近;由FGF10基因系统进化树可知,从江香猪与绵羊、牛、人、猕猴亲缘关系较近,与小鼠和鸡亲缘关系较远。实时荧光定量PCR结果显示,在从江香猪不同组织中,PDK4基因在肾脏中的表达量最高,在胃和脂肪中表达量较高,FGF10基因在胃中表达量最高,在肾脏和脂肪中表达量较高,两个基因在背最长肌中的表达量均最低;在大白猪的不同组织中,PDK4、FGF10基因在脂肪中的表达量均最高,PDK4基因在背最长肌中的表达量最低,而FGF10基因在心脏中表达量最低。本试验成功克隆了从江香猪PDK4、FGF10基因,并检测了其在大白猪与从江香猪不同组织中的表达,为进一步研究PDK4、FGF10基因在脂质代谢及脂肪沉积等方面的调控作用提供科学依据。; 杨洋杨洋许厚强陈伟陈伟周迪徐敏孙成娟张青青赵焕平孙成娟; 关键词：从江香猪实时荧光定量PCR

一种用于隧道中防堵塞的主动排水方法及结构: 本发明公开了一种用于隧道中防堵塞的主动排水方法及结构，利用毛细现象，在隧道的环向和边墙处设置毛细给水结构，并对水质进行过滤，实现对隧道进行主动吸水及过滤，过滤后的水体通过排水管排出，同时该过滤后的水体能持续对排水管进行管...; 刘宁杨涛邹世杰方钱宝陈坤; 文献传递

一种防治水稻稻飞虱的异唑虫嘧啶悬浮剂及其制备方法: 本发明涉及一种防治水稻稻飞虱的异唑虫嘧啶悬浮剂及其制备方法。所述异唑虫嘧啶悬浮剂包括如下组成：异唑虫嘧啶10％；润湿分散剂10‑14％；增稠剂0.6‑1％；防冻剂0.8‑8％；消泡剂0.5‑0.7％；余量为去离子水；所述...; 张罗曼吴斌汪玲玲杨涛潘成丽张婷婷沈红琴穆世梅

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杨涛

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