杨晓燕 作品数:18 被引量:91 H指数:7 供职机构: 西北大学生命科学学院国家微检测系统工程技术研究中心 更多>> 发文基金: 陕西省科技攻关计划 陕西省自然科学基金 山西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 化学工程 生物学 理学 更多>>
中华眼镜蛇蛇毒神经生长因子(NGF)的全层析提取工艺和初步药用研究 边六交 杨晓燕 吴鹏 祁淼 该研究以在我国具有丰富资源的蛇毒为原材料,开发出了能够用于工业化生产的从蛇毒中提取NGF的工艺路线,并对所获得的NGF进行了初步药用研究。本研究首先找到了一种以扩张柱床吸附技术为核心的从蛇毒中富集NGF的方法,并结合其它...关键词:关键词:神经生长因子 眼镜蛇蛇毒 色谱法 激光与灭活原生质体融合技术在红霉素高产菌株选育中的应用研究 该文采用双亲灭活原生质体融合及He-Ne激光诱变技术对红霉素链霉菌(Streptomyces erythreus,简称SE)和龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus,简称SR)灭活原生质体种间融合进行了... 杨晓燕关键词:红霉素链霉菌 HE-NE激光 三步柱色谱法从江浙蝮蛇蛇毒中分离纯化类凝血酶 被引量:4 2006年 建立了一种用CM Sepharo se CL-6B阳离子交换、DEAE Sepharo se Fast F low阴离子交换和Sephadex G-75凝胶排阻三步柱色谱从江浙蝮蛇蛇毒中分离纯化类凝血酶的方法。在实验室小柱分离方案的基础上,对该纯化工艺进行了放大。当上样量达实验室小柱的25倍时,所得类凝血酶的质量指标与实验室小柱基本一致。采用该法所得的蝮蛇类凝血酶经Sh im-pack D io l-300高效凝胶排阻柱测得其相对分子质量约为33 500,用Sh im-pack VP-OD S反相色谱柱检测其纯度约为96%。从江浙粗蛇毒中提取类凝血酶时,类凝血酶的总质量收率约为0.3%,总活性收率约为64%,比活可达2 000U/m g。 边六交 杨晓燕 刘莉关键词:类凝血酶 蛇毒 分离纯化 二元流动相液相色谱体系中一个新的三参数溶质保留方程(英文) 2004年 目的 建立一个新的描述溶质在二元流动相液相色谱体系中保留的三参数方程并以实验进行验证。方法 通过研究液相色谱体系中溶质分子和溶剂或稀释剂分子的相互作用 ,得到一个溶质在液相色谱体系中保留的三参数方程 ,并用不同极性的溶质分子的甲醇 水、乙腈 水和四氢呋喃 水反相色谱体系和极低流动相浓度下的正相色谱体系对此方程进行了验证。结果 在全浓度流动相范围内 ,实验数据均能用此方程良好描述 ,且保留方程中的 3个参数与所研究的色谱体系的特征紧密相关。 边六交 杨晓燕关键词:液相色谱 脲或盐酸胍溶液中变性溶菌酶复性过程中集聚体的研究 被引量:10 2005年 建立在蛋白质变性-复性三态模型的基础上,给出了一个描述在变性液中变性蛋白质复性时蛋白质浓度和其复性率的关系式.通过这个关系式,可以获得两个重要的描述蛋白质变性-复性体系特征的参数,一个是包含在一个集聚体分子中的变性蛋白质的分子数目n,另一个是蛋白质从原始态到形成集聚体过程中的表观集聚平衡常数K.以三种溶菌酶在脲和盐酸胍溶液中的变性-复性过程对此方程进行了验证,结果表明所给出的方程能够很好地描述三种溶菌酶在这两种变性液中的复性结果,三种溶菌酶在两种变性液中有形成二分子集聚体的趋势.变性溶菌酶在复性过程中的电泳和高效凝胶排阻色谱也同时能够监测到复性过程中集聚体的形成,并且监测结果与上述方程所得的结果一致. 边六交 杨晓燕 刘莉关键词:溶菌酶 聚体 盐酸 蛋白质变性 蛋白质复性 关系式 四环素产生菌15^#菌株的选育 被引量:1 1994年 报道了采用放线菌菌丝准性杂交的方法选育出四环素产生菌15 ̄#新菌株。研究结果表明:新菌株与亲本相比较,具有良好的耐低溶解氧浓度的特点,即在相同条件下,增加摇瓶装量,新菌株发酵单位高出对照17%。 陈五岭 杨晓燕 郭宝珠 景建洲关键词:四环素 溶解氧浓度 氦氖激光在红霉素链霉菌和龟裂链霉菌灭活原生质体融合中的应用Ⅱ──融合子的分析鉴定 被引量:12 1998年 通过比较He-Ne激光和聚乙二醇(PEG)对红霉素链霉菌(s.erythreus简称SE)和龟裂链霉菌(S.rimosus简称SR)灭活原生质体的诱导融合,筛选得到几株红霉素产量与亲本相比有明显差异的融合子,通过对融合子酯酶同工酶谱、产抗能力及遗传稳定性分析,结果表明:融合子酯酶同工酶谱与亲本相比,酶带条纹数、迁移率等特征发生了显著的改变,表明其遗传物质发生了杂交重组,融合子产抗能力与亲本的相比,最多提高了28.04%,融合子具有良好的遗传稳定性. 陈五岭 杨晓燕 姚胜利关键词:氦氖激光 酯酶同工酶 链霉菌 一种从蛇毒中纯化神经生长因子的新工艺 被引量:7 2004年 为了能从中华眼镜蛇蛇毒中简单快速地分离纯化神经生长因子 (一种治疗各种神经性损伤和神经退行疾病的药物 ,简称NGF) ,采用不同的色谱柱联用的方式对NGF的纯化工艺进行了研究。结果表明 ,采用DEAE SepharoseF F 和SephadexG 5 0二步柱色谱工艺可以从蛇毒中快速分离得到神经生长因子。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和反相高效液相色谱分析 ,证明所得到的NGF为单一组分 ,相对分子质量约为 2 90 0 0。对 8d龄鸡胚背根神经节采用体外培养法 ,结果证明 ,所得NGF具有明显的促进神经纤维生长的生物活性。 吴鹏 杨晓燕 边六交关键词:蛇毒 神经生长因子 纯化 原核表达融合型血管生成抑制剂Kringle 5发酵条件的优化和初步纯化 被引量:7 2006年 在构建融合型Kringle5原核表达重组菌BL21(DE3)pET32a/K5的基础上,通过改变培养基的成分,确定了适宜于重组菌生长和融合Kringle5蛋白表达的培养基。采用正交实验方法,对融合型血管生成抑制剂Kringle5原核表达重组菌的发酵条件进行了优化,通过发酵罐中重组菌的分批培养,确定了培养液中的最佳溶氧量。采用优化后的发酵工艺,在20L发酵罐中融合Kringle5的表达量可达0.59g.L·1。最后在Cu2+螯合的SepharoseFastFlow层析介质上对融合Kringle5进行了初步纯化,其纯度约为80%。 边六交 党红艳 杨晓燕关键词:分批发酵 发酵条件优化 抗菌肽Cecropin B—肿瘤血管生长抑制因子Kringle5融合蛋白表达载体的构建及其表达 被引量:4 2005年 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽Cecropin B(CB)基因,从ThioA/L15-7上卸下肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)基因,将两者按正确的阅读框架融合并定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a上,构建成pET32a/CB-K5重组载体。重组载体转化BL21(DE3)细胞后,提取质粒进行PCR鉴定和序列分析,证明重组质粒pET32a/CB-K5阅读框架和融合基因序列均与预期相符。实验结果显示,成功地构建了抗菌肽CecropinB(CB)和肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)融合蛋白的表达载体pET32a/CB-K5。转化E.coliBL21(DE3),SDS-PAGE分析显示,在IPTG诱导下,融合蛋白以包涵体的形式在重组转化菌株中获得高效表达,表达量达到菌体总蛋白的50%。 樊钰虎 冯瑄 杨晓燕 边六交关键词:抗菌肽CECROPIN 融合表达载体