杨丽红
- 作品数:13 被引量:13H指数:2
- 供职机构:石河子大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生艺术更多>>
- 单核细胞增生性李斯特菌与胎儿弯杆菌的检测试剂及应用
- 本发明公开了单核细胞增生性李斯特菌与胎儿弯杆菌的检测试剂,包含能扩增单核细胞增生性李斯特菌InlJ基因和胎儿弯杆菌16SrDNA基因的2对特异性引物;公开了其制备方法:单核细胞增生李斯特菌InlJ基因和胎儿弯杆菌16Sr...
- 孟庆玲乔军陈创夫丁波张再超田振中蔡扩军杨丽红
- 一种单核细胞增生性李斯特菌prfA基因缺失菌的构建方法
- 本发明为单核细胞增生性李斯特菌prfA基因缺失菌的构建方法,主要包括以下步骤:根据选择的<I>prfA</I>基因和<I>gfp</I>基因的靶序列分别进行引物的设计;克隆载体pMD-T-△prfA-gfp的构建;重组穿...
- 孟庆玲乔军丁波张再超杨丽红田振中蔡扩军陈创夫
- 文献传递
- 单核细胞增生李斯特菌prfA基因重组菌的构建及其生物学特性研究被引量:1
- 2012年
- 为制备单核细胞增生李斯特菌(LM)减毒的prfA基因重组菌,本研究通过构建重组质粒pKSV7-ΔprfA-gfp,电转化至LM TA感受态细胞中,将绿色荧光蛋白基因gfp插入LM的prfA基因第25 bp~93 bp之间,在42℃和10μg/mL氯霉素的双重选择压力下,筛选LM重组菌(rLM-ΔprfA-gfp),并对其生物学特性进行鉴定。试验结果表明,重组菌与亲本菌相比具有相似的体外生长特性,溶血素基因(hly)mRNA的转录水平降低;对小鼠的毒力显著减弱,其LD50由105.53升高到109.79,对肝、脾、肾的损伤不明显;免疫保护力试验显示重组菌与LM TA灭活疫苗的保护率分别为90%和35%,表明rLM-ΔprfA-gfp比传统疫苗具有更高的保护力。本研究构建的rLM-ΔprfA-gfp具有良好的遗传稳定性,并且具有较好的免疫原性,为LM活疫苗载体和分子标记疫苗的研制奠定了基础。
- 丁波孟庆玲乔军陈创夫才学鹏张再超杨丽红
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌同源重组
- 一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法
- 本发明涉及一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法,属生物技术领域。主要包括以下步骤:根据胞外丝氨酸蛋白酶XAoz1基因序列,设计特异性引物并扩增目的片段;将扩增的目的片段PCR产物与载体pMD19-T连接构建重组...
- 孟庆玲乔军王俊伟王为升张再超蔡扩军杨丽红陈创夫赵春光
- 文献传递
- Sigma B基因缺失对单核细胞增生性李斯特菌毒力的影响被引量:1
- 2013年
- 为了解缺失SigmaB基因对单核细胞增生性李斯特菌(LM)的毒力影响。通过体外生长试验、巨噬细胞RAW264.7的粘附与侵袭试验、小鼠肝脾载菌量试验、毒力基因转录水平试验、小鼠LD50试验来研究缺失株(LM-XS5-△SigmaB)的毒力变化。结果显示,与野毒株相比,缺失株体外生长能力减弱、侵袭率和粘附率降低,小鼠肝脾载菌量显著减少,毒力基因(inlA、inlB、hly、prfA、actA)的转录水平降低,而小鼠LD50升高。可见,SgmaB基因对LM的毒力具有重要的调控作用,为LM基因缺失疫苗和活疫苗载体的研发可资借鉴。
- 杨丽红孟庆玲乔军才学鹏张再超蔡扩军王为升王俊伟陈创夫
- 关键词:单核细胞增生性李斯特菌粘附率LD50
- SigmaB基因缺失对单核细胞增生李斯特菌致病性和环境应激能力的影响
- 单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种兼性胞内寄生的革兰氏阳性致病菌,生存能力强,存在范围广。LM主要通过消化道引起动物和人的急性感染,对畜牧业和人类健康造成了巨大的威胁,因此,...
- 杨丽红
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌分子鉴定
- 文献传递
- 单核细胞增生性李斯特菌与胎儿弯杆菌的检测试剂及应用
- 本发明公开了单核细胞增生性李斯特菌与胎儿弯杆菌的检测试剂,包含能扩增单核细胞增生性李斯特菌InlJ基因和胎儿弯杆菌16SrDNA基因的2对特异性引物;公开了其制备方法:单核细胞增生李斯特菌InlJ基因和胎儿弯杆菌16Sr...
- 孟庆玲乔军陈创夫丁波张再超田振中蔡扩军杨丽红
- 文献传递
- RsbV基因缺失对单核细胞增生李斯特菌毒力的影响被引量:6
- 2013年
- 【目的】探讨RsbV基因缺失对单核细胞增生李斯特菌(LM)毒力的影响。【方法】运用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术扩增出LM-XS5野毒株的RsbV基因缺失片段,然后用同源重组方法构建RsbV基因缺失株;通过肝脾细菌计数、LD50的测定和毒力基因转录水平的检测(qRT-PCR),研究LM野毒株和缺失株在毒力上的差异。【结果】RsbV基因缺失株LD50是野毒株的104倍(P<0.01);缺失株在小白鼠肝和脾内的载菌量均明显减少(P<0.05);实时荧光定量PCR检测结果发现,缺失株4个毒力因子的表达水平均显著低于野毒株(P<0.05);缺失株免疫小白鼠后对野毒株的攻毒具有良好的免疫保护作用。【结论】RsbV对LM的4个毒力基因inlA、LLO、PlcA和PrfA的表达具有调控作用;RsbV基因缺失株毒力明显减弱,但仍保留了较强的免疫原性。
- 张再超孟庆玲乔军陈创夫才学鹏杨丽红王为升蔡扩军
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌毒力同源重组
- 单核细胞增生李斯特菌新疆野毒株XS5 SigmaB操纵子的克隆、序列分析及其编码蛋白结构预测被引量:1
- 2012年
- 为了解单核细胞增生李斯特茵(Listeda monocytogenes LM.)新疆野毒株XS5SigmaB操纵子的分子生物学特征。对LM-XS5的SigmaB操纵子部分基因序列进行了克隆与序列分析,预测该操纵子各基因编码蛋白质的二三级结构及功能活性位点,分析其同源性。结果表明:成功扩增出3000bp的SigmaB操纵子片段,序列分析显示该片段中包含Rsb认RsbW,RsbX和SigmaB4个基因,它们编码的蛋白质含有不同的功能活性位点,其中RsbV的5-102位AA为“STAS-抗-抗-SigamB因子”,咫6Ⅳ的43-157位AA间为HATPasec功能域,RsbX的32-198位AA间为PP2Cc超家族区域,SigmaB的8-264位AA为RNA聚合酶全酶中的SigmaB因子的区域。LM-XS5与其他3种革兰氏阳性茵的SigmaB基因的同源率在50%左右,与LM参考株的同源率在92.18%-100%之间。
- 杨丽红张再超孟庆玲乔军才学鹏蔡扩军王为升王俊伟陈创夫
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌蛋白结构预测
- 一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法
- 本发明涉及一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法,属生物技术领域。主要包括以下步骤:根据胞外丝氨酸蛋白酶XAoz1基因序列,设计特异性引物并扩增目的片段;将扩增的目的片段PCR产物与载体pMD19-T连接构建重组...
- 孟庆玲乔军王俊伟王为升张再超蔡扩军杨丽红陈创夫赵春光
- 文献传递