杜元策
- 作品数:5 被引量:15H指数:2
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划黑龙江省科技攻关计划项目黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学化学工程更多>>
- 抗大肠杆菌肠毒素卵黄抗体的制备和鉴定被引量:2
- 2014年
- 为了研究用不耐热肠毒素B亚基(LTB)和耐热肠毒素(STa)的融合蛋白制备鸡卵黄抗体的方法及其中和作用,试验将LTB和STa的编码基因串联并在大肠杆菌中表达获得了重组蛋白,以重组蛋白为免疫原免疫8月龄海兰蛋鸡制备了卵黄抗体,分别用兔肠段结扎试验和乳鼠灌胃试验进行了卵黄抗体对不耐热肠毒素(LT)和STa的体内中和试验。结果表明:用LTB和STa融合蛋白免疫产蛋鸡可诱导产生抗LTB和STa的卵黄抗体,其中抗LTB效价最高可达1∶8 647,抗STa效价最高可达1∶768;卵黄抗体对LT和STa均有中和作用。说明用融合蛋白作为免疫原制备的卵黄抗体具有抗LT和STa的生物学活性,对仔猪大肠杆菌性腹泻的临床治疗有潜在的应用价值。
- 赵姝静李丹丹朱颖韩林林李金萍杜元策孟相秋师东方
- 关键词:大肠杆菌不耐热肠毒素卵黄抗体
- 重组大肠杆菌LTB-Stx2B蛋白的表达及其诱导小鼠体液免疫的研究被引量:3
- 2013年
- 为了筛选大肠杆菌疫苗的有效抗原,本研究表达了重组蛋白Stx2B和重组蛋白LTB-Stx2B,并分别用重组蛋白Stx2B、表达了重组蛋白LTB-Stx2B的灭活菌液和灭活菌裂解液免疫昆明鼠,比较了不同抗原诱导小鼠的体液免疫应答能力;体内体外实验对免疫血清的毒素中和作用进行了检测。结果显示,重组蛋白LTB-Stx2B能诱导小鼠更高水平的体液免疫应答,其血清抗体可以通过乳汁传递给新生仔鼠;小鼠二免后的血清不仅能中和LT和Stx2对小鼠的毒性作用,而且能中和Stx2对Vero细胞的毒性,其中和效价为1:52,高于其他免疫原组血清。该研究为大肠杆菌疫苗的研究奠定了基础。
- 李丹丹赵姝静朱颖韩林林孟相秋李金萍杜元策吕广玲师东方
- 关键词:大肠杆菌体液免疫
- 大肠杆菌肠毒素基因多重PCR检测方法的建立被引量:9
- 2015年
- 目的建立一种快速检测大肠杆菌耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin,STa,STb)和不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT-Ⅰ,LT-Ⅱ)基因的多重PCR方法。方法参照文献合成四对可扩增产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素基因(estA、estB)和不耐热肠毒素基因(elt-Ⅰ、elt-Ⅱ)的特异性引物,通过反应条件的优化,敏感性、特异性试验和临床样品检测,建立检测大肠杆菌肠毒素的多重PCR方法。结果用所建立的多重PCR方法可特异性扩增出estA(229bp)、estB(480bp)、elt-Ⅰ(605bp)和elt-Ⅱ(300bp)基因片段,最低检出量分别为2.55×101 CFU/μL、2×101 CFU/μL、2×101 CFU/μL和2.47×103 CFU/μL。从22株大肠杆菌分离株中检测到estA基因(2/22),elt-Ⅱ基因(3/22),未检测到estB和elt-Ⅰ基因,检测结果与常规PCR检测结果一致。结论建立了检测大肠杆菌肠毒素基因(estA、estB、elt-Ⅰ和elt-Ⅱ)的多重PCR方法,该方法具有良好的特异性和敏感性,能够满足对细菌培养物的检测要求。
- 孟相秋袁超文刘文鑫关玮琨杜元策李丹丹赵姝静唐杰师东方
- 关键词:产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素多重PCR
- 重组大肠杆菌肠毒素蛋白LTA_(192)-STa_(13)的表达及其诱导小鼠体液免疫的研究被引量:1
- 2015年
- 为研究重组大肠杆菌肠毒素融合蛋白LTA192-STa13的免疫原性,本研究将产肠毒素大肠杆菌(ETEC)elt A和est A基因定点突变后构建融合基因,进行重组蛋白LTAR192G-STaG13Q的表达。利用纯化的重组蛋白和灭活菌液分别免疫小鼠,比较不同抗原诱导小鼠体液免疫应答能力,以及体外免疫血清对毒素的中和作用。结果显示,各组免疫小鼠均可以产生高滴度抗LTA和STa抗体,其血清抗体可以通过乳汁传递给新生仔鼠,其中蛋白免疫组血清抗体效价更高。体内外中和试验证明,实验组小鼠三免后的血清能够中和LT和STa毒素对实验鼠的毒性作用,并且能够中和LT对Y-1细胞的毒性作用,蛋白免疫组血清抗体中和效价可达到1∶89.13,明显高于灭活菌免疫组。研究表明,重组蛋白LTA192-STa13对小鼠具有良好的免疫原性,能够诱导免疫鼠产生良好的体液免疫应答,可以作为ETEC亚单位疫苗的候选抗原。
- 杜元策沙木哈吾.别开刘文鑫关玮琨孟相秋韩林林李金萍袁超文唐杰李星月赵志腾师东方
- 关键词:大肠杆菌肠毒素重组蛋白体液免疫
- 重组大肠杆菌肠毒素蛋白LTA192--STa13的表达及其诱导小鼠体液免疫的研究
- 犊牛大肠杆菌性腹泻是由产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic E. coli,ETEC)引起的1月龄内犊牛以消化紊乱、腹泻脱水、自体中毒和心力衰竭为主要病症的细菌性传染病,是引起新生犊牛生长发育不良,甚至死亡主...
- 杜元策
- 关键词:犊牛腹泻大肠杆菌肠毒素重组蛋白体液免疫
- 文献传递