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李瑞明: 作品数：23 被引量：34H指数：3; 供职机构：湖北医药学院附属太和医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学政治法律化学工程更多>>

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放射抗拒食管癌细胞系的建立及抗拒机制研究被引量：3: 2009年; [目的]建立食管癌放射抗拒细胞系模型并观察食管癌细胞经射线反复照射后放射敏感性的变化。[方法]60Coγ射线对食管癌EC9706细胞系进行照射,每次2Gy,共照射30次,采用克隆形成实验等测定所得的EC9706R60细胞亚系及其亲代细胞EC9706的放射敏感性,检测细胞周期特征、细胞凋亡率及SP细胞(side population cells)比例。[结果]与亲代EC9706细胞相比,EC9706R60细胞显示出明显放射抗性,其D0、Dq及N值增大,细胞存活曲线肩区增宽,EC9706R60细胞的放射抗性(D0)是EC9706的1.375倍(P<0.05)。EC9706R60细胞S期比例较其EC9706细胞明显增高(32.1%vs.3.8%),G0/G1期比例则明显下降(67.9%vs.96.2%)。食管癌细胞EC9706在经30Gy照射后12h细胞凋亡达到峰值11.17%,经60Gy照射后降低到最低点0.99%。EC9706R60细胞SP细胞的比例较EC9706明显增高。[结论]EC9706R60细胞显示出与亲代细胞不同的细胞周期特征,放射抗拒性与SP细胞的比例存在一定关联。高的放射诱导凋亡率可能意味着放射越敏感,放疗效果越好。; 任建华李瑞明李超熊奎骆志国; 关键词：食管肿瘤放射抗拒性 SP细胞

过表达小窝蛋白-1对293T细胞生长的影响及机制: 2009年; 目的:探讨小窝蛋白-1(caveolin-1)蛋白过表达对细胞生长与增殖的影响及其机制。方法:将重组的真核表达质粒PHLCX Nflag3/小窝蛋白-1以脂质体法转染293T细胞,流式细胞仪测定细胞周期变化;Western Blotting分析P53、P21、ERK、pp-ERK蛋白表达。结果:293T细胞出现了G0/G1期阻滞;P53/P21表达增加,ERK/ppERK表达减少。结论:过表达小窝蛋白-1抑制293T细胞生长,并且这种对细胞生长抑制作用通过P53/P21与ERK信号传导通路实现的。; 杞少华李东升李瑞明武栋成; 关键词：小窝蛋白-1 基因表达 293T细胞

高效hCu,Zn-SOD-PTD融合蛋白的表达及其穿膜功能的研究被引量：3: 2016年; 目的探讨h Cu,Zn-SOD-PTD融合蛋白的表达及其穿膜功能。方法首先,人工设计合成蛋白转导域序列(protein transduction domain,PTD),以人胚肝组织的总RNA为模板,逆转录扩增得人铜锌超氧化物歧化酶全长c DNA序列。其次,将此序列及人工合成PTD序列定向插入p ET16b载体;测序鉴定后,将构建成功的重组载体导入E.coli BL21菌株,异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,经镍柱纯化,洗脱液经SDS-PAGE检测。最后,将纯化产物与食管癌细胞(EC9706)共孵育,用激光共聚焦和流式细胞仪的方法检测蛋白穿膜能力及活性。结果测序结果与人铜锌超氧化物歧化酶全长c DNA序列相符;SDS-PAGE结果出现18.6 kd和20 kd的目的条带;激光共聚焦和流式细胞仪的方法显示蛋白可穿膜且保持活性。结论本实验成功构建了PET16b/h Cu,Zn-SOD-PTD原核表达质粒,可在大肠杆菌中稳定表达融合蛋白,融合蛋白具有穿膜且保持活性。; 王晓勋杞少华李瑞明梁清乐; 关键词：蛋白转导域生物膜原核表达载体

pcDNA3.0-RFP-IP3R1双表达框载体的构建与鉴定: 目的构建pcDNA3.1(+)-RFP-IP3R1双表达框的真核表达载体方法以pcDNA3.1(+)和pGM-T-RFP为模板，采用PCR扩增SV40 Promoter、RFP和SV40 terminator序列，...; 程雪琴唐以军王梅芳刘兴华李瑞明魏志强; 关键词：CA2+

沉默Chk1基因对姜黄素诱导胃癌细胞SGC7901凋亡敏感度的影响被引量：1: 2013年; 目的探讨siRNA沉默Chk1基因表达对姜黄素诱导胃癌细胞SGC7901凋亡和细胞周期的影响,评价其作为姜黄素治疗胃癌增敏靶点的有效性。方法采用RNAi技术在胃癌细胞SG-7901中将Chk1基因沉默,采用Western blot检测转染前后Chk1蛋白表达的变化,采用流式细胞术检测Chk1基因沉默对姜黄素诱导胃癌细胞凋亡及细胞周期变化的影响。结果转染Chk1siRNA后,胃癌细胞SGC7901中Chk1蛋白表达受抑制,明显低于对照组(P<0.05)。FCM检测结果显示,si-Chk1组较空白对照组G2/M期百分比有所降低(P<0.05),si-Chk1+Curcumin组G2/M期比例明显低于Empty vec-tor+Curcumin组(P<0.05)。siRNA沉默Chk1基因使姜黄素诱导的细胞凋亡率由(14.7±1.1)%上升到(28.9±1.8)%。结论 siRNA沉默Chk1基因可明显消除G2/M期阻滞,并显著增强姜黄素诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的敏感度,提示Chk1可作为姜黄素治疗胃癌的有效增敏靶点。; 刘志祥李瑞明王晓勋; 关键词：RNA干扰姜黄素

野生C亚型HBV稳定复制细胞株的建立: 李瑞明杨燕孟忠吉

人FAM92A1基因诱饵表达质粒的构建与鉴定被引量：2: 2011年; 目的构建人FAM92A1基因（hFAM92A1）的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1并检测其蛋白表达、毒性和自激活作用.方法 PCR扩增hFAM92A1的基因编码序列并克隆入诱饵表达载体pGBKT7中,酶切和测序鉴定后,转化到酵母AHl09细胞中,Western印迹检测诱饵蛋白表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用.结果成功构建FAM92A1基因的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1,测序结果正确.Western印迹实验证实酵母细胞高表达诱饵蛋白hFAM92A1,诱饵蛋白没有自激活作用.结论构建的诱饵表达质粒pGBKT7-hFAM92A1可用于下一步酵母双杂交系统实验,为进一步研究hFAM92A1功能奠定了基础.; 方娟李瑞明卢智勇孙晓东陈洁阮绪芝; 关键词：诱饵蛋白

siRNA-FAM92A1-289对HeLa细胞增殖的影响被引量：5: 2011年; 目的:研究RNA干扰(RNAi)沉默基因FAM92A1-289对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法:化学合成法合成小干扰RNA(siRNA),阳离子脂质体转染FAM92A1-289 HeLa细胞;实时定量RT-PCR检测其mRNA表达,MTT法和流式细胞仪检测转染后HeLa细胞增殖、细胞周期和凋亡变化。结果:转染合成FAM92A1-289 siRNA后,HeLa细胞中FAM92A1-289 mRNA表达下降(P<0.01),细胞增殖均明显增强(P<0.01);细胞周期分布改变,S期细胞明显增多,而G2/M期细胞减少,凋亡率无变化。结论:FAM92A1-289基因调节细胞增殖活动。; 陈洁陈洁李瑞明方娟阮绪芝; 关键词：小RNA干扰 HELA细胞

联合应用常染色体STR、X-STR和线粒体SNP鉴别缺失双亲姐妹同胞关系被引量：5: 2014年; 目的对双亲缺失的姐妹进行同胞鉴定。方法采用chelex-100法提取血液DNA,通过检测常染色体短串联重复序列(short tandem repeat,STR)位点、X染色体STR位点和线粒体单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)进行基因分型,分型结果通过判别函数、ITO法、X染色体STR位点和线粒体SNP分析的方法进行同胞关系判定。结果 39个常染色体等位基因位点的共享基因数为27个,用辨别函数判别归于无关个体;用ITO法计算亲缘关系系数(FSI)为6.95003×10^(-44),判别为无关个体;12个X染色体STR等位基因位点中,有3个X染色体STR位点不匹配,排除姐妹俩来自同一父亲;线粒体SNP的检测显有3个基因座不同,两人来源于不同母系。结论通过联合利用常染色体STR、X染色体STR和线粒体SNP检测技术进行确认两人不是同胞姐妹关系。; 王晓勋陈敏李瑞明贺娇王彦涛罗银州; 关键词：亲权鉴定法医遗传学

人胚胎干细胞系NS1的建立: 2010年; 目的：探讨利用长期冷冻的废弃胚胎建立人胚胎干（hES）细胞系.方法：将临床体外受精（IVF）及精子卵浆内注射（ICSI）周期中剩余冷冻5年以上的废弃胚胎复苏后继续培养至扩张囊胚,链霉蛋白酶去除透明带后采用全囊胚培养法获取原代类胚胎干细胞,再用机械法传代分离纯化hES细胞,命名为NS1.取不同代次的培养细胞,进行碱性磷酸酶染色、转录因子OCT-4、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、肿瘤排斥抗原TRA-1-60、TAR-1-81、核型及体内分化实验对NS1进行全能性鉴定.结果：12枚废弃胚胎在体外继续培养后,有4枚发育为囊胚,最终得到1个干细胞系,经鉴定,这些细胞都具有hES细胞的生物学特性.结论：长期冷冻的废弃胚胎可用来建立hES细胞系.; 丁妍杨华刘锋李瑞明冯静波杞少华丘映李东升; 关键词：胚胎干细胞囊胚内细胞团

李瑞明

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