李林蔚
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南华大学药学与生物科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法研究被引量：1
- 2015年
- 目的：建立小鼠唾液腺干细胞体外分离培养方法。方法：从7～8周龄的C57BL／6J小鼠唾液腺分离唾液腺干细胞，采用悬浮唾液球法培养唾液腺干细胞，应用倒置显微镜动态观察细胞形态；细胞计数观察细胞生长状况；免疫荧光检测LN（层连蛋白）的表达。结果：倒置显微镜下，接种2d后细胞（salispheres）小聚集体明显增加；接种4d后唾液腺球直径逐渐增大，形成直径约100斗m的神经球，球周围无明显刺突，存在明显细胞聚集。接种7d后唾液腺球周围存在较多微刺，10d后球继续增长，形状明显不同于4d，表明处于活跃的增殖状态，唾液腺干细胞已经开始分化。生长曲线结果显示随着培养天数的增加，唾液腺球的数目呈明显递增趋势，同时，唾液腺球的直径也明显增大。免疫荧光结果显示，培养2d后，唾液干细胞球开始表达LN，培养第4d后，随着唾液干细胞球的增加，层连蛋白表达更明显。结论：应用该方法获得了唾液腺干细胞，具有成体干细胞的特征，具有自我更新和多向分化的潜能．
- 李林蔚李国庆胡劲松谢红艳罗莎莎王燕易岚
- 关键词：细胞分离培养层连蛋白
- Rac2在二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病K562细胞凋亡的分子机制。方法 Real-time PCR检测Rac2基因mRNA水平;Western blot检测Rac2、JNK、p38等蛋白的表达;基因沉默Rac2蛋白的表达;流式细胞术检测凋亡细胞百分率以及细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;琼脂糖凝胶电泳检测晚期凋亡。结果随着DADS质量浓度的增加,Rac2基因mRNA水平明显上调(P<0.05)。与未干扰组相比,siRac2RNA组凋亡率明显降低(P<0.05)。Rac2siRNA干扰的DADS诱导的K562细胞并未出现梯状条带。与未干扰组相比,siRac2RNA组在5.0,10.0和15.0mg·L-1 DADS作用于K562细胞8h后,荧光强度显著降低(P<0.05)。Western blot分析结果显示:与对照组相比,10.0和15.0mg·L-1 DADS作用于K562细胞24h后,蛋白Rac2的表达水平明显上调(P<0.05);用siRNA抑制Rac2蛋白的表达后,JNK1的表达显著降低,p38和磷酸化的p38的表达在Rac2干扰前后没有明显变化。结论 Rac2与DADS诱导K562细胞凋亡、活性氧的产生密切相关。活化的Rac2选择性地激活JNK信号通路而不是p38信号通路导致细胞凋亡。
- 易岚伍尤华谭晖何洁李林蔚单健苏琦
- 关键词：DADS活性氧凋亡K562细胞
- DADS对人白血病细胞和淋巴瘤细胞诱导凋亡作用比较研究
- 2015年
- 大蒜及其烯丙基硫化物的抗肿瘤作用正日益受到关注[1-2].我们的前期研究显示,DADS对人白血病HL60细胞具有双效作用,小剂量DADS（〈1.25mg·L^-1）诱导人白血病细胞分化,而中等剂量DADS（〉1.25mg·L^-1）可诱导人白血病细胞凋亡[3-4].我们的前期研究表明,Rac2与DADS诱导人白血病细胞凋亡相关[5],且DADS通过活性氧介导的JNK信号通路诱导HL-60细胞的凋亡,且NADPH氧化酶的活化是DADS诱导HL-60细胞凋亡过程ROS的主要来源[6-7].本研究在前期工作基础上.
- 易岚李林蔚谭晖何洁胡劲松谢红艳苏琦
- 关键词：人白血病细胞诱导凋亡作用DADS淋巴瘤细胞HL-60细胞凋亡烯丙基硫化物
- 二烯丙基二硫活化NADPH氧化酶诱导人白血病K562细胞凋亡被引量：4
- 2014年
- 目的研究DADS诱导人白血病K562细胞凋亡的分子机制。方法应用MTT法检测细胞的活性;流式细胞术检测细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平以及凋亡细胞百分率;Real-time PCR检测NADPH氧化酶各亚基mRNA水平;免疫共沉淀检测蛋白Rac2与蛋白p67phox的结合;Western blot检测Rac2蛋白的表达。结果 DADS能明显抑制K562细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性;6 mg·L-1DADS作用人白血病K562细胞6 h后,NADPH氧化酶复合物的6个亚基mRNA水平都明显上调;5.0、10.0 mg·L-1DADS作用人白血病K562细胞24 h后蛋白Rac2的表达水平明显上调;免疫共沉淀结果显示,DADS诱导的K562细胞凋亡过程中有Rac2与p67phox结合;流式细胞术检测凋亡细胞百分率结果显示,PMA能明显提高DADS诱导K562细胞凋亡的作用,而DPI能抑制DADS诱导K562细胞凋亡。PMA能提高DADS诱导K562细胞活性氧的水平,而DPI明显抑制了活性氧的产生。结论 NADPH氧化酶的活化是DADS诱导K562细胞凋亡过程中活性氧的主要来源,DADS通过活化NADPH氧化酶诱导K562细胞凋亡。
- 易岚伍尤华谭晖何洁李林蔚单健苏琦
- 关键词：NADPH氧化酶凋亡人白血病K562细胞
- 蛋白质组学技术在筛选生物标志物方面的应用研究进展被引量：4
- 2015年
- 随着蛋白质组学技术的不断发展,蛋白质作为生物标志物在肿瘤的早期诊断以及治疗效果评价等方面的应用日益广泛。近年来,蛋白质组学技术在环境污染预警方面的作用也日益受到关注。本文就几种常用的蛋白质组学分离分析技术及其在肿瘤相关生物标志物、环境污染预警生物标志物筛选中的应用做一综述。
- 李林蔚丁德馨李广悦胡南易岚
- 关键词：蛋白质组学生物标志物肿瘤环境污染
