李旭芳
- 作品数：13 被引量：31H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 婴幼儿急性侵袭性肺曲霉病八例临床分析被引量：3
- 2011年
- 目的分析婴幼儿急性侵袭性肺曲霉病的临床特征，以期提高对该病的早期识别及诊治能力。方法回顾性研究2010年8月至2011年2月华中科技大学同济医学院附属同济医院普通儿科病房内收治的8例15个月以下婴幼儿急性侵袭性肺曲霉病的临床资料，分析宿主高危因素、临床表现、实验室检查、诊治经过及转归情况。结果①诊断依据：5例血清曲霉半乳甘露聚糖实验吸光度指数（GMI）为1．92～3．27，2例2次痰培养检出烟曲霉菌，1例GMI2．85同时1次痰培养检出烟曲霉菌者，均符合临床诊断。②危险因素：7例病前有静脉用广谱抗生素或加糖皮质激素治疗史（6例住院，1例门诊治疗）；1例1月龄幼婴父母有严重足癣。③临床特点：4例高热型临床表现为持续高热，早期无明显呼吸道症状体征而肺部CT病变严重，杆状核粒细胞比率明显升高（0．25～0．68），与WBC总数和超敏CRP值正常明显不相称；4例非高热型病例WBC总数、超敏CRP及杆状核粒细胞比率都正常，3例有低热，呼吸道症状体征和肺部CT病变较严重；另1例1月龄幼婴仅有精神反应差。④影像学特点：肺部CT表现以不规则散在分布条索状致密影及小片结节影（6例）和单侧大片团块样实变影（1例）为多见，部分累及胸膜；1例表现为双侧主支气管周围病变伴主支气管狭窄。⑤临床转归：首例患儿并发严重脓毒症，死于多器官功能衰竭；另7例在临床诊断或拟诊后立即伏立康唑治疗，1～3d内病情迅速缓解。结论广谱抗生素和糖皮质激素滥用使婴幼儿发生侵袭性肺曲霉病的危险性增加；普通儿科病房内可能存在曲霉菌院内感染和传播风险；高热型病例早期具有症状体征轻而肺部CT病变重和外周血杆状核粒细胞明显增高而WBC总数和超敏CRP正常等临床特征；尽早伏立康唑治疗可获显著疗效并有效降低病死率。
- 周华黄永建舒赛男刘圣烜黄浩李旭芳方峰
- 关键词：曲霉菌病婴儿
- AIM2炎性体识别胞浆鼠巨细胞病毒DNA的实验研究被引量：3
- 2012年
- 目的观察AIM2（absent in melanoma2）在感染早期识别胞浆小鼠巨细胞病毒（MCMV）DNA的变化状况。方法建立MCMV全身播散型感染模型，接种MCMVSmith株后第1、3、5和7天各处死3只小鼠；同时设模拟感染小鼠作为正常对照。Western blot检测脾脏巨噬细胞中AIM2、衔接子凋亡相关点样蛋白（ASC）和caspase-1蛋白的表达状况；同时应用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的水平；空斑法测定感染小鼠唾液腺感染性病毒滴度。结果MCMV感染后第3、5、7天，小鼠唾液腺组织中感染性病毒滴度逐渐增加；MCMV感染鼠脾脏巨噬细胞中AIM2、ASC和caspase-1蛋白的表达呈现一致的变化，与模拟感染对照鼠比较，AIM2、ASC和caspase-1蛋白相对吸光值在感染后第1天开始升高（P〉0．05），第3天明显升高并达峰值[分别为（1．121±0．243）vs（0．240±0．046），（1．318±0．333）VS（0．248±0．090），（1．085±0．243）VS（0．247±0．064）；P〈0．01]，其后接近正常；MCMV感染鼠血清IL-1β和IL-18水平在感染后第3天也明显高于模拟感染对照鼠[分别为（112．72±5．20）pg／ml VS（47．86±4．35）pg／ml，（42．74±4．23）pg／ml VS（22．60±2．82）pg／ml；P〈0．01]，其后均逐渐下降接近正常。结论MCMC感染早期巨噬细胞通过AIM2炎性体识别胞浆MCMVDNA，可能成为CMV感染及感染后所引起的疾病的治疗靶点。
- 李旭芳刘玲玲舒赛男刘兴楼李革方峰
- 关键词：鼠巨细胞病毒IL-1ΒIL-18
- 体外应用MCMV与PMA/Ionomycin联合诱导Th17细胞的研究被引量：3
- 2011年
- 探讨体外联合应用小鼠巨细胞病毒(MCMV)和佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)诱导Th17细胞产生。分别使用MCMV、PMA/Ionomycin或联合MCMV、PMA/Ionomycin体外刺激BALB/c小鼠脾细胞,利用流式细胞仪检测脾细胞中CD4+IL-17+细胞的比例及平均荧光强度,同时应用ELISA技术检测培养液上清中IL-17蛋白浓度。结果显示:单独使用MCMV或PMA/Ionomycin均不能有效刺激Th17细胞增殖,CD4+IL-17+细胞比例较低;而联合应用MCMV和PMA/Ionomycin可以有效诱导脾细胞向Th17细胞分化,CD4+IL-17+细胞比例达到2.6%,且应用联合诱导方案后可见CD4+IL-17+细胞平均荧光强度(MFI)明显升高。此外,联合应用MCMV和PMA/Ionomycin刺激脾细胞后明显增加培养液上清中IL-17蛋白浓度。我们的研究结果可以为进一步探讨Th17细胞在CMV感染免疫中的作用奠定实验基础。
- 李旭芳舒赛男刘兴楼刘玲玲郭珊王慧李革方峰
- 关键词：CMVIL-17平均荧光强度
- 急性MCMV感染对小鼠脾Th1/Th2/Th17细胞亚群分化的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:在整体水平观察小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对小鼠脾Th1/Th2/Th17细胞亚群分化及其主要的效应性细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17A)表达的影响。方法:建立MCMV感染模型,8只BALB/c小鼠分别于接种MCMV Smith株后3天和14天各处死4只;另设8只接种唾液腺匀浆的模拟感染小鼠作为对照。用空斑形成试验测定肝、脾和唾液腺组织病毒滴度;流式细胞术检测脾T淋巴细胞中Th1(CD4+IFN-γ+)、Th2(CD4+IL-4+)、Th17(CD4+IL-17A+)细胞比例,双抗体夹心ELISA法检测脾细胞培养上清中病毒特异性IFN-γ、IL-4、IL-17A水平。结果:MCMV感染早期肝、脾和唾液腺组织中病毒呈低水平复制,而感染后14天仅在唾液腺组织呈高水平复制;Th1细胞比例及病毒特异性IFN-γ主要在MCMV感染早期呈显著升高(P<0.01);Th2细胞及IL-4均无明显表达及改变;Th17细胞及病毒特异性IL-17A则主要在感染后14天升高(P<0.05)。结论:MCMV感染早期,机体通过上调Th1细胞分化比例及IFN-γ的表达发挥抗病毒效应,而MCMV诱导Th17细胞分化及IL-17A的高表达可能是MCMV感染致宿主特异性细胞免疫功能失调并逃避机体特异性细胞免疫攻击的原因之一。
- 李旭芳刘玲玲张菊廖毅刘杨于萌刘兴楼李革舒赛男方峰
- 关键词：TH1细胞TH2细胞鼠巨细胞病毒
- Th17细胞在小鼠巨细胞病毒感染急性期的作用研究
- 2012年
- 目的整体水平观察Th17细胞在小鼠巨细胞病毒（MCMV）播散性感染急性期的作用。方法建立MCMV播散性感染模型，病毒接种后第3、7、14和28天各处死3只小鼠；同时设模拟感染鼠作为对照。应用real—timePCR法检测MCMV感染鼠脏器MCMVDNA载量；HE染色观察MCMV感染后脾组织病理损伤变化；流式细胞术检测脾细胞中CD4＋IL-17A＋T细胞比率；ELISA法检测脾细胞培养上清中IL-17A蛋白浓度。结果感染急性期唾液腺组织中MCMVDNA于感染后14d最高；脾组织病理损伤也于感染后14d最严重；与模拟感染对照鼠相比，MCMV感染鼠脾细胞中CD4＋IL-17A＋T细胞比率呈升高趋势（均P〈0．01），且于感染后14d达峰值[（1．14±0．09）％VS（0．19±0．04）％，t=17．551，P=0．000]；病毒特异性IL-17A浓度也于感染后14d达峰值[（81．98±12．37）pg／mlVS（44．96±8．44）pg／ml，t=4．281，P=0．006]；脾细胞培养上清中病毒特异性IL-17A水平与唾液腺组织中MCMVDNA载量呈正相关（r=0．54，P〈0．05）；脾组织病理损伤越重，脾细胞培养上清中IL-17A浓度越高。结论Th17细胞主要通过IL-17A参与MCMV播散性感染急性期免疫应答，直接或间接的促进病毒复制或脾组织局部病理损伤，可能是MCMV持续性感染的重要原因之一。
- 李旭芳刘玲玲刘兴楼舒赛男李革方峰
- 关键词：小鼠巨细胞病毒TH17细胞
- 小鼠播散性巨细胞病毒感染的免疫应答和致病机制研究 1）小鼠脾巨噬细胞DNA感受器AIM2识别MCMV DNA激活其炎性体通路的整体研究 2）Th17细胞在急性播散性MCMV感染致病机制中的作用
- /[目的/]
1/)在整体水平观察小鼠MCMV感染后脾巨噬细胞内AIM2炎性体各组分蛋白及其下游促炎因子IL-1β和IL-18的时序性表达变化,证实AIM2对MCMV DNA的识别并探讨其炎性体通路在抗MCMV天然...
- 李旭芳
- 关键词：TH17细胞
- 文献传递
- IL-17A参与巨细胞病毒感染后脾脏病理改变的机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的建立鼠巨细胞病毒（MCMV）播散性感染的小鼠模型，在整体水平观察脾脏病理损伤与促炎因子IL-17A表达的关系，初步探讨IL-17A参与巨细胞病毒感染后脾脏病理改变的机制。方法建立鼠巨细胞病毒全身播散性感染模型，MCMVSmith株腹腔接种后3、7、14、28d各处死小鼠3只，同时设正常小鼠作为模拟感染对照。标准空斑实验检测脾脏的病毒滴度，lit．PCR法测定脾脏中MCMVmRNA、IL-17AmRNA的表达，免疫组化法检测脾脏的IL-17A蛋白的表达，HE染色法评估脾脏的病理性损伤程度，分析IL-17A的表达与脾脏病理改变的关系。结果脾组织的病毒滴度在巨细胞病毒感染后3d升高，7d有所降低，在感染后第14天用标准空斑实验检测不到病毒。MCMVmRNA在病毒感染后3、7d可以检测的到；IL-17AmRNA的表达，与模拟感染对照组相比，MCMV感染组表达逐渐增加，并在14d达到高峰，28d显著下降。免疫组化法检测的脾脏IL-17A蛋白的表达也在14d达到高峰。脾组织的病理损伤逐渐加重，至感染后第14天病变达高峰后逐渐减轻。脾脏组织病理损伤最重与IL-17A高表达出现在同一时期。结论促炎因子IL-17A的高表达与脾脏组织的病理损伤程度呈现明显相关性。
- 刘玲玲李旭芳秦文卿刘兴楼李革舒赛男方峰
- 关键词：巨细胞病毒TH17
- 超低出生体重儿肠外营养中的钙磷添加被引量：5
- 2013年
- 目的 观察超低出生体重（ELBW）儿3种不同的肠外营养（PN）钙磷添加治疗方案,探讨ELBW儿如何用PN的方式补充钙磷.方法 2009年6月至2012年12月同济医院新生儿重症监护病区收治、进行PN治疗、符合纳入标准、顺利完成研究的66例ELBW儿按随机数字表法分为无添加组（n=28）、钙剂添加组（n=21）和钙磷添加组（n=17）,分别给予单纯的PN营养液、PN添加钙剂、PN添加钙剂和磷盐,每周（共4周）测定血清离子钙、血清磷水平,随机尿中尿钙及尿肌酐含量,测定治疗开始时及治疗期末骨密度值（SOS）.结果 经过添加治疗后,与无添加组比较,钙剂添加组离子钙水平明显升高[14 d,（1.82±0.35）mmol/L比（1.14±0.47）mmol/L,t=5.800,P=0.005;1 d,（1.77±0.45） mmol/L比（1.07±0.43） mmol/L,t=5.492,P=0.004;28 d,（1.61±0.58）mmol/L比（0.92±0.44） mmol/L,t=4.556,P=0.025],钙磷添加组离子钙水平亦明显升高[14 d,（1.55±0.30） mmol/L比（1.14±0.47） mmol/L,t=3.570,P=0.001；21 d,（1.58±0.38） mmol/L比（1.07±0.43） mmol/L,t=4.151,P=0.000; 28d,（1.55±0.35） mmol/L比（0.92±0.44） mmol/L,t=5.302,P=0.003].钙磷添加组血清磷水平与无添加组比较明显升高[14 d,（1.86±0.10） mmol/L比（1.65±0.17）mmol/L,t=5.217,P=0.012;21 d,（1.88±0.14） mmol/L比（1.61±0.13） mmol/L,t=6.442,P=0.003; 28 d,（1.89±0.15） mmol/L比（1.58±0.14） mmol/L,t=6.891,P=0.000],也明显高于钙剂添加组[14 d,（1.86±0.10）mmol/L比（1.53±0.15）mmol/L,t=8.100,P=0.000; 21d,（1.88±0.14） mmol/L比（1.57±0.14） mmol/L,t=6.787,P=0.000;28 d,（1.89±0.15） mmol/L比（1.62 ±0.18） mmol/L,t=5.043,P=0.000].与无添加组比较,钙剂添加组的尿钙/肌酐比明显升高（14 d,0.69±0.18比0.33±0.14,t=7.601,P=0.000；21 d,0.66±0.16比0.37±0.14,t=6.62,P=0.001; 28 d,0.62 ±0.15比0.39±0.12,t=5.776,P=0.005）,而钙磷添加组的尿钙/肌酐比明显降低（14 d,0.14±0.10比0.33±0.14,t=5.294,P=0.010; 21 d,0.13±0.1
- 李旭芳张炼
- 关键词：超低出生体重儿肠外营养骨矿代谢性骨病
- IL-1β和IL-18在鼠巨细胞病毒播散性感染中的表达及意义被引量：1
- 2012年
- 目的:在整体水平观察鼠巨细胞病毒(Murine cytomegalovirus,MCMV)播散性感染时脏器病毒载量、caspase-1的活化及其下游因子IL-1β和IL-18的表达状况。方法:建立MCMV播散性感染模型,MCMV Smith株接种后第0、3、7和14天各处死4只小鼠;同时设模拟感染小鼠作为对照。标准空斑试验检测唾液腺、肺和肝组织病毒滴度;Western blot法检测脾细胞中procaspase-1及其活化形式caspase-1的表达强度;双抗体夹心ELISA法检测血清IL-1β和IL-18水平;免疫组化法检测唾液腺、肺和肝组织中IL-1β和IL-18表达状况。结果:肝组织病毒滴度于MCMV感染后3天升高,其后迅速减低,感染2周内肺组织中未检测到病毒,而唾液腺组织病毒滴度呈逐渐增高趋势;与模拟感染对照组比较,播散性感染组感染后3天脾细胞中procaspase-1和caspase-1的表达明显升高(相对吸光值均P<0.01);同时,血清IL-1β和IL-18水平升高达峰值(均P<0.01)。结论:MCMV感染后炎性体活化,caspase-1表达升高;其下游信号IL-1β和IL-18成熟释放增加,并呈组织差异性表达。
- 李旭芳刘玲玲刘兴楼舒赛男李革方峰
- 关键词：鼠巨细胞病毒CASPASE-1IL-1ΒIL-18
- 小鼠巨细胞病毒播散性感染急性期脾脏损伤的免疫病理机制被引量：1
- 2012年
- 目的:观察小鼠巨细胞病毒(MCMV)播散性感染急性期脾组织病理损伤程度与病毒量、caspase-1和下游促炎因子IL-1β、IL-18表达的关系,探讨MCMV感染后脾脏的免疫病理损伤机制。方法:建立MCMV全身播散性感染模型,MCMV Sminth株接种后第3、7、14和第28天各处死3只小鼠;同时设模拟感染小鼠作为对照。标准空斑试验检测脾组织病毒滴度;Western blot法检测脾脏中caspase-1表达强度;免疫组化法检测脾组织中IL-1β和IL-18表达状况,HE染色后用半定量法评估脾脏组织病理损伤程度;分析病毒滴度及caspase-1、IL-1β和IL-18表达与组织病理损伤的关系。结果:MCMV感染后,脾组织病毒滴度在感染后3 d升高,7 d明显下降,14 d时用标准空斑试验已检测不到病毒;与模拟感染对照组比较,MCMV感染组感染后第3天脾组织中caspase-1表达明显升高后逐渐下降(P<0.01);脾组织中IL-1β和IL-18表达呈进行性升高,于感染后7 d达峰值,14 d减少,28 d基本接近正常;脾组织病理损伤呈进行性加重,至感染后14 d达高峰,28 d明显减轻;IL-1β和IL-18在脾组织中的高表达早于其组织病理损伤,随着IL-1β和IL-18表达水平的下降,病理损害也逐渐恢复。结论:巨细胞病毒感染引起caspase-1表达增加,促进炎性因子(IL-1β、IL-18)合成和释放增加。IL-1β、IL-18不仅有抗病毒作用,同时也可能参与MC-MV播散性感染后脾组织的免疫病理损伤。
- 刘玲玲李旭芳刘兴楼舒赛男李革方峰
- 关键词：小鼠巨细胞病毒CASPASE-1免疫病理
