李凌彦
- 作品数：13 被引量：10H指数：2
- 供职机构：昆明理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省应用基础研究基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 一种苹果酸酶基因及其重组表达载体
- 一种苹果酸酶基因及其重组表达载体。本发明公开了一种从深黄被孢霉M6‑22中分离的编码苹果酸酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，通过构建重组载体并在...
- 高春红张琦李凌彦魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- 一种苹果酸酶基因及其重组表达载体
- 一种苹果酸酶基因及其重组表达载体，本发明公开了一种从深黄被孢霉M6‑22中分离的编码苹果酸酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示，通过构建重组载体并在...
- 张琦崔锦锦李凌彦魏云林林连兵季秀玲
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- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体
- 本发明公开了一种从圆红冬孢酵母YM25235中分离的编码Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，通过构建重组载...
- 张琦何仕武李凌彦魏云林林连兵季秀玲
- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其应用
- 本发明公开了一种从深黄被孢霉M6-22中分离的Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因，其核苷酸序列如SEQIDNO：1所示，编码如SEQIDNO：2所示的氨基酸序列；通过构建重组载体并在酿酒酵母中表达，表达产物具...
- 张琦李凌彦何仕武胡彬彬魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- 多不饱和脂肪酸与粘红酵母低温适应性的关系被引量：4
- 2014年
- 以一株粘红酵母(Rhodotorula glutinis)YM25079为研究对象,分析其低温生长适应性与细胞膜流动性、膜脂脂肪酸含量的变化以及多不饱和脂肪酸合成关键基因——Δ12-脂肪酸脱氢酶基因mRNA转录水平的关系.结果显示,YM25079在5-30℃温度条件下均能生长,最适生长温度为15℃.在15℃培养条件下,YM25079细胞膜流动性没有明显降低,但是多不饱和脂肪酸含量显著提高,由25℃时29.4%增加到15℃时的55.39%,而且15℃时Δ12-脂肪酸脱氢酶基因mRNA转录水平提高了5倍.这些研究结果表明,粘红酵母YM25079的低温生长适应性可能是通过提高多不饱和脂肪酸合成相关基因的表达水平,增加膜脂中多不饱和脂肪酸含量,维持低温条件下细胞膜的流动性来形成的.
- 杨昭杰李凌彦胡彬彬林连兵魏云林季秀玲张琦
- 关键词：粘红酵母多不饱和脂肪酸膜流动性
- 促进微生物生产多不饱和脂肪酸的研究被引量：3
- 2015年
- 多不饱和脂肪酸(PUFAs)作为功能性油脂已被广泛应用于食品工业领域。随着对纯PUFAs脂质的需求量越来越多,来自于动植物和深海洋鱼的PUFAs远远不能满足市场需求,且动植物含油量及不饱和脂肪酸类型、比例均受到一定的限制。一系列的研究表明,微生物特别是藻类、真菌能合成几乎所有的PUFAs,并能在工业规模上培育有开发价值的可替代生物资源。作者在近年来国内外有关研究的基础上,从培养条件、菌种选育、基因工程、代谢调控等方面对促进微生物产PUFAs的研究进行了综述,为相关的研究提供参考。
- 张琦李凌彦赵汝丽魏云林林连兵季秀玲
- 关键词：微生物多不饱和脂肪酸生物合成
- 高山被孢霉Δ^6-脂肪酸脱氢酶基因在红冬孢酵母中的表达被引量：2
- 2014年
- 以绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)作为报告基因,将质粒pRH2304转化红冬孢酵母YM25235进行表达分析,荧光显微观察结果表明GFP在YM25235获得表达,建立了红冬孢酵母YM25235遗传转化方法。在此基础上,以高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因取代pRH2304中的GFP基因,构建重组质粒pRH2304MAD6,将其转化红冬孢酵母YM25235进行表达分析。PCR结果表明,高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因已经整合到YM25235基因组中,进一步的脂肪酸气相色谱分析结果表明,该基因编码产物催化n-6途径中的亚油酸转化成γ-亚麻酸,占细胞总脂肪酸的4.35%,但没有检测到催化n-3途径中的α-亚麻酸转化成十八碳四烯酸。
- 李凌彦胡彬彬赵吉然魏云林林连兵季秀玲张琦
- 关键词：高山被孢霉Γ-亚麻酸
- 一种Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶基因及其重组表达载体
- 本发明公开了一种从圆红冬孢酵母YM25235中分离的编码Δ<Sup>12</Sup>-脂肪酸脱氢酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，通过构建重组载...
- 张琦杨晓霞何仕武李凌彦魏云林林连兵季秀玲
- 文献传递
- 一种苹果酸酶基因及其重组表达载体
- 一种苹果酸酶基因及其重组表达载体。本发明公开了一种从深黄被孢霉M6-22中分离的编码苹果酸酶的核苷酸序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO: 1 所示，该基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2 所示，通过构建重组...
- 高春红张琦李凌彦魏云林林连兵季秀玲
- 深黄被孢霉苹果酸酶基因的克隆和表达被引量：1
- 2017年
- 为了克隆与表达深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22苹果酸酶基因,根据深黄被孢霉M6-22转录组测序结果,以其c DNA为模板PCR扩增苹果酸酶基因编码序列,经测序验证分析后将扩增片段连接到表达载体pET-32a(+)中构建重组表达质粒pET32a MIME2并进一步转化入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,经镍柱亲和纯化目的蛋白和酶活分析确定其为苹果酸酶.PCR扩增得到全长为1 815 bp的cDNA序列,序列分析表明该序列具有一个编码604个氨基酸的开放阅读框,预测编码蛋白分子量(Mr)为66.4×10~3.预测的氨基酸序列与已报道的苹果酸酶同样具有保守的2个二核苷酸结合结构域和1个二价金属离子结合结构域,因此是一个新的苹果酸酶基因序列,命名为MIME2,Gen Bank序列号为KU097323.将该序列转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测到1条约67×10~3的蛋白条带表达,经镍柱纯化和酶活分析表明所纯化蛋白能催化苹果酸脱氢生成丙酮酸,同时生成NADPH,具有苹果酸酶的特性,其酶活大小为177.46 U/mg.以上结果证明所克隆的cDNA序列MIME2为1个新的苹果酸酶基因,基因编码蛋白具有苹果酸酶活性,可为深入研究苹果酸酶的结构和功能关系以及进一步应用奠定基础.
- 崔锦锦李凌彦季秀玲林连兵魏云林张琦
- 关键词：深黄被孢霉苹果酸酶基因克隆与表达NADPH
