曲春浦 作品数:42 被引量:70 H指数:5 供职机构: 东北林业大学 更多>> 发文基金: 中央高校基本科研业务费专项资金 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 文化科学 哲学宗教 更多>>
西伯利亚蓼谷氨酰胺合成酶基因的克隆及碱性盐胁迫下的表达 被引量:2 2014年 根据西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum Laxm.)地下茎抑制消减文库(SSH)中获得的谷氨酰胺合成酶基因(Glutamin synthetase,GS)EST序列,应用RACE技术克隆了具有Poly A的全长cDNA序列,以下简称为PsGS基因。该序列全长1 273 bp,其5'非翻译区178 bp,3'非翻译区24 bp,开放阅读框编码356个氨基酸残基;根据与其他植物谷氨酰胺合成酶的氨基酸序列的比对以及系统进化分析的结果,确定此基因为谷氨酰胺合成酶基因家族成员;经过SignalP3.0预测该蛋白没有信号肽,无切割位点,为非分泌蛋白。经过ProtParam计算该蛋白的理论等电点为5.55,分子量为39.2 kD,不稳定系数为43.82%,为非稳定蛋白。实时定量PCR分析表明,PsGS在西伯利亚蓼叶、茎、地下茎中均有表达。在3%NaHCO3诱导下,该基因在叶和茎中表达升高,在地下茎中表达受到抑制,推测该基因在抵御碱性盐迫时具有重要作用。 赵淑婷 曲春浦 许志茹 李扬 刘关君关键词:西伯利亚蓼 谷氨酰胺合成酶基因 碱性盐胁迫 基因克隆 实时定量PCR 小黑杨FLC基因的克隆及功能解析 被引量:5 2015年 MADS-box家族蛋白是一类重要的调控开花的转录因子,FLC是其家族成员的编码基因之一。FLC在调节开花过程,其功能的发挥受多个途径的调控。本研究利用RT-PCR方法在小黑杨雄花芽中克隆出FLC基因的全长cDNA序列PnFLC。该基因的开放读码框为726bp,编码241个氨基酸残基组成的分子量为27.559kD的蛋白质,蛋白质的等电点为9.37。实时定量荧光PCR结果显示,春化能够使PnFLC在小黑杨根、茎、叶各组织中表达量下调57.9%~84%;启动子GUS染色结果表明,PnFLC启动子在分裂活跃的组织中活性较高。拟南芥的遗传转化结果显示,PnFLC可以调控AtAP1、AtSOC1和AtFT基因的表达,同时延迟拟南芥的开花时间。 孙琦 曲春浦 郑美珠 刘关君关键词:小黑杨 春化 重点实验室开放共享平台的管理和运行 被引量:9 2019年 仪器设备是高校实验平台进行科研和教学的物质保障。为了高效管理重点实验室开放共享平台并最大程度地发挥平台仪器设备的资源效益,从平台仪器设备的配置、管理、运行、开放共享以及维护维修等主要方面进行论述,采取一系列措施和制度,科学管理平台、实现仪器设备的规范化使用、健全维护维修体系、培养高水平的实验技术人员,以保证平台的正常运行和资源共享。为其他实验平台或者实验中心提供切实可行的参考。 黄海娇 曲春浦 曲冠证关键词:维护维修 木本植物幼苗简易水培箱 木本植物幼苗简易水培箱,它涉及一种植物幼苗简易水培箱。本实用新型是为了解决非封闭及见光状态下的长时间水培易滋生绿藻,对处理条件及测定的实验数据造成了外界干扰的技术问题。它包括盒体、两个堵头及数个锥形海绵塞,所述盒体的上端... 许志茹 杨成君 曲春浦 刘关君 孙妍文献传递 一种杨树苗扶持装置 本实用新型涉及绿化工程技术领域,更具体的说是一种杨树苗扶持装置,包括底部挤压板、限位升降滑道、承载升降构件、伸缩扶持装置和转动连接构件,当杨树苗倾倒或长歪时,需要对杨树苗进行扶持,把杨树苗放置到承载槽内,在根据杨树苗的高... 曲春浦 杨成君 张秀丽 许志茹 刘关君文献传递 毛果杨NLP基因家族生物信息学分析与鉴定 被引量:9 2014年 NLP基因家族是一类特殊的转录因子,豆科植物根瘤的形成依赖于该基因家族的存在,在非豆科植物中具有调节植物硝酸盐吸收以及同化的功能。通过对毛果杨(Populus trichocarpa)基因组的生物信息学分析,共鉴定出14个毛果杨NLP基因家族成员,这些成员具有低亲水性的特点,基因结构保守,都含有RWP-RK以及PB1两个保守结构域。通过细胞定位预测,所有成员都定位在细胞核中。直系同源与旁系同源进化分析显示,NLP基因家族成员在漫长的进化过程中经历了严格的选择。染色体定位分析表明,毛果杨NLP基因家族成员坐落在毛果杨9条染色体之上,成员数量的扩增来自于杨柳科染色体自身的扩增事件。芯片数据分析结果显示,NLP基因家族成员在嫩叶,根和雄花中表达,部分基因在木质部以及种子萌发过程之中表达,但所有成员均不在成熟叶片中表达。 吴翔宇 许志茹 曲春浦 李蔚 孙琦 刘关君关键词:NLP 基因家族 西伯利亚蓼非特异性脂质转移蛋白编码序列的克隆及其盐胁迫下的表达 被引量:3 2008年 根据西伯利亚蓼地下茎抑制消减文库(SSH)中获得的非特异性脂质转移蛋白(non-specific lipid transfer protein,nsLTP)EST序列,应用RACE技术克隆了具有PolyA的全长cDNA序列.该序列全长604bp,其5′非翻译区65bp,3′非翻译区227bp,开放阅读框编码103个氨基酸残基;序列分析表明,该基因具有N端信号肽,具有nsLTP家族共有的典型保守区域,属nsLTP家族基因,命名为PsnsLTPs;荧光定量PCR分析表明,PsnsLTPs在西伯利亚蓼叶、茎、地下茎中均有表达.在3%NaHCO3诱导表达下,该基因在地下茎中表达明显受盐胁迫的诱导,推测该基因在抵御盐胁迫时具有重要作用. 刘关君 田旭 刘昌财 曲春浦 刘桂丰 杨传平关键词:西伯利亚蓼 非特异性脂质转移蛋白 盐胁迫 基因克隆 实时定量PCR 杨树天冬氨酸转氨酶基因家族鉴定及表达分析 被引量:4 2019年 【目的】鉴定杨树天冬氨酸转氨酶(ASPAT)基因家族成员,并检测其组织表达特异性,为研究ASPAT在杨树初级氮素同化中的生物学功能提供参考依据。【方法】从杨树基因组数据库中筛选鉴定ASPAT基因家族成员,利用生物信息学软件分析各基因家族成员序列和基因结构及编码蛋白的理化性质、亚细胞定位和保守基序等,并利用实时荧光定量PCR检测正常施氮处理(1 mmol/L NH4NO3)下其在杨树根、茎和叶中的组织表达特异性。【结果】从杨树基因组中共鉴定出9个ASPAT基因家族成员,包括7个真核型ASPAT(AAT)基因(PtASPAT1~PtASPAT7)和2个原核型ASPAT(PAT)基因(PtASPAT8~PtASPAT9),编码区(CDS)序列长度1215~1791 bp,编码的氨基酸数目304~480个,外显子数7~14个,编码蛋白的等电点5.66~8.99,相对分子质量33.11~53.31 kD,脂融指数76.36~93.54,分别定位于叶绿体、线粒体和胞质中,除PtASPAT6和PtASPAT7为不稳定蛋白,其他均为稳定蛋白。拟南芥和杨树的ASPAT蛋白可聚为两大类,Ⅰ类为AAT蛋白,包括PtASPAT1~PtASPAT7和AtASPAT1~AtASPAT5;Ⅱ类为PAT蛋白,包括PtASPAT8、PtASPAT9和拟南芥PAT(AtPAT)。PtASPAT1~PtASPAT6均含有5个保守基序,PtASPAT7缺少2个保守基序,PtASPAT8和PtASPAT9均仅含有1个与AtPAT相同的保守基序。9个杨树ASPAT蛋白均含有磷酸吡哆醛结合位点(SGTHNYSSK)、同源二聚体多肽结合位点(GAVAER)和催化残留活性位点(K)。正常氮素处理下,PtASPAT1基因在杨树根、茎和叶中表达量无明显差异;PtASPAT2~PtASPAT9基因在根部的表达量较在茎和叶中的高,尤其是PtASPAT4和PtASPAT8基因表达量较高。【结论】杨树ASPAT基因家族成员主要在根部表达,尤其是PtASPAT4和PtASPAT8基因在杨树根部的初级氮素同化中发挥重要作用。 王宇晨 曲春浦 刘关君关键词:杨树 基因家族 生物信息学 基因表达 一种可以准确调平的电泳槽 一种可以准确调平的电泳槽。属于分子生物学领域。它解决了现有的电泳槽都是依靠垫脚或垫块进行调平的,由于垫块的厚度难以准确控制,因此很难做到准确调平,导致电泳实验结果产生误差的问题。本实用新型包括槽体、固定支脚、液体水平仪和... 黄海娇 曲春浦文献传递 酵母细胞培养物浓度梯度稀释点样标示器 酵母细胞培养物浓度梯度稀释点样标示器,它涉及一种点样标示器。本实用新型目的解决培养细胞进行梯度浓度稀释时出现大小不一、行列不齐的现象,影响了基因活性检测的准确性及检测结果图片的规范化的问题;酵母细胞培养物浓度梯度稀释点样... 许志茹 杨成君 曲春浦 刘关君 孙妍文献传递