戴振华
- 作品数：22 被引量：53H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核分枝杆菌Rv3871抗原优势肽段的克隆表达及抗原性鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的:为了提高结核病诊断试剂的特异性和敏感性,克隆表达结核分枝杆菌H37Rv株RD1区Rv3871抗原优势肽段,并应用ELISA法对其抗原性进行初步鉴定。方法:利用Biosun生物信息学软件对Rv3871抗原进行表位分析,通过PCR从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增Rv3871抗原优势肽段编码基因,在大肠杆菌HB101中进行表达,采用间接ELISA法初步评价其抗原性。结果:Rv3871-1肽段检测的敏感性为32.5%(13/40),特异性为97.2%(35/36);Rv3871-2敏感性为45%(18/40),特异性为100%;Rv3871-3敏感性为37.5%(15/40),特异性为91.6%。结论:结核分枝杆菌RD1区Rv3871抗原优势肽段Rv3871-2有较高的特异性和敏感性,有望作为候选抗原用于结核病患者的血清学检测。
- 郄霜戴振华杨锡琴修冰水陈堃郭兰芹冯晓燕张庆波张贺秋
- 关键词：结核分枝杆菌
- 柯萨奇病毒A组16型衣壳蛋白VP1的原核表达及初步活性测定被引量：1
- 2012年
- 目的:原核表达柯萨奇病毒A组16型(CVA16)衣壳蛋白VP1,以便于研制血清学检测试剂。方法:在基因库中钓取CVA16-VP1的全长序列,采用PCR逐步合成法合成其全长基因,测序正确后克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)/VP1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化;建立捕获免疫酶联法检测IgM抗体,检测20份手足口病阳性血清和30份阴性血清,评价重组抗原的灵敏度和特异性;采用CVA16全病毒免疫的抗小鼠血清进行Western印迹。结果:重组CVA16-VP1蛋白在大肠杆菌中获得高效表达;用重组蛋白抗原检测,20份手足口病患儿阳性血清中有4份阳性,其中1份同时为肠道病毒71型(EV71)VP1阳性,30份阴性血清无反应。结论:实现了CVA16-VP1的高效表达,初步结果显示重组蛋白具有较好的抗原性,为柯萨奇病毒A组16型诊断试剂的研究奠定了基础。
- 张向颖刘芳谢立陈堃戴振华修冰水张贺秋
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型原核表达抗原性
- 人IA-2基因的部分区段克隆表达及其在1型糖尿病诊断中的应用价值评估被引量：2
- 2010年
- 目的:构建人IA-2基因不同区段原核表达载体,诱导表达获得重组蛋白,并初步验证其在1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体检测中的价值。方法:用RT-PCR方法调取目的基因,构建相应的原核表达质粒,转化大肠杆菌HB101,诱导表达获得纯化重组蛋白;以重组蛋白为包被抗原,初步建立检测蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗体的ELISA方法,评价各片段在1型糖尿病诊断中的价值。结果:获得了2种可被1型糖尿病患者血清识别的重组人蛋白酪氨酸磷酸酶抗原区段IA-2(601～979)和IA-2(683～979),检测敏感性和特异性相当,但IA-2(683～979)检测的阳性D450nm值明显高于IA-2(601～979),成为首选的抗原区段。结论:所选重组人IA-2(683～979)抗原区段具有良好的抗原性,可作为1型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原。
- 王国华张贺秋宋晓国陈坤朱翠侠楚晓燕刘喜明戴振华方平冯晓燕
- 关键词：1型糖尿病蛋白酪氨酸磷酸酶酶联免疫吸附测定法
- 甲型H1N1流感病毒NA、PB2和PA表位抗原区段的克隆和表达被引量：3
- 2010年
- 目的:分析比对甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)、聚合酶B2(PB2)和聚合酶A(PA)抗原的序列,克隆表达保守的和变异的表位抗原区段,为免疫学诊断试剂的研究提供候选抗原。方法:采用BioSun生物学软件比较新近公布的A/H1N1流感病毒和我国猪流感病毒浙江株NA、PB2和PA抗原序列,并预测筛选NA、PB2和PA抗原表位保守区段与变异区段,采用PCR逐步合成法合成NA、PB2和PA表位抗原区段基因序列,并利用原核表达载体pBVIL1进行克隆表达。结果:筛选的保守表位抗原区段和变异表位抗原区段为NA/135～180aa、NA/310～350aa、PB2/1～80aa、PA/41～90aa、PA/231～280aa和PA/341～400aa;获得6条表位抗原区段基因序列,且6条表位抗原区段均获得了高效表达,得到纯化后的抗原。结论:获得了A/H1N1流感病毒NA、PB2和PA表位抗原区段,为进一步研制特异的甲型流感病毒快速诊断试剂提供了抗原储备。
- 宋晓国王国华朱翠侠戴振华修冰水何竞陈坤张向颖凌世淦杨静王升启张贺秋冯晓燕
- 关键词：甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶克隆
- 结核分枝杆菌融合抗原38F和64F诊断活动性肺结核的价值被引量：3
- 2013年
- 目的探讨结核分枝杆菌融合抗原38F和64F对活动性肺结核患者血清中IgG、IgM和IgA抗体检测的诊断价值。方法利用结核分枝杆菌抗原优势肽段融合抗原38F和64F,通过ELISA法对223例活动性肺结核患者进行结核分枝杆菌特异性IgG、IgM和IgA抗体水平检测。223例活动性肺结核患者分为三组,第一组为涂片和培养共同阳性组(86例),第二组为涂片阴性且培养阳性组(51例),第三组为涂片和培养共同阴性组(86例)。结果223例活动性肺结核病患者,第一组IgG、IgM和IgA的联合检出率为79.07%(68/86);第二组IgG、IgM和IgA的联合检出率为62.75%(32/51);第三组IgG、IgM和IgA的联合检出率为69.77%(60/86)。全部样本血清学方法的检出率为71.75%(160/223)。结论结核分枝杆菌融合抗原38F和64F对于活动性肺结核具有较高的辅助诊断价值,并且IgG、IgM和IgA抗体联合检测可以提高检出率。
- 郄霜张立戴振华赵平杨锡琴郭兰芹修冰水陈堃王国华张贺秋冯晓燕
- 关键词：结核细菌细菌蛋白质类血清学试验
- 抗结核分枝杆菌抗原优势肽段单克隆抗体的制备和初步鉴定
- 2012年
- 目的:制备和初步鉴定抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体。方法:以两种优势肽段的融合抗原PGEX-4T-2/38kD-ESAT6-CFP10和PGEX-4T-2/Mtb8.4-MPT64-Mtb16.3-Mtb8作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合后,通过有限稀释法筛选阳性克隆,经ELISA和Western blotting分析单抗的特性和特异性。结果:获得17株结核分枝杆菌抗原优势肽段特异单克隆抗体杂交瘤细胞株,经间接ELISA方法测定,杂交瘤细胞培养上清效价为28～212,接种小鼠的腹水效价为216～220。Western blotting结果显示,每株单抗均能特异性的识别融合蛋白的优势肽段。结论:制备了针对抗结核分枝杆菌抗原优势肽段的单克隆抗体,为结核分枝杆菌的快速诊断和抗原性分析奠定了基础。
- 戴振华王国华冯晓燕张立陈堃宋晓国朱翠侠白冠中张贺秋
- 关键词：结核分枝杆菌单克隆抗体
- 结核分枝杆菌抗原定量检测技术的建立及其初步评价
- 结核病(TB)仍然是威胁全球人类健康一个重大的挑战。在2012年估计有新增结核病例860万，死于结核病有130万人，其中有30万人为HIV阳性。据估计，全球范围内的结核病发病率和与人类免疫缺陷病毒(HIV)共感染的病例数...
- 戴振华
- 关键词：结核分枝杆菌特异性抗原化学发光
- 抗原修复在陈旧石蜡切片乳腺珠蛋白免疫组化检测中的应用被引量：2
- 2014年
- 目的探索一种简便有效的抗原修复方法,用于陈旧切片的人乳腺珠蛋白（human mammaglobin,h MAM）免疫组化检测。方法将乳腺癌患者陈旧乳腺组织石蜡切片脱蜡至水,按常规免疫组化步骤进行检测。其中,实验组直接将切片浸入p H 3.5的柠檬酸盐缓冲液中室温修复10~15 min;同时以微波和高压加热修复法处理相应患者石蜡切片作为对照,最后以SP检测系统检测抗原修复及与抗体反应的效果。结果实验组与高压组和微波组比较,修复效果较好,且无组织脱片与折损现象。结论建立了一种利用陈旧组织切片检测乳腺珠蛋白的简便、有效的抗原修复方法,并能很好地防止脱片现象发生。
- 段翠密杨锡琴修冰水刘志强张旭辉戴振华阙海萍冯晓燕张贺秋
- 关键词：抗原修复人乳腺珠蛋白石蜡显微切片术
- 结核分枝杆菌抗原检测研究进展被引量：4
- 2013年
- 结核病仍然是一个严重的全球性公共卫生问题,有效控制结核病的障碍在于缺乏早期、准确的诊断方法。机体受到结核分枝杆菌感染后,体内首先出现的是结核分枝杆菌特异性抗原。因此,结核分枝杆菌抗原检测作为结核病早期诊断的方法可能具有很高的诊断价值。我们简要综述了结核分枝杆菌抗原检测的相关研究进展。
- 戴振华郭兰芹张贺秋冯晓燕
- 关键词：结核病结核分枝杆菌抗原检测
- 甲型流感病毒A/H1N1-NP抗原表位区段的克隆和表达
- 目的：分析比对甲型流感病毒A/H1N1-NP抗原的序列，克隆表达保守的和变异的表位抗原区段，为免疫学诊断试剂的研究提供候选抗原。
方法：采用BioSun生物学软件比较新近公布的A/H1N1病毒和我国猪流感病毒浙...
- 冯晓燕凌世淦王升启张贺秋宋晓国修冰水何竞王国华陈坤朱翠霞戴振华张向颖
- 关键词：甲型流感病毒核蛋白克隆表达
- 文献传递
