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徐运兰: 作品数：20 被引量：62H指数：5; 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”武汉市青年科技晨光计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>

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细胞周期素依赖性激酶抑制剂olomoucine对大鼠脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及其意义被引量：9: 2006年; 目的探讨细胞周期素依赖激酶抑制剂olomouc ine对脊髓损伤后轴突再生微环境的影响及意义。方法建立脊髓半切损伤模型,实验大鼠随机分为假手术组、损伤对照组和olomouc ine干预组,采用W estern印迹分析脊髓损伤后细胞周期相关蛋白的表达;应用免疫荧光技术检测损伤区域胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG)以及生长相关蛋白43(GAP-43)的表达;采用改良的Gale联合评分法对大鼠瘫痪后肢进行运动功能评估。结果假手术组细胞周期素(cyc lin)A、B1、E和增殖细胞核抗原以及GFAP、CSPG和GAP-43的表达较弱;脊髓损伤后cyc linA、cyc linB1、cyc linE和细胞周期素(PCNA)等细胞周期相关蛋白的表达显著增高,星形胶质细胞明显活化增殖,GFAP和CSPG的表达明显增强(均P<0.01),GAP-43的表达高于假手术组(P<0.05);给予olomouc ine干预后,细胞周期相关蛋白的表达显著下调,损伤区域星形胶质细胞的增殖和胶质瘢痕形成受到抑制,胶质瘢痕产生的CSPG的表达明显减少,GAP-43的表达显著增高,瘫痪后肢的运动功能明显改善(均P<0.05)。结论olomouc ine可通过调控细胞周期,抑制脊髓损伤后胶质细胞的活化增殖和胶质瘢痕的形成,减少抑制因子CSPG的表达以及上调有利于轴突再生的GAP-43的表达,改善损伤后轴突再生微环境最终促进瘫痪后肢的运动功能恢复。; 田代实王伟徐运兰喻志源谢敏杰王萍张贵斌; 关键词：脊髓损伤 GAP-43蛋白细胞周期

细胞外信号调节激酶对细胞周期调控的影响被引量：2: 2011年; 目的:研究脑缺血后细胞外信号调节激酶(ERK)对细胞周期调控的影响。方法:建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,随机分为脑缺血组(对照组及干预组)和假手术组。干预组于缺血前30min尾静脉注入ERK阻滞剂U0126,对照组尾静脉注入相同体积不含U0126的DMSO稀释溶液。应用免疫组织荧光化学法观察细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白E(Cyclin E)阳性细胞表达;免疫印迹(Western blot)检测磷酸化ERK1/2(pERK1/2)、Cyclin D1和Cyclin E的蛋白表达;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察转录因子E2FmRNA的表达。结果:干预组Cyclin D1和Cyclin E阳性表达的细胞数较对照组显著减少(P<0.05);缺血对照组pERK1/2蛋白表达明显强于干预组(P<0.05),4h时间点表达最为明显,12h时间点恢复到基线水平,Cyc-lin D1和Cyclin E表达6h开始升高,12h表达最为明显,干预组较对照组显著减弱(P<0.05);缺血对照组E2FmRNA的表达显著强于干预组和假手术组(P<0.05),以7d表达最为明显。结论:ERK在大鼠脑缺血中发挥重要作用,抑制脑缺血引起的pERK1/2磷酸化可降低细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E和E2F的表达,即细胞外信号调节激酶可影响细胞周期的调控。; 张贵斌王伟徐运兰王萍田代实; 关键词：ERKS U0126 CYCLIN CYCLIN E2F 细胞周期

运用电穿孔技术建立小鼠脑内基因转染模型: 2007年; 目的借助生物物理技术建立一种高效实用的脑内基因转染技术,探讨其在神经科学研究中的应用。方法选取孕15 d C57系小鼠,取出子宫角,用自制玻璃电极将目的质粒和荧光质粒混匀后注入胎鼠侧脑室,应用BTX电转染仪在胎鼠脑两颞极间给予设定的电脉冲刺激,后将胎鼠放入孕鼠腹腔让其自然出生后8 d取脑,冰冻切片,抗GFP、抗Tubulin免疫组化染色,荧光显微镜下观察。结果在小鼠大脑皮层Ⅱ、Ⅲ层,转染CAG-EGFP的脑片可见绿色荧光细胞带,转染细胞抗GFP免疫组化染色阳性;转染DS-red的呈红色荧光细胞带,转染细胞均呈抗Tubulin免疫组化染色阳性。结论子宫内胚胎电转染技术是一个很好的在体基因转染技术,可为神经科学研究提供一个很好的技术平台。; 杜鹏王春雷徐运兰喻志源谢敏杰王伟; 关键词：基因转染小鼠

选择性CDK抑制剂对大鼠局灶性脑缺血后胶质增殖及疤痕形成的抑制作用被引量：1: 2006年; 目的:探讨选择性周期素依赖性蛋白激酶抑制剂Olomoucine对局灶性脑缺血后星形胶质细胞增殖及胶质疤痕形成的抑制作用。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组12只、模型组27只和干预组33只。3组均手术暴露颅骨,模型组和干预组建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型,之后干预组腹腔注射Olomoucine,分别将3组大鼠于处理后3、7、30 d处死,应用免疫组织化学法检测梗死灶周围胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;Western blot法观察损伤侧皮质GFAP、增殖细胞核抗原(PCNA)、周期素蛋白A(CyclinA)和周期素蛋白B1(Cy-clinB1)的表达。结果:缺血后各组梗死灶边缘区GFAP表达明显增强,缺血后7和30 d模型组GFAP表达明显强于干预组(P<0.05),并且7和30 d对照组缺血边缘区可见胶质疤痕形成,尤以30 d最为明显;GFAP、PCNA、Cy-clinA和CyclinB蛋白的表达,模型组明显高于干预组(P<0.05)。结论:Olomoucine可部分抑制胶质细胞的活化增殖及疤痕的形成。该结果提示调控细胞周期可能是治疗脑缺血新的方向。; 张贵斌邱张徐运兰王伟谢敏杰; 关键词：OLOMOUCINE 脑缺血

大鼠脑缺血再灌注后神经细胞的细胞周期特征的比较研究被引量：5: 2006年; 目的比较观察大鼠局灶性脑缺血后星形胶质细胞和神经元细胞周期的变化特征。方法采用线栓法大鼠大脑中动脉栓塞模型,利用流式细胞技术检测假手术组和缺血再灌注后不同时间点各组大脑皮层和海马中星形胶质细胞和神经元细胞周期的异常激活和动态变化。结果缺血后大脑皮层中神经元24h时即发生明显细胞周期变化,而3d时进入细胞周期的星形胶质细胞才明显增加;海马中星形胶质细胞却先于神经元进入细胞周期,于24h时细胞周期即发生明显变化,与假手术组比较有显著差异(P<0.01)。结论在不同脑区星形胶质细胞和神经元两者对缺血性脑损伤的敏感性互不相同,并且不同脑区的星形胶质细胞对缺血性脑损伤的敏感性也有不同,脑缺血后2种细胞均出现细胞周期的异常激活。; 王萍王伟谢敏杰喻志源徐运兰张贵斌田代实谢大兴; 关键词：细胞周期脑缺血流式细胞术

纤维蛋白原与不同类型脑梗死发病及短期预后间的相关性被引量：3: 2011年; 目的:探讨血浆纤维蛋白原(Fib)水平与不同类型脑梗死发病及短期预后的关系。方法:选取239例急性期脑梗死患者为病例组,根据TOAST分型分为心源性脑栓塞(CE)亚组、大动脉粥样硬化性卒中(LAA)亚组、小动脉闭塞性卒中(SAO)亚组、其他原因引发的缺血性卒中(SDE)亚组及原因不明的缺血性卒中(SUE)亚组等5个亚组,并招募127例健康志愿者为对照组。应用Clauss法测定受试者血浆Fib水平,并对各组患者在入院后24 h及第10天分别进行神经功能评定。结果:CE亚组及LAA亚组血浆Fib水平[(4.30±1.08)g/L,(4.29±1.26)g/L]均明显高于对照组[(3.33±0.52)g/L]及SAO亚组[(3.42±0.68)g/L](P<0.05);SAO亚组血浆Fib水平与对照组比较无统计学差异。多元Logistic回归显示,血浆Fib水平与CE及LAA亚组的发病均呈显著相关,但与SAO亚组的发病无明显相关性;脑梗死急性期血浆Fib水平与CE及LAA亚组患者的短期预后有明显的相关性,与SAO亚组患者的短期预后无明显相关关系。结论:血浆Fib水平可能是CE及LAA发病及短期预后不良的独立危险因素,但可能与SAO的发病及短期预后无明显相关。; 朱文浩唐洲平徐运兰王伟; 关键词：纤维蛋白原脑梗死预后

脑缺血后大鼠神经元和星形胶质细胞P21^(cip1)表达的研究: 2007年; 目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子P21cip1在神经元和星形胶质细胞的表达。方法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAo)再灌注模型,应用流式细胞术检测各组MCAo再灌注后不同时期神经元和星形胶质细胞中的P21cip1的表达。结果缺血侧皮层区星形胶质细胞和神经元中的P21cip1的表达在再灌注3d、7d、14d后表达下调,与假手术组比较有显著性差异(P<0.05);神经元中的P21cip1的表达和星形胶质细胞中的P21cip1的表达无显著性差异(P>0.05)。结论局灶性脑缺血再灌注损伤后,缺血侧皮层区星形胶质细胞和神经元的p21cip1表达下调。; 陈华先朱舟王萍张贵斌喻志源谢敏杰徐运兰王伟; 关键词：P21^CIP1

毛细管电泳检测神经细胞凋亡被引量：2: 2005年; 建立了毛细管电泳检测凋亡细胞DNA片段的方法。以DNA相对分子质量标准品为溶质,考察了分离条件(电压、进样时间、温度、聚合物浓度)对分离的影响。在优化条件下,利用毛细管无胶筛分电泳对缺氧缺血过程中不同时间点神经PC12细胞DNA片段进行了分析,并与流式细胞仪结果比较,研究缺氧缺血时胶质细胞凋亡过程。; 谢敏杰朱舟余勇飞王伟徐运兰; 关键词：毛细管电泳星形胶质细胞凋亡 DNA

细胞外信号调节激酶对大鼠局灶性脑缺血后细胞周期调控的影响: 2008年; 目的研究脑缺血后细胞外信号调节激酶（ERKs）对细胞周期调控的影响。方法建立光化学法诱导大鼠局灶性脑缺血模型，分为脑缺血组（对照组及治疗组）和假手术组。治疗组于缺血前30rain尾静脉注入U0126溶液，对照组尾静脉注入相同体积不含U0126的DMSO稀释溶液。应用免疫组织荧光化学法观察细胞周期蛋白D1（CyclinD11和细胞周期蛋白E（CyclinE）阳性细胞表达；免疫印迹（Westem blot）检测磷酸化ERK1／2（pERKl／2）、CyclinD1和CyclinE的蛋白表达；半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）观察转录因子E2FmRNA的表达。结果治疗组CyclinD1和CyclinE阳性表达的细胞数较对照组显著减少fP〈0．051；缺血对照组pERK1／2蛋白表达显著强于治疗组（P〈0．05），4h时间点表达最为明显，12h时间点恢复到基线水平，CyclinD1和CyclinE表达6h开始升高，12h表达最为明显，治疗组较对照组显著减弱伊〈0．05）；缺血对照组E2FmRNA的表达显著强于治疗组和假手术组伊〈0．05），以7d表达最为明显。结论EeKs在大鼠脑缺血中发挥重要作用，抑制脑缺血引起的ERK1／2磷酸化，可降低细胞周期蛋白CyclinD1、CyclinE和E2F的表达，即ERKs可影响细胞周期的调控。; 张贵斌付度关王伟徐运兰王萍田代实; 关键词：ERKS U0126 CYCLINE E2F 细胞周期

细胞周期抑制剂对局灶性缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的影响被引量：5: 2006年; 目的探讨细胞周期抑制剂对脑神经细胞凋亡的影响。方法采用光化学方法制作局灶性缺血模型,干预组大鼠腹腔注射细胞周期抑制剂Olomoucine。用HE染色测定皮层梗死灶的体积;免疫组织化学法观察缺血后第3天假手术组、缺血对照组和干预组大鼠梗死灶周围凋亡细胞的表达;用聚丙烯酰胺凝胶电泳(Westernblot)观察Caspase3蛋白的表达。结果对照组梗死灶明显大于干预组;干预组梗死灶周围凋亡细胞数较假手术组显著增高,但明显低于对照组(P<0.05);Westernblot显示Caspase3蛋白的表达,干预组较假手术组增高(P<0.05),而较对照组明显降低(P<0.05)。结论脑缺血损伤后细胞周期调控参与了神经细胞的凋亡过程。; 张贵斌徐运兰王伟谢敏杰; 关键词：细胞周期细胞凋亡

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