张艳丽
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区的表达与配体结合活性的鉴定被引量：1
- 2008年
- 血管内皮生长因子受体(VEGFR)是血管内皮生长因子的特异性受体,VEGFR-2在介导VEGF刺激内皮细胞增殖及血管通透性等生物学活性中起重要作用。在大肠杆菌中实现可溶性的人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区的表达,并鉴定其与配体结合的活性。采用重叠PCR的方法合成人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区基因,将该基因与高效表达载体pET-32a重组,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,表达产物依次经过CM阳离子交换树脂和镍柱亲和层析纯化。利用ELISA法和体外抑制VEGF刺激的人脐静脉内皮细胞增殖实验检测表达产物与配体结合的活性。SDS-PAGE显示,目的蛋白主要以可溶性Trx-KDR3融合蛋白表达于胞质,30oC时1 mmol/L IPTG诱导细菌5 h融合蛋白表达量约占胞质可溶性总蛋白的20%,经CM阳离子交换树脂和镍柱亲合层析纯化得到纯度为95%的产物,Western blotting鉴定是目的蛋白。ELISA和体外HUVEC细胞增殖实验显示,表达产物具有特异性结合hVEGF165的活性,且该作用呈一定的浓度依赖性。具有配体特异性结合活性的可溶性人血管内皮生长因子受体KDR胞外3区成功表达,为靶向血管抗肿瘤治疗和相关抗体的研究奠定了基础。
- 张娟张艳丽李海鑫陈卫张弢王旻
- 关键词：血管内皮生长因子KDR
- 血管内皮生长因子靶向抗肿瘤药物的研究与开发被引量：1
- 2007年
- 血管内皮生长因子（VEGF）家族在肿瘤血管生成与转移中起关键作用，从不同途径阻断VEGF的生物学作用可以达到治疗肿瘤的目的。目前以VEGF及其受体为靶标研究开发了抗体、可溶性受体、酪氨酸激酶抑制剂、核酸和多肽类药物，均取得了较好的进展。
- 张艳丽张娟王旻
- 关键词：血管内皮生长因子类肿瘤
