张艳丽
- 作品数：13 被引量：4H指数：1
- 供职机构：温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：温州市科技计划项目温州市科技局科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 理阿诺碱对雷帕霉素诱导的EOCs功能及其相关eNOS蛋白活性的影响
- 目的探讨理阿诺碱(Ryanodine)对雷帕霉素(Rapamycin)诱导的内皮生长晕细胞(Endothelial outgrowth cells,EOCs)功能抑制的影响及其相关内皮型一氧化氮合酶(endothelia...
- 邵小琳张怀勤叶盛林以诺杨德业夏雪黄晓燕张艳丽
- 文献传递
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体参与雷帕霉素诱导血管内皮细胞功能损伤的体外研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨雷帕霉素对内皮细胞凋亡和增殖、迁移能力的影响,以及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的变化。方法:用浓度为0、1、10、100μg/L的雷帕霉素孵育内皮细胞24 h,应用CCK8法检测血管内皮细胞的增殖能力,Transwell小室和划痕试验检测细胞迁移能力,DAPI染色观察凋亡细胞核形态改变,Western blotting法检测caspase-3活性以显示血管内皮细胞的凋亡,并用Western blotting检测TRAIL在凋亡的内皮细胞中的表达。结果:雷帕霉素(1-100μg/L)能诱导血管内皮细胞凋亡并抑制其迁移能力(P<0.01)。除雷帕霉素1μg/L外,10μg/L和100μg/L雷帕霉素均能抑制内皮细胞增殖能力(P<0.01),同时雷帕霉素(10-100μg/L)使TRAIL蛋白表达增加,两者作用均呈浓度依赖性(P<0.01)。结论:雷帕霉素能诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖和迁移能力。TRAIL表达上调与雷帕霉素诱导血管内皮细胞损伤有一定的相关性。
- 叶盛张怀勤林以诺黄伟剑张艳丽邵小琳
- 关键词：雷帕霉素内皮细胞细胞迁移肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- 血管内皮生长因子对内皮生长晕细胞冻存后复苏率及增殖、迁移能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究血管内皮生长因子对冻存后内皮生长晕细胞复苏率及其增殖、迁移能力的影响。方法密度梯度离心法分离脐带血中单个核细胞,体外扩增培养内皮生长晕细胞,免疫组织化学法、荧光染色法鉴定内皮细胞特性。分别采用不含血管内皮生长因子和含50μg/L血管内皮生长因子的冻存液对内皮生长晕细胞进行冻存,分为正常组、对照组、50μg/L血管内皮生长因子组,24 h后复苏并观察细胞的复苏率及其增殖、迁移能力。结果50μg/L血管内皮生长因子组可提高冻存复苏后内皮生长晕细胞的复苏率。24 h内两组细胞增殖、迁移能力均较正常组减弱(P<0.01),但50μg/L血管内皮生长因子组显示对内皮生长晕细胞增殖、迁移能力的保护作用。48 h后50μg/L血管内皮生长因子组细胞迁移能力较正常组增强(P<0.01),增殖能力接近正常组(P>0.05),但对照组在观察期间内细胞增殖和迁移能力均较正常组与50μg/L血管内皮生长因子组减弱(P<0.01)。结论血管内皮生长因子可以提高冻存后内皮生长晕细胞的复苏率以及复苏后细胞的增殖、迁移能力。
- 张艳丽张怀勤林以诺吴高俊戴晓春王超群
- 关键词：血管内皮生长因子冻存
- 理阿诺碱对雷帕霉素诱导的内皮生长晕细胞功能抑制的保护作用
- 2011年
- 目的 探讨理阿诺碱对雷帕霉素诱导的内皮生长晕细胞（EOCs）功能抑制的影响.方法 密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,培养并扩增EOCs,免疫组化法、荧光染色法鉴定其内皮细胞特性.分别加雷帕霉素、理阿诺碱、理阿诺碱预处理1h再加雷帕霉素,与EOCs作用24h,CCK8检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞迁移能力,并在倒置显微镜下检测细胞的黏附能力.结果 雷帕霉素抑制EOCs的增殖、迁移、黏附能力（P＜0.05）.理阿诺碱预处理1h能改善雷帕霉素对EOCs的增殖、迁移、黏附的抑制作用（P＜0.05）,理阿诺碱单独作用对EOCs的增殖、迁移、黏附无影响（P ＞0.05）.结论 雷帕霉素抑制EOCs的增殖、迁移、黏附能力 理阿诺碱可以改善雷帕霉素诱导的对体外培养的EOCs增殖、迁移、黏附的抑制作用.
- 邵小琳虞慧君张怀勤林以诺叶盛夏雪张艳丽
- 关键词：雷帕霉素再内皮化血管狭窄
- 雷帕霉素对血管内皮细胞凋亡及增殖、迁移、成血管能力的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨雷帕霉素(rapamicin)对内皮细胞凋亡及增殖、迁移、成血管能力的影响。方法:培养脐静脉内皮细胞并分组,将浓度为0、1、10、100ng/mL的rapamycin与内皮细胞作用24h,DAPI染色观察凋亡细胞核形态变化,CCK8法检测内皮细胞的增殖能力,transwell小室检测迁移能力,并在倒置显微镜下检测细胞的成血管能力。结果:10、100ng/mL rapamycin能明显抑制内皮细胞增殖能力(P<0.01)。同时rapamycin(1～100ng/mL)能抑制内皮细胞的迁移能力(P<0.01)。rapamycin处理组和对照组相比,DAPI染色可见更显著的细胞凋亡形态学改变。100ng/mL rapamycin作用组与对照组相比,能明显降低细胞成血管能力(P<0.01)。结论:rapamycin可以诱导内皮细胞发生凋亡并抑制其增殖、迁移和成血管能力。
- 叶盛张怀勤林以诺黄伟剑张艳丽邵小琳
- 关键词：细胞凋亡雷帕霉素内皮细胞细胞增殖
- 雷帕霉素对血管内皮细胞生物学功能的影响
- 目的探讨雷帕霉素(rapamycin)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡和增殖、迁移、成血管能力的影响。方法取体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)按1×10个/孔密度接种至6孔板中并分为四组:(1)正常对照组:加入...
- 叶盛张怀勤林以诺黄伟剑张艳丽邵小琳
- 文献传递
- 内皮生长因子对低温冻存内皮生长晕细胞增殖及黏附能力的影响
- 2012年
- 目的:探讨不同浓度血管内皮生长因子(vessel endothelial growth factor,VEGF)对内皮生长晕细胞(endothelial outgrowth cell,EOC)低温冻存过程中细胞生物学功能的保护作用。方法:采用密度梯度离心法分离脐血中的单个核细胞,培养扩增EOC,免疫组化、荧光染色及流式细胞仪检测其内皮细胞特性。第2代细胞用含0、10、25、50ng/mL VEGF的冻存液冻存,24h后复苏,CCK-8法检测增殖能力;差速贴壁法检测黏附能力。结果:CD34+、KDR+、VE-Cadherin+细胞分别为(61.17±0.44)%、(34.79±6.31)%、(74.64±6.96)%。10ng/mL VEGF组与空白对照组相比,其增殖能力无统计学差异,而黏附能力得到一定程度的保护。25ng/mLVEGF和50ng/mL VEGF组细胞复苏后的细胞增殖能力与黏附能力均较空白对照组增强。结论:VEGF能够不同程度地保护EOC在低温冻存中的生物学功能。
- 吴高俊林以诺张艳丽张怀勤
- 关键词：血管内皮生长因子类增殖能力
- Pax-8基因抑制后心肌细胞中UCP2的表达
- 2012年
- 目的:建立Pax-8基因敲除模型及Pax-8基因的体外干扰实验,探索心肌细胞中Pax-8基因抑制后解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)基因表达的变化。方法:Pax-8基因敲除纯合子小鼠(Pax-8 KO-/-)为实验组,Pax-8基因敲除小鼠杂合子(Pax-8 KO+/-)和野生型(Pax-8 KO+/+)为对照组;同时在体外实验的大鼠心肌细胞株中,加入Pax-8基因的小干扰RNA(Pax-8 siRNA)为实验组,非特异性siRNA(NC siRNA)组和空白组为对照组。采用RT-PCR和Western blotting技术测定UCP2的mRNA和蛋白质表达。结果:在Pax-8基因敲除动物模型中,与Pax-8基因敲除小鼠杂合子组和野生型组相比,实验组Pax-8基因敲除小鼠纯合子心脏组织UCP2的mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05),而对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);在体外干扰实验中的结果显示,与NC siRNA组和空白对照组比较,Pax-8 siRNA组UCP2的mRNA表达和蛋白表达均上调(P<0.05),而NC siRNA组与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Pax-8基因被抑制后,心肌细胞凋亡增加,UCP2基因表达上调,提示UCP2参与了心肌细胞凋亡的调控。
- 戴晓春黄晓燕周希高瞻王本极张艳丽杨德业
- 关键词：解偶联蛋白2心肌细胞凋亡基因敲除小鼠
- Pax-8基因抑制后心肌细胞UCP2的表达
- 建立Pax-8基因敲除模型及Pax-8基因的体外干扰实验,探索Pax-8基因抑制后心肌细胞中UCP2基因表达的变化。研究表明，UCP2在Pax-8基因抑制后的心肌细胞中表达上调，Pax-8基因抑制后的心肌细胞凋亡增加，提...
- 杨德业戴晓春黄晓燕周希高瞻王本极张艳丽
- 关键词：心肌细胞基因表达
- 理阿诺碱增强雷帕霉素诱导的内皮生长晕细胞功能并降低内皮型一氧化氮合酶（Thr495）的磷酸化水平
- 2011年
- 目的探讨理阿诺碱（ryanodine）对雷帕霉素（rapamycin）诱导的内皮生长晕细胞（endothelialoutgrowthcell，EOC）功能及其相关总内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表达及eNOS（Thr495）的磷酸化水平。方法密度梯度离心法分离脐血单个核细胞，培养并扩增EOC，免疫组化法、荧光染色法鉴定其内皮细胞特性。实验分为对照组、10nmol/L rapamycin组（rapamycin组）、10μmoL／Lryanodine预处理1h再加10nmol/L的rapamycin组（ryanodine＋rapamycin组）、10μmoL／Lryanodine组（ryanodine组），各处理组与EOC作用24h，CCK8检测细胞增殖能力，Transwell小室检测细胞迁移能力。用特异性的总eNOS抗体及磷酸化的eNOS（Thr495）[p-eNOS（Thr495）]抗体的蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测总eNOS蛋白表达及eNOS（Thr495）磷酸化水平。结果rapamycin组EOC的增殖及迁移均低于对照组（P均〈0．05），eNOS（Thr495）磷酸化水平高于对照组（P〈0．05），总eNOS蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义。ryanodine＋rapamycin组EOC的增殖及迁移均高于rapamycin组（P均〈0．05），eNOS（Thr495）磷酸化水平低于rapamycin组（P〈0．05），总eNOS蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义。ryanodine组EOC的增殖、迁移及总eNOS及eNOS（Thr495）磷酸化水平与对照组比较差异均无统计学意义。结论rapamycin可抑制EOC的增殖及迁移，增强eNOS（Thr495）磷酸化水平。ryanodine可以改善rapamycin诱导的EOC增殖及迁移能力的抑制，降低eNOS（Th1495）磷酸化水平。
- 邵小琳张怀勤叶盛林以诺杨德业夏雪黄晓燕张艳丽
- 关键词：冠状动脉再狭窄西罗莫司
