张方琳
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金上海市“科技创新行动计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肺癌高转移细胞系的转移相关基因观察
- 2011年
- 目的 观察人肺癌高转移细胞系SPC-A-1sci的转移相关基因表达,同时验证该细胞系的体内高转移特性.方法 通过Western blot,FICC、IHC等方法检测转移相关基因CD44,OPN,MMP-9,EGFR在高、低转移细胞系间的差异表达;采用尾静脉注射方法观察高、低转移细胞系的转移特性.结果 与低转移细胞系相比,转移促进基因CD44,OPN,MMP-9,EGFR在高转移细胞中的表达均显著上调.体内实验表明,8周时高转移细胞系的肺转移率为100%（12/12）,而低转移细胞系的肺转移率仅为16.67%（2/12）.结论 人肺癌高转移细胞系SPC-A-1sci在转移相关基因表达和动物体内均表现出典型的高转移特性。
- 姚明李静英德水张方琳闫明霞刘蕾张书霞
- 关键词：肺癌细胞株肿瘤转移转移相关基因
- 应用iTRAQ技术筛选高转移和低转移肺腺癌细胞中差异表达的膜蛋白被引量：4
- 2013年
- 目的:筛选高转移和低转移肺腺癌细胞中差异表达的膜蛋白,以寻找肺癌的生物学标志物或治疗的潜在靶点。方法:提取具有相同来源、不同转移潜能的肺腺癌SPC-A-1和SPC-A-1sci细胞的膜蛋白,应用核素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)技术标记膜蛋白,联合纳升液相色谱和串联质谱(nanoliquid chromatography-tandem mass spectrometry,Nano-LC-MS/MS)分离、分析肽段,采用Proteinpilot 4.0软件对蛋白进行鉴定和定量分析,对获得的差异蛋白进行GO(Gene Ontology)分析,应用实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法进行验证。结果:样品进行4次NanoLC-MS/MS,鉴定出符合假阳性率<1%的分别有1413、1374、1297和1351个蛋白,标记率>95%,其中4次都上调的蛋白有27个(膜蛋白20个)、下调的蛋白有32个(膜蛋白25个)。GO分析显示,差异蛋白的分子功能主要集中在细胞骨架蛋白结合、同源蛋白结合和酶结合。生物学进程主要集中在代谢进程和细胞定位。SPC-A-1sci细胞中ITGA3(integrin alpha-3)、MYH9(myosin,heavy chain9)、PLEC1(plectin 1)、HADHA(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase)、HK1(hexokinase-1)、KTN1(kinectin 1)、ESYT1(extended synaptotagmin-like protein 1)、ALDH18A1(aldehyde dehydrogenase 18 family,member A1)、ATP5A1(ATP synthase alpha-subunit)、LMNB2(lamin-B2)、CAV1(caveolin-1)和CK-19(keratin,typeI cytoskeletal19)mRNA的表达水平以及CLTC(clathrin,heavy chain)、HK1、LMNB2和CK-19蛋白的表达水平均高于SPC-A-1细胞,与质谱定量结果一致。结论:iTRAQ联合NanoLC-MS/MS技术能高通量地筛选与转移相关的膜蛋白,为肺腺癌患者转移的诊断和预后提供可能的生物学标志物或治疗靶点。
- 林河春张方琳耿沁赵方瑜孙磊孔韩卫李静姚明
- 关键词：膜蛋白质类肿瘤转移ITRAQ
