张夏兰
- 作品数:11 被引量:49H指数:5
- 供职机构:四川农业大学动物科技学院更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 兔病毒性出血症基因工程疫苗的研究进展被引量:14
- 2007年
- 兔病毒性出血症俗称兔瘟,它是由兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)引起的一种急性、烈性、高度接触性、致死性传染病。1984年中国首次报道了该病。RHDV曾是兔的一种毁灭性传染病,因给养兔业带来巨大的经济损失而备受养兔业的关注。1989年,世界动物卫生组织(OIE)将该病正式列为B类传染病,我国将其列为二类传染病。
- 张夏兰王红宁张昌菊向菁徐永莉余协中
- 关键词:兔病毒性出血症基因工程疫苗世界动物卫生组织兔出血症病毒VIRUSRHDV
- 一株无血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及其衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析被引量:10
- 2006年
- 从临床病料中分离鉴定出1株无血凝性的致病性兔出血症病毒(RHDV),命名为Yaan-1。HA试验测得该毒株原代及经兔体传3代后的肝毒在25℃、37℃和4℃时均无血凝性;但在琼脂扩散试验和对流免疫电泳中均可见分离株与常规RHDV高免血清形成清晰的沉淀线;电镜观察可见30nm左右的病毒粒子。采用RT-PCR方法将Yaan-1株的衣壳蛋白VP60基因进行了克隆测序,序列分析表明VP60基因序列全长1740bp,编码579个氨基酸,测序结果提交GenBank(注册号为DQ069280),并与世界各国的常规RHDV分离株进行比较,结果表明核苷酸同源性为90.0%~98.0%,氨基酸同源性为94.1%~99.0%,氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区;同时对Yaan-1株的分子量、等电点、疏水性、跨膜区等分子结构特征进行了分析。本研究首次报道了无血凝性RHDV中国分离株,丰富了地方毒株资源,为明确我国地方株的分子流行病学,以及对VP60蛋白分子特征研究提供了新材料。
- 田浪王红宁李建文廖娟张夏兰周万蓉王鸿宾
- 关键词:兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因
- 兔出血症病毒WHNRH株全基因组序列测定及全长cDNA克隆
- 采用片段重叠的PCR方法获得了兔出血症病毒WHNRH株除5′和3′末端以外的序列,采用应用锚引物的5′ RACE方法以及针对3′末端的poly(A)结构设计引物获得了WHNRH株的5′和3′末端的非poly(A)序列,结...
- 李建文王红宁田浪黄勇张夏兰
- 关键词:兔出血症病毒全长CDNA克隆
- 文献传递
- 中国白兔IL-6基因的克隆与序列分析被引量:2
- 2013年
- 本试验根据GenBank上公布的欧洲兔白介素6(IL-6)全基因序列,设计1对引物,用RT-PCR方法从ConA刺激诱导的中国白兔外周淋巴细胞的总RNA中扩增出中国白兔IL-6基因cDNA,并对其进行克隆和序列分析。结果表明,成功地克隆出了中国白兔IL-6基因,其开放阅读框为726bp。序列分析表明,中国白兔与欧洲兔IL-6基因(AFl69176)同源性为100%,与GenBank上公布的其他的几种兔的IL-6基因不完全序列的同源性从84.9%~91.1%不等。目前很少有关兔白细胞介素的报道,兔IL-6的克隆在国内尚属首次。
- 张夏兰陈军王红宁杨鑫张安云
- 关键词:IL-6克隆
- 兔出血症病毒(RHDV)WHNRH株的分离鉴定及基因组全序列的测定与分析被引量:10
- 2006年
- 从发病长毛兔中分离鉴定了兔病毒性出血症病毒WHNRH株。参考GenBank中已登录的RHDV毒株序列对RHDV WHNRH分离株进行了全基因组序列测定与分析。设计5对扩增区段相互重叠的RHDV特异性引物,扩增除5’和3’末端以外的序列,采用设计锚引物的5’RACE方法以及针对RHDV 3’末端的polyA结构设计引物获得了RHDV WHNRH株的5’和3’末端序列。胶回收各PCR产物,连接pMD18-T克隆载体,测得RHDV WHNRH分离株的基因组全长为7437nt(不包括polyA),与GenBank公布的全部共6株RHDV全基因序列进行同源性比较分析,同源性在89.0%~97.1%之间,ORF1同源性为89.0%~97.1%,编码氨基酸序列的同源性为95.2%~98.7%;ORF2的核酸苷序列同源性为92.1%~97.7%,编码氨基酸序列的同源性为94.1%~96.6%。
- 李建文王红宁田浪黄勇张夏兰
- 关键词:兔出血症病毒全基因组测序
- 兔出血症病毒Yaan株衣壳蛋白VP60基因的克隆和序列分析被引量:12
- 2005年
- 采用RT-PCR方法扩增兔出血症病毒(RHDV)Yaan株衣壳蛋白VP60基因,将扩增片段克隆到pMD 18-T载体上,经酶切及PCR鉴定后测序.结果显示,VP60基因全长1 740 bp,编码579个氨基酸.将Yaan株与其他RHDV分离株进行比较,结果显示,核苷酸同源性为90.5%~97.5%,氨基酸同源性为94.3%~99.5%,氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区,表明毒株具有高度保守性;同时对Yaan株与国外标准株AST/89的VP60蛋白氨基酸变异及其亲水性、柔性区、抗原区和表面结构进行了比较分析.
- 田浪王红宁李建文廖娟张夏兰王鸿宾
- 关键词:兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因
- 兔IL-6真核表达质粒的构建及其分子佐剂效应的初步研究被引量:2
- 2012年
- 为了研究兔IL-6真核表达质粒(pcDNA-IL-6)对家兔免疫应答的影响,本文构建了真核表达质粒pcDNA-IL-6,并将其与pcDNA-VP60、兔瘟组织灭活苗分别共同免疫家兔,用血凝抑制试验检测家兔RHDV特异性抗体水平。结果表明:在免疫后的7 d到70 d,无论是核酸疫苗pcDNA-VP60或是兔瘟组织灭活苗,与真核重组质粒pcDNA-IL-6共注射免疫组抗体水平均高于未注射pcDNA-IL-6质粒免疫组,差异均显著P<0.05或极显著P<0.01。真核重组质粒pcDNA-IL-6对重组质粒pcDNA-VP60和组织灭活苗的免疫均具有免疫增强作用。
- 张夏兰杨鑫周英顺王红宁
- 关键词:RHDV分子佐剂
- 不同血凝性兔出血症病毒的分离鉴定及VP60基因的克隆分析和RT-PCR检测方法的建立
- 本研究从临床病料中分离鉴定出3株不同血凝性的兔出血症病毒(RHDV),命名为whn-1,whn-2,whn-3,其中whn-2株血凝效价为1:640,whn-1,3的血凝效价仅为1:5,1:10。采用RT-PCR方法将w...
- 田浪王红宁李建文廖娟张夏兰王鸿宾
- 关键词:兔出血症病毒血凝性衣壳蛋白
- 文献传递
- 中国白兔IL-6基因克隆及对RHDV VP60基因DNA疫苗免疫佐剂效应研究
- 本研究根据GenBank上公布的欧洲兔白介素6全基因序列,用Primer 5.0软件设计一对引物,用RT-PCR方法从ConA刺激诱导的中国白兔外周淋巴细胞的总RNA中扩增出中国白兔白细胞介素/(IL-6/)基因cDNA...
- 张夏兰
- 关键词:RHDVDNA疫苗分子佐剂
- 文献传递
- 兔病毒性出血症基因工程疫苗研究进展被引量:1
- 2007年
- 兔病毒性出血症,俗称兔瘟,该病流行早期也被称为兔致死性病、兔小RNA病毒出血热、兔出血性败血综合征、比利时野兔传染性坏死性肝炎等。它是由兔出血症病毒(Rabbit Hemorrhagic Disease Virus。RHDV)引起的一种急性、烈性、高度接触性致死性传染病,以呼吸系统出血,急性肝出血坏死,实质器官淤血水肿及弥散性血管内凝血为特征。1984年中国首次报道了该病。
- 张夏兰王红宁张昌菊向菁徐永莉余协中
- 关键词:兔病毒性出血症基因工程疫苗传染性坏死性肝炎小RNA病毒兔出血症病毒血管内凝血