张国龙 作品数:38 被引量:87 H指数:5 供职机构: 河南省胸科医院 更多>> 发文基金: 河南省医学科技攻关计划项目 河南省医学科技创新人才工程项目 河南省卫生科技创新型人才工程 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
ESAT-6抗原的开发与临床应用研究 <正> 目的:利用转基因技术,合成与表达ESAT-6结核抗原,并进行临床应用评价。方法:从2002年10月1日至今,由河南省医学科技创新人才基金资助,河南省胸科医院中心实验室通过分子克隆、转基因、蛋白诱导、表达和纯化等技... 杜长梅 张国龙 王江东 石瑞如 高飞絮 张霞 秦殊文献传递 ESAT6抗原刺激产生INFγ水平测定在HIV感染者中对结核病诊断的价值 被引量:5 2007年 目的探讨ESAT6抗原刺激后测定γ干扰素(INFγ)在HIV感染者中对结核病的诊断价值。方法同时抽取HIV感染者胸部正常、涂阴肺结核、涂阳肺结核病人的全血,于24h内检查,以加入植物血凝素(PHA)为对照组,同时以加入ESAT6抗原为研究组,培育后测定全血中INFγ水平,以ESAT6抗原组较对照组INFγ增加的百分比为评价指标。结果以INFγ增加≥1%、5%、10%、15%为阳性分割值,活动性肺结核病人检出的敏感度分别为76%、67%、60%、54%,特异度分别为67%、77%、80%、80%。结论ESAT6抗原刺激后测定INFγ在HIV/AIDS病人中对结核病的诊断价值较大。 苏振修 甄新安 王国斌 张国龙关键词:ESAT6 Γ干扰素 结核 HIV感染者 中日合作对河南省结核菌二线药物耐药监测研究 被引量:15 2005年 目的中日合作对河南省结核菌二线药物的耐药疫情进行调查研究.方法从2004年9月1日~2005年5月31日,由日本厚生省提供研究经费,按照世界卫生组织标准方案,在河南省胸科医院等地市医院,连续收选220例涂阳结核患者,进行结核菌一线和二线药物药敏试验.结果一线药物显示初始耐药者和获得性耐药者任一耐药率均依链霉素(SM)、异烟肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)的顺序递减,而二线药物却情况不同,初治患者的氧氟杀星(OFLX)和阿米卡星(AMK)的耐药率已经高达12.8%和7.4%,说明这两种药被广泛用于一般细菌抗感染治疗,形成了很高的初始耐药率.耐多药(MDR)患者的二线药药物选择却很不容乐观.比如OFLX+AMK两个主要的耐药率已经达到48.1%.而其他一些组合的耐药率也超过了40%.结论河南省结核菌二线药物的耐药疫情处于一个较高水平.以氧氟杀星和阿米卡星为主药的二线治疗方案,需要及时调整. 张国龙 杜长梅 苍泽卓也 池田雄史 王伟 石瑞如关键词:结核 耐药 二线药物 异源双链分析法快速检测结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药性 2010年 目的采用变性高效液相色谱(DHPLC)和Surveyor酶法分析结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药基因gyrA突变,探讨这两种异源双链分析法在结核菌耐药快速检测中的应用价值。方法 102株结核分枝杆菌临床分离株(常规药敏试验显示80株氧氟沙星耐药,22株敏感),PCR扩增gyrA基因氟喹诺酮类耐药决定区域,与参照菌株M.tbErdman的扩增产物形成异源双链,然后分别采用DHPLC和Surveyor酶法检测基因突变,同时进行DNA测序作为对照。结果 DHPLC法和Surveyor酶法与DNA测序法相比,具有同样的检出率(均为100%),80株耐药株均存在gyrA基因突变,而22株敏感株均无基因突变发生。结论 DHPLC法和Surveyor酶法均可用来快速检测结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药。两者均简便,稳定,灵敏,前者高通量,全自动化,但需要昂贵的设备;后者成本低,不需要特殊设备,适合我国大部分临床实验室开展。 王伟 石瑞如 张国龙 付光宇 彭义利 苑星关键词:基因突变 核酸酶 分枝杆菌 结核 基因型分析法快速检测耐药结核分枝杆菌 被引量:1 2014年 目的 探讨基因型分析法检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药性的价值.方法 采用多重PCR和线性探针反向膜杂交法来检测异烟肼耐药基因katG S315T和inhA C-15T突变以及利福平耐药基因rpoB D516V,H526Y,H526D,S531L突变来判断78株结核分枝杆菌临床分离株的耐药性,并与金标准L-J固体培养基药敏法以及BACTEC960液体培养药敏法进行对比分析.结果 基因型分析法在6h内可以完成;结核分枝杆菌常规药敏检测需要3个月.与后者相比,基因型分析法检测异烟肼耐药的敏感性和特异性分别为89% (16/18)和99% (77/78);检测利福平耐药的敏感性和特异性均为100%(13/13,78/78).结论 基因型分析法检测结核菌耐药性快速准确,对耐药结核病的早期诊断和治疗很有帮助,有望在临床实验室广泛开展. 石瑞如 高飞絮 沈青玉 黄祖峰 秦殊 王伟 张国龙关键词:微生物敏感性试验 广泛耐药结核 基因型 反向斑点杂交技术鉴定分枝杆菌菌种的应用评价 被引量:1 2017年 目的评估反向斑点杂交技术(reverse blot hybridization assay,REBA)检测结核分枝杆菌(MTB)与非结核分枝杆菌(NTM)在临床诊断中的应用价值。方法采用对硝基苯甲酸(PNB)初筛、REAB检测及核酸测序方法检测河南省胸科医院临床不同结核病患者痰标本罗氏培养分离出的分枝杆菌78株,探讨3种方法鉴定结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌结果的一致性。结果 REBA检测78株分枝杆菌菌型,73株属结核分枝杆菌复合群,4株为非结核分枝杆菌,1株鉴别为混合菌;与核酸测序检测结果符合率为98.7%(77/78),一致性极好(Kappa=0.99);验证REBA与PNB初筛结果显示,符合率为94.9%(74/78),两法结果一致性好(Kappa=0.95)。结论利用REBA对临床分离的分枝杆菌进行菌种鉴定是一种快速、简便和准确的方法,可满足早诊断,早治疗的临床需要。 李爱华 张国龙 沈青玉 杨立涛 王伟关键词:分枝杆菌 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 反向斑点杂交技术 ESAT-6检测在结核病诊断中的应用 被引量:2 2009年 目的探讨我们建立的结核病分枝杆菌特异性抗原ESAT-6体外诱发的γ干扰素检测(以下简称ESAT-6检测)在结核病诊断中的应用价值。方法结核病密切接触者60例,痰培养证实的结核病患者46例与健康人55例对比分析;儿童组68例,青少年组52例,老年组45例追踪调查。结果结核病密切接触者与痰培养证实的结核病患者ESAT-6反应具有很高的敏感性;儿童组与青少年组ESAT-6反应与临床诊断和愈后具有很高的一致性。结论ESAT-6检测对活动性结核病尤其是儿童和青少年结核病的诊断具有较高的价值。 王伟 王伟 赵悦 王亚丽 李慧娟 杨立涛 石瑞如关键词:Γ干扰素 分枝杆菌 结核病 抗原 抗原诱发的γ干扰素测定在结核诊断中的应用 目的探讨结核分枝杆菌特异性抗原ESAT-6体外诱发的γ干扰素反应(以下简称ES- AT-6反应)在结核感染和结核病诊断中的价值。方法结核密切接触者60例,痰培养证实的结核患者46例与健康人55例对比分析;儿童组68例,青... 石瑞如 苑雪芹 王伟 李慧娟 汤兵祥 刘新 张国龙关键词:Γ干扰素 痰培养 结核患者 结核诊断 文献传递 生物荧光法检测结核分枝杆菌ATP含量 被引量:1 2011年 目的建立生物荧光技术检测结核分枝杆菌ATP含量的方法并观察异烟肼的抗结核作用。方法结核分枝杆菌标准株H37Rv的菌悬液,高温裂解,用生物荧光技术检测三磷酸腺苷(ATP)含量。条件稳定后,观察菌数和ATP浓度的关系,以及加入不同浓度的异烟肼后1周之内ATP的动态变化。结果菌液加入裂解液后100℃煮沸8min,迅速降至室温,加入荧光素酶,3~5min时测荧光值。随异烟肼浓度增加,ATP量下降,培养至第7d时,异烟肼的敏感性可以初步进行判断。结论所建立的生物荧光法检测结核分枝杆菌ATP含量,具有简便、快速、敏感、可重复性强等特点,有望成为结核菌体外药敏试验的一种有用的方法。 张虹妍 石瑞如 史慧敏 孙芳 秦殊 张霞 张国龙关键词:结核菌 三磷酸腺苷 生物发光法 哮喘患者细胞因子的改变与治疗 被引量:5 2006年 目的研究用改变细胞因子的方法治疗支气管哮喘患者的依据;并对怀疑哮喘患者排除性诊断提供依据。方法采用双抗夹心ELISA法。结果患者与正常人的IL-4有显著差异性,处在TH2状态。结论IL-4、γ-IFN细胞因子检查对哮喘具有良好的诊断依据;可指导临床以改变免疫系统状态的方法来治疗哮喘。 高飞絮 张国龙 王江东 秦殊关键词:细胞免疫 体液免疫状态 哮喘 嗜酸性粒细胞