廖小青
- 作品数：15 被引量：18H指数：3
- 供职机构：南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 间日疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定被引量：6
- 2010年
- 目的研制间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)单克隆抗体,并对抗体特性进行了初步鉴定。方法用纯化的重组PvLDH蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,测定其免疫球蛋白亚类及效价,结合ELISA、Western blot试验分析其特异性。结果共获得5株稳定分泌抗PvLDH重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别为6D1、6D2、5A10、5C7、4A8。5株单抗培养上清的ELISA效价为1∶512～1∶1024,腹水效价为1∶12800～1∶25600,其中5C7、6D1经Western-blot鉴定能与天然的恶性疟原虫和间日疟原虫的LDH发生特异性反应。结论本研究方法成功制备并获得了针对PvLDH的单克隆抗体,为进一步研究疟疾诊断试剂奠定了基础。
- 孙莉李明吴英松周志成廖小青郝文波
- 关键词：间日疟原虫乳酸脱氢酶单克隆抗体
- 抗羊口疮病毒ORFV118蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及其应用被引量：7
- 2016年
- 制备抗羊口疮病毒118(ORFV118)重组蛋白的单克隆抗体并鉴定其生物学特性。构建ORFV118原核表达重组质粒pET33b-ORFV118,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,诱导表达出ORFV118重组蛋白;利用Ni-NTA亲和层析法纯化ORFV118重组蛋白;以纯化蛋白为抗原免疫小鼠,通过杂交瘤技术制备单克隆抗体;利用间接ELISA法、Western blot、免疫组化等方法分别对单抗特异性、效价、亚型以及ORFV118蛋白的功能进行研究。获得了3株稳定分泌单克隆抗体的细胞株,分别命名为1A2,3B5,5D10,它们诱生的小鼠腹水效价分别为110 000,16 400,18 000。其中效价最高的1A2抗体亚型为IgG1,能特异性结合其免疫原蛋白、真核表达产物以及病羊皮肤组织中的ORFV118蛋白。免疫组化结果显示单抗1A2染色局限于皮肤表皮层角化细胞及浸润至皮下组织的炎症细胞,与病毒侵染上皮组织层的特性相符。制备的单抗1A2能特异性识别ORFV118。深入研究单抗1A2将为了解ORFV118的生物学特性,为羊传染性脓疱病的诊断、预防与治疗提供可能和新思路。
- 肖斌郝文波杜政伦廖小青罗树红
- 关键词：羊口疮病毒单克隆抗体早期蛋白
- 间日疟原虫乳酸脱氢酶GST融合表达载体的构建及表达
- 2010年
- 目的构建间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)融合表达载体,并表达PvLDH的GST融合蛋白。方法将PvLDH基因片段克隆到表达载体pGEX-4T-1中,构建PvLDH/pGEX-4T-1融合表达载体,IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,Western blot检测其抗原性。结果成功构建了PvLDH/pGEX-4T-1融合表达系统,在大肠杆菌BL21中以包涵体形式高效表达,表达产物能与恶性疟原虫和间日疟原虫感染患者血清反应,而不与正常人血清反应。结论间日疟原虫LDH蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有良好的抗原性。
- 周志成孙莉吴英松廖小青郝文波
- 关键词：间日疟原虫乳酸脱氢酶
- 兔抗弓形虫Ⅰ型液泡型质子焦磷酸酶多克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的制备兔抗弓形虫I型液泡型质子焦磷酸酶(Tg VP1)多克隆抗体并鉴定其应用。方法选择弓形虫ME49株Tg VP1氨基酸序列中的两条多肽,Tg VP1-1与Tg VP1-2,进行人工合成,并将其与KLH偶联作为抗原免疫新西兰大耳白兔,收集血清制备多克隆抗体,并通过ELISA、Western blot、免疫荧光等方法进行鉴定。结果经间接ELISA测定,兔抗Tg VP1-1及Tg VP1-2的多克隆抗体效价均达1∶128 000;Western blot结果显示两种多抗均能识别弓形虫天然蛋白中85 000左右条带,与Tg VP1预测相对分子质量大小相符,且特异性较好;通过免疫荧光技术检测到两株多抗识别的蛋白均定位于细胞质中,与酸性钙体的分布相同。结论采用人工合成多肽为免疫原所获得的兔抗Tg VP1多克隆抗体效价高,特异性好,弓形虫Tg VP1和酸性钙体的深入研究奠定了基础,同时也为弓形虫病的诊断提供了新的有效工具。
- 佟澄碧郝文波罗树红肖斌程莎莎廖小青潘迪
- 关键词：弓形虫焦磷酸酶多克隆抗体
- 一种羊口疮病毒蛋白ORFV059单克隆抗体杂交瘤G3及单克隆抗体
- 本发明公开了一种羊口疮病毒蛋白ORFV059单克隆抗体杂交瘤G3及单克隆抗体。一种抗羊口疮病毒ORFV059单克隆抗体杂交瘤细胞株G3，于2011年11月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CG...
- 罗树红郝文波李宏廖小青李明
- 文献传递
- 伯氏疟原虫酸性钙体的分离纯化及其功能鉴定
- <正>酸性钙体(acidocalcisome)是一种富含钙、多聚磷酸盐、电子致密的酸性细胞器。具有广泛的生理学功能,如:Ca2+信号通路的调节,PPi、polyP的代谢,pH平衡、渗透压的调节等。该细胞器最先在锥虫中被发...
- 程莎莎廖小青罗树红郝文波
- 文献传递
- 弓形虫液泡型质子焦磷酸酶单克隆抗体的制备及其功能鉴定
- <正>液泡型质子焦磷酸酶(vacuolar H+-pyrophosphatase,V-PPase)是一种特殊的生电质子泵,分为K+依赖型(I型)和非K+依赖型(II型),其功能是利用水解无机焦磷酸产生的能量,建立质膜内外...
- 佟澄碧汪园园廖小青程莎莎罗树红郝文波
- 文献传递
- 恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5F1段的克隆、表达及初步鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的克隆表达恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5(PfRh5)F1片段,并评价其抗原性。方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pET28a(+)中,构建PfRh5F1/pET28a原核表达载体。IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,并用WesternBlot检测其抗原性。结果成功构建了PfRh5F1/pET28a原核表达系统,并在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达,表达产物能被恶性疟原虫感染患者血清识别,而不能被间日疟原虫感染患者及正常人血清识别。结论恶性疟原虫PfRh5F1段在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。
- 郝文波李宏邓小英廖小青李明罗树红
- 关键词：恶性疟原虫克隆
- 恶性疟原虫PfRh5F2片段pTGub21b表达载体的构建及融合蛋白表达鉴定
- 2014年
- 目的克隆表达恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5(PfRh5)F2片段,并评价其抗原性。方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pTGub21b中,构建PfRh5F2/pTGub21b原核表达载体。IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,并用Western blot检测其抗原性。结果成功构建了PfRh5F2/pTGub21b原核表达系统,并在大肠杆菌中可溶性高效表达,表达产物能被恶性疟患者血清识别,而重组抗原免疫鼠血清也能识别恶性疟患者血样中的相应抗原。结论恶性疟原虫PfRh5 F2片段在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性和免疫原性。
- 程莎莎郝文波罗树红廖小青
- 关键词：恶性疟原虫
- 一种用于检测疟原虫的胶体金快速免疫层析检测试纸及抗体和细胞株
- 本发明公开了一种用于检测疟原虫的胶体金快速免疫层析检测试纸及抗体和细胞株。本发明的检测试纸包括底板、样品垫、聚酯纤维素垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述样品垫、聚酯纤维素垫、硝酸纤维素膜和吸水垫沿着底板的长度方向依次部分重叠...
- 郝文波李明吴英松徐伟文罗树红王萍廖小青
- 文献传递
