常娅莉
- 作品数：21 被引量：81H指数：5
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划卫生行业科研专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 人免疫球蛋白稳定性的两种试验方法结果比较被引量：3
- 2003年
- 通过检测人免疫球蛋白制品中抗 HBs含量的变化情况 ,采用留样观察法和加速试验法对不同温度条件下的人免疫球蛋白有效期进行预测。结果表明 ,与常规留样观察法相比 ,加速实验法推测出的药物有效期出现一定的偏差 ,所以应用于人免疫球蛋白稳定性观察仅能提供参考性数据。
- 刘燕李振平周耀东常娅莉杨庆梅
- 关键词：人免疫球蛋白抗-HBS加速试验法
- 鼠疫菌F1抗体/抗原酶联免疫诊断试剂盒的应用评价被引量：6
- 2014年
- 目的对兰州生物制品研究所有限责任公司研制的鼠疫菌F1抗体酶联免疫诊断试剂盒和鼠疫菌F1抗原酶联免疫诊断试剂盒进行临床应用评价。方法采用双抗原/抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接血球凝集试验(IHA)、胶体金免疫层析试验(GICA)3种方法的诊断试剂对比检测云南省地方病防治所中心实验室保藏的和现场采集的血清样品和脏器样品,对血清样品做鼠疫菌F1抗体检测,对脏器样品做鼠疫菌F1抗原检测。结果在358份血清样品中,ELISA试剂检出F1抗体阳性52份(14.52%),IHA试剂检出阳性37份(10.34%),GICA试剂检出阳性45份(12.57%)。ELISA与IHA试剂的符合率为95.23%,与GICA试剂的符合率为96.92%。经统计学χ2检验,ELISA试剂检出F1抗体阳性率高于IHA试剂(χ2=11.53,P=0.000 7),与GICA试剂检出的差异无统计学意义(χ2=3.27,P=0.070 4)。进一步分析滴度差值频数,ELISA试剂检测人血清的敏感性高于IHA试剂的样品占87.5%。在117份脏器样品中,3种试剂均检出F1抗原阳性15份(12.82%),符合率100%。滴度差值频数比较,ELISA试剂检测敏感性高于反向间接血球凝集试验(RIHA)试剂的样品为78.57%。结论兰州生物制品研究所有限责任公司研制的鼠疫菌F1抗体酶联免疫诊断试剂盒和鼠疫菌F1抗原酶联免疫诊断试剂盒性质特异,其敏感性优于IHA试剂盒和GICA试剂条,值得在鼠疫的监测和快速诊断中推广应用。
- 杜春红王鹏常娅莉王秉翔宋志忠
- 关键词：鼠疫鼠疫菌F1抗原抗体酶联免疫诊断试剂盒
- 重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原制备工艺的建立被引量：2
- 2011年
- 目的建立稳定、高效的重组鼠疫耶尔森菌LcrV抗原工程菌的发酵与纯化工艺。方法研究LcrV工程菌pET-V/BL21(DE3)在试管和三角摇瓶中的生长和表达规律,对种子培养基、IPTG诱导时机、诱导时间及诱导浓度进行优化,并放大至30 L发酵罐培养,建立稳定的发酵工艺。收获菌体,经冻融、离心收集蛋白溶液,高压匀浆处理后,分别采用Q.Sepharose HP阴离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 FF(hs)疏水层析及Superdex 75 pg凝胶过滤层析三步柱层析纯化,建立稳定的纯化工艺,连续纯化3批,并按《中国药典》三部(2010版)的相关要求进行全面检定。结果经优化的条件培养及诱导表达,工程菌的收菌密度(A600值)可达34,LcrV抗原的表达量达36%,含量为1.6 g/L。发酵产物经柱层析纯化,LcrV产量高于140 mg,纯度大于95%,蛋白总回收率达8.5%以上。各项检定指标均符合《中国药典》三部(2010版)的相关要求。结论已建立了稳定的、适合规模化生产的LcrV制备工艺,为新型鼠疫组分疫苗的研制奠定了基础。
- 胡丽娜常娅莉魏东万艳马维民傅林锋王革吴智远韩少波王秉翔
- 关键词：大肠杆菌发酵纯化
- 鼠疫双组分疫苗免疫小鼠的细胞免疫学应答分析
- 本文主要分析了用鼠疫双组分疫苗免疫NIH小鼠后机体的细胞免疫应答状况。
实验室研究了鼠疫候选亚单位疫苗，F1+rV抗原为主要成分，分别用氢氧化铝佐剂和CpG+氢氧化铝佐剂配制。各实验疫苗组中F1的量和rV的量相...
- 焦磊常娅莉傅林锋卜培英王秉翔
- 关键词：鼠疫亚单位疫苗细胞免疫应答
- 文献传递
- 人狂犬病免疫球蛋白使用效果观察被引量：39
- 2004年
- 为了解人狂犬病免疫球蛋白的作用效果 ,我们将观察对象随机分成了A、B、C三组 ,分别采用三种措施进行狂犬病的预防治疗 ,即 :A组联合使用狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白 ;B组联合使用狂犬病疫苗与抗狂犬病血清 (马源 ) ;C组仅注射狂犬病疫苗 ,并采用小鼠中和试验对这三组成员在免疫后 3、7、14、4 5天及 1年时的中和抗体水平进行检测。结果表明 :狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白或抗狂犬病血清联合使用 ,可使体内更早出现抗狂犬病的中和抗体。
- 李振平王玉琳刘燕常娅莉程夷
- 关键词：免疫球蛋白狂犬病疫苗抗狂犬病血清
- 病毒灭活和SD血浆的制备被引量：2
- 2003年
- 建立制备病毒灭活SD血浆的方法。血浆内加入 1%TNBP/ 1%TritonX10 0 ,30℃保温 4h后用反相层析和超滤去除血浆中的TNBP和TritonX10 0。在 30℃保温 15min后血浆内脂包膜病毒全部被杀灭。超滤后的血浆内TNBP和TritonX10 0的含量都低于 5mg/L。SD血浆蛋白含量的改变都在准许的范围内。建立了一种病毒灭活血浆的制备方法。
- 赵宜为常娅莉王巍尚立群
- 关键词：病毒灭活血浆成分血液制品
- 鼠疫组分疫苗F1抗原、rV抗原含量的检测及其质量控制被引量：3
- 2012年
- 目的采用双抗体夹心ELISA法检测鼠疫组分疫苗中F1和rV的抗原含量。方法利用F1、rV抗原单克隆抗体,对鼠疫组分疫苗原液进行抗原鉴别试验;分别应用F1、rV抗原双抗体夹心ELISA法对疫苗原液进行抗原定量检测;验证A(l OH)3佐剂吸附抗原的完全性;将疫苗成品于4℃放置18个月,分别于1和18个月时取样,用建立的双抗体夹心ELISA法检测F1和rV抗原含量,分析抗原的稳定性;对3批鼠疫菌rV抗原原液3步纯化工艺进行验证。结果鼠疫组分疫苗原液中的F1和rV抗原具有良好的反应原性;用建立的双抗体夹心ELISA法检测4批F1和rV抗原原液中F1和rV抗原的含量与Lowry法检测结果的误差均在±20%以内;4批鼠疫组分疫苗离心后的上清液中均未检测到F1和rV抗原,表明A(lOH)3佐剂吸附抗原完全;4℃保存18个月,疫苗中的F1和rV抗原含量稳定;3批鼠疫菌rV抗原原液经阴离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析3步纯化,rV抗原在纯度增加的同时,抗原含量也增加。结论已建立的F1、rV抗原双抗体夹心ELISA法可用于鼠疫组分疫苗中F1和rV抗原的定量检测。
- 常娅莉吴智远魏东韩少波胡丽娜焦磊卜培英王国治王秉翔
- 关键词：F1抗原双抗体夹心ELISA法
- 鼠疫菌V抗原的单抗系统建立和免疫学定量检测
- 目的：制造鼠疫菌V抗原的鼠单克隆抗体，经抗体表位分析建立单抗系统，并通过此单抗系统建立免疫学检测鼠疫菌V抗原含量的方法，进行鼠疫疫苗研制中V抗原的质量控制。
方法：用鼠疫菌V抗原免疫雌性BALB/c小鼠，取小鼠...
- 常娅莉惠一明王秉翔焦磊胡丽娜傅林锋王革卜培英裴明玉万艳韩少波
- 关键词：鼠疫耶尔森菌双抗体夹心免疫学检测
- 文献传递
- 鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制被引量：2
- 2013年
- 目的 研制鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA诊断试剂盒,并进行验证。方法 用纯化的鼠疫菌F1抗原作为包被抗原,HRP标记的F1抗原作为酶标抗原,建立鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA检测方法,连续制备3批诊断试剂盒,并建立内部质控品。对试剂盒进行板内板间精密性、敏感性、特异性、准确性和稳定性验证。结果 鼠疫菌F1抗原的最佳包被浓度为0.6μg/ml,HRP标记的F1抗原的最佳工作浓度为1︰7 000。制备的试剂盒检测精密性质控品的板内变异系数为6.5%,板间变异系数为7.1%;检测高、中、低浓度内部质控品和精密性质控品的回收率在95%～112%之间;检测阳性血清和阴性血清的敏感性为100%;与正常人血清、正常兔血清、正常小鼠血清、兔抗假结核耶尔森菌血清、小鼠抗假结核耶尔森菌血清均无交叉反应;试剂盒稳定性良好,有效期至少为1年。结论 成功制备了鼠疫菌F1抗体双抗原夹心ELISA诊断试剂盒,达到了体外诊断试剂的注册要求,可用于鼠疫的临床监测、诊断及预后判断。
- 常娅莉席仲兴吴智远徐秉臣张正雷韩少波热娜雷刚彭林锋卜培英袁浩嘉王秉翔
- 关键词：F1抗体酶联免疫吸附测定
- 鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA诊断试剂盒的研制被引量：5
- 2013年
- 目的研制鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA诊断试剂盒，并进行验证。方法用鼠疫菌F1抗原免疫家兔制备抗血清，经50％饱和硫酸铵盐析2次后，再经Sephacryl S-300凝胶柱层析纯化，作为包被抗体；制备鼠疫菌F1抗原单克隆抗体腹水，并进行纯化，用HRP标记单抗，作为酶标抗体；建立鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA检测方法，连续制备3批诊断试剂盒，并建立内部质控品。对试剂盒进行板内板间精密性、灵敏度、线性范围、特异性、重复性、准确性和稳定性验证。结果制备的试剂盒检测精密性参比品的板内变异系数为5．2％，板间变异系数为8．23％；试剂盒的线性范围为3．91～62．5ng／ml，最低检测限为3．0ng／ml；试剂盒检测鼠疫菌菌液的结果为阳性，而与近缘假结核耶尔森菌无交叉反应；试剂盒检测高、中、低3种浓度Fl抗原含量的变异系数为4．54％～8．4％，回收率在104％-108％之间；试剂盒稳定性良好，有效期至少为1年。结论成功制备了鼠疫菌F1抗原双抗体夹心ELISA诊断试剂盒，为鼠疫的临床诊断及流行病学监测提供了一种快速检测手段，也为新型鼠疫组分疫苗F1抗原含量的检测提供了方法。
- 常娅莉席仲兴吴智远徐秉臣彭林锋胡丽娜热娜雷刚韩少波张正雷卜培英袁浩嘉王秉翔
- 关键词：鼠疫耶尔森菌F1抗原单克隆抗体酶联免疫吸附测定
