宋欣
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:中山大学附属第二医院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金广东省中医药管理局基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 曲伏前列腺素对体外培养人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶2的作用(英文)被引量:1
- 2007年
- 背景:曲伏前列腺素可通过增加眼睫状肌细胞间间隙,使葡萄膜巩膜房水流出通道流出阻力下降,进而降低眼压,这一作用途径是否通过增强睫状肌基质金属蛋白酶的表达而完成?目的:观察曲伏前列腺素干预人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶2表达活性的作用。设计:观察对比分析。单位:中山大学附属第二医院眼科。材料:实验于2005-08/2006-04在中山大学附属眼科中心完成。供体摘自1例死亡1h内无眼疾青年尸体单侧眼球(均经其家属同意),取自中山眼科医院,供体排除眼部疾患。兔抗人基质金属蛋白酶2多克隆抗体(武汉博士德生物工程有限公司),曲伏前列腺素(美国ALCON公司,批号:86610F,0.004%溶液)。方法:实验干预:在人睫状肌细胞无牛血清培养基中加入1μmol/L曲伏前列腺素为实验组,同时以无药物干预的细胞为对照组,实验组于加药后6,12,24h收集细胞进行观察。实验评估:采用RT-PCR和ELISA法分别检测各组人睫状肌细胞基质金属蛋白酶2在基因和蛋白水平的表达;采用Zymography技术分别检测各组细胞基质金属蛋白酶2的活性。主要观察指标:人眼睫状体细胞内基质金属蛋白酶2 mRNA的表达,细胞外液基质金属蛋白酶2蛋白表达以及基质金属蛋白酶2活性。结果:①基质金属蛋白酶2 mRNA的表达:实验组加药后6,12,24h基质金属蛋白酶2 mRNA相对表达量呈逐渐升高趋势(F=236.959,P<0.01)。②基质金属蛋白酶2蛋白表达:实验组加药后6,12,24h基质金属蛋白酶2表达随曲伏前列腺素作用时间延长逐渐升高(F=38.110,P<0.01)。③基质金属蛋白酶2活性:Zymography技术检测实验组加药后6,12,24h基质金属蛋白酶2活性随曲伏前列腺素作用时间延长而逐渐增强(F=74.348,P<0.01)。结论:体外培养的人睫状肌细胞接受曲伏前列腺素作用后,基质金属蛋白酶2表达随药物作用时间延长逐渐增加,活性逐渐增强。
- 蓝育青肖剑晖彭蔚张弛郭慧宋欣
- 关键词:前列腺素睫状肌基质金属蛋白酶
- 曲伏前列腺素对培养人眼睫状肌细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响被引量:1
- 2007年
- 【目的】研究曲伏前列腺素作用下,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在人睫状肌细胞的表达。【方法】在人睫状肌细胞无牛血清培养基中加入1μmol/L曲伏前列腺素(travoprost),根据曲伏前列腺素孵育时间的不同,分为4个时间组,即0 h组(对照组)、6 h、12 h、24 h组。Real-time PCR和ELISA法分别检测上述各时间组人睫状肌细胞MMP-2在基因和蛋白水平的表达,每种方法分别重复做3次。Zymography技术分别检测4组细胞MMP-2的活性,重复4次。【结果】设定对照组mRNA相对表达量为1做作标准,6 h、12 h、24 h组MMP-2 mRNA相对表达量为0.58±0.04、1.20±0.05、1.95±0.11,MMP-2 mRNA表达呈逐渐升高趋势(P=0.000);ELISA检测MMP-2的A值分别为0.0503±0.0021、0.0627±0.0017、0.0673±0.0025、0.0783±0.0039,MMP-2的表达随travoprost作用时间延长逐渐升高(P=0.000)。Zymography技术检测MMP-2校正光密度值分别为10±5,52±7,104±21,237±40;MMP-2活性随travoprost作用时间延长而逐渐增强(P=0.000)。【结论】曲伏前列腺素作用于人睫状肌细胞后,MMP-2表达随药物作用时间延长逐渐增加,活性逐渐增强。
- 蓝育青肖剑晖彭蔚张弛郭慧宋欣
- 关键词:睫状肌细胞基质金属蛋白酶曲伏前列腺素基因表达
- 载5-氟尿嘧啶聚乳酸纳米微粒对人眼球筋膜囊成纤维细胞抑制作用的研究被引量:3
- 2009年
- 目的探讨载5-氟尿嘧啶(5-FU)聚乳酸纳米微粒(5-FU-PLA-NPs)对体外培养的人眼球筋膜囊成纤维细胞的抑制作用。方法为实验研究。噻唑蓝(MTT)比色法检测不同剂量(0.1、1.0、10.0、100.0和1000.0mg/L)的空载聚乳酸纳米微粒(PLA-NPs)在不同时间点(48和72h)对人眼球筋膜囊成纤维细胞增殖的影响,MTT比色法检测不同剂量(0.1、1.0、10.0、100.0和1000.0mg/L)5-Fu纳米药物和5-FU原药在1~7d内共7个时间点对成纤维细胞生长的抑制作用,计算并比较两者在7个时间点对成纤维细胞的抑制率。RT-PCR分别检测剂量为100.0mg/L的5-Fu纳米药物和5-Fu原药作用成纤维细胞1、5、7d后Ⅲ型前胶原蛋白mRNA的表达情况。对同一天各浓度A值的比较用单因素方差分析,同一天相同浓度5-Fu原药组A值与5-FU-PLA-NPs组A值的比较用两独立样本t检验分析,采用单因素方差分析分别比较不同时间点各组COL3的相对4值。结果空载聚乳酸纳米微粒对成纤维细胞的增殖没有影响。载5-Fu纳米微粒和5-Fu原药均抑制成纤维细胞的增殖,并使Ⅲ型前胶原蛋白mRNA的表达水平降低,该抑制作用具有时间和剂量依赖性。作用初期各剂量组5-FU纳米微粒的抑制作用低于原药,随时间延长抑制作用超过原药,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论聚乳酸(PLA)具有良好的生物相容性与安全性,可作为眼部用药的载体。载5-Fu聚乳酸纳米微粒具有一定的缓释功能,可长期释放药物,随着作用时间的延长,5-Fu纳米药物对成纤维细胞的抑制作用超过原药,其可作为靶向缓释药物载体。
- 蓝育青宋欣肖剑晖卓业鸿郭慧张弛黄开红
- 关键词:氟尿嘧啶成纤维细胞药物载体