宋智心 作品数:19 被引量:79 H指数:4 供职机构: 首都医科大学附属北京朝阳医院 更多>> 发文基金: 首都卫生发展科研专项 国家高技术研究发展计划 国家临床重点专科建设项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
两种蛋白酶对于质谱法测定糖化血红蛋白结果的比较研究 被引量:2 2013年 目的探讨两种常用的蛋白水解酶(Glu—C和Lys—C)在质谱法测定糖化血红蛋白(HbA1c)中的差异性研究。方法病例对照研究。收集2012年2至4月北京朝阳医院门诊和住院患者剩余血液合计200ml,患者来源中男90例,女70例,年龄20~60岁,平均年龄(44±16)岁。依据国际临床化学协会(IFCC)推荐的基于质谱法的HbA1c参考测量方法处理收集的血液样本(样本编号为:201201、201202、201203),分别应用两种常用的蛋白水解酶(Glu—C和Lys—C)酶解样本中的血红蛋白,使用固相萃取的方法进行质谱前处理,设定最适实验条件后,应用液相色谱串联质谱测定样本中HbA1c的含量。使用Sequest软件对制备的实验样本进行血红蛋白变异体的筛查,所有由液相色谱串联质谱获得的质谱结果都需使用Sequest软件针对人类国际蛋白指数(IPI)数据库搜索RAW文件,检索结果与血红蛋白变异体网站上公布的4种常见的血红蛋白变异体(HbS、HbC、HbD、HbE)进行比对。采用SPSS13.0统计软件和Excel2003对测量结果进行相关性分析,组问比较采用独立样本t检验。结果经液相色谱串联质谱检测结果可知,在检测HbA.。浓度时,分别用Glu—C和Lys—C酶解血液样本201201、201202、201203,其中经Lys—c酶解的样本HbA,C检测结果分别为(34.70±2.80)、(51.76±1.60)、(73.39±1.11)mmo//mol,经Glu—c酶解的样本糖化血红蛋白检测结果分别为(33.12±1.48)、(54.54±2.50)、(75.40±3.60)mmol/mol,组间比较差异无统计学意义,两种方法测定结果绘制相关曲线,R^2均〉0.995。经Sequest进行人类数据库检索,未筛查出4种常见的血红蛋白变异体的存在。结论在质谱法检测HbA1c时,应用上述两种常用的蛋白水解酶酶解血液样本时,可以得到较为一致的结果,两种方法检测结果相关性良好。 宋智心 田恩冰 王清涛关键词:血红蛋白A 血红蛋白类 丝氨酸内肽酶类 高压液相 串联质谱法 糖化血红蛋白测定的标准化现状 被引量:22 2012年 糖化血红蛋白是目前国际上公认的用于评估糖尿病患者长期血糖状况的金标准,但是我国糖化血红蛋白测定标准化工作目前仍处于初级阶段,关于糖化血红蛋白检测结果的一致性和准确性仍存在亟须解决的问题。 宋智心 徐国宾 马怀安 王清涛关键词:糖尿病 血清C反应蛋白水平在鉴别不同类型腹泻中的意义 被引量:5 2016年 目的:探讨急性腹泻患者C反应蛋白(CRP)的变化。方法:270例成人急性腹泻患者为观察组又分为轻度脱水组、中度脱水组及重度脱水组或细菌感染腹泻组、病毒感染腹泻组及非感染性腹泻组;行常规体检的健康成人80例作为对照组,所有受检者于入院时或体检当日采集空腹静脉血并分离血清,采用免疫比浊法检测患者血清CRP水平,计算CRP阳性率(血清CRP>10 mg/L),分析不同脱水程度及是否发生感染和感染类型对患者血清CRP水平的影响。结果:与对照组比较,不同程度脱水组或不同类型感染组患者血清CRP水平及阳性率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);重度脱水组与中度脱水组患者或非感染组组与病毒感染组患者的CRP水平及阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);重度脱水组与中度脱水组患者的CRP水平及阳性率高于轻度脱水组,细菌感染组患者的CRP水平及阳性率高于非感染组组与病毒感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中重度脱水腹泻患者或细菌感染性腹泻患者血清CRP水平升高明显,血清CRP水平可用于指导临床用药。 李静丹 王晶 宋智心 张景丹关键词:C反应蛋白 脱水 利用液相色谱串联三重四级杆质谱仪检测糖化血红蛋白的方法 本发明公开了一种利用液相色谱串联三重四级杆质谱仪检测待测样品中糖化血红蛋白含量的方法。该方法包括如下步骤:1)将标准品溶液和待测样品分别过固相萃取柱,获得待上机样品;2)用液相色谱串联三重四级杆质谱仪对所得待上机样品进行... 王清涛 宋智心 马怀安 张瑞 纪润奇文献传递 北京地区142家医疗机构互认实验室临床化学和临床免疫及临床检验专业室内质量控制现况调查 被引量:27 2016年 目的:了解北京地区医疗机构互认实验室临床化学、临床免疫及临床检验专业的室内质量控制现状。方法采用问卷调查及现场调查相结合的方式,使用参考方法定值的新鲜冰冻血清和全血标本,对北京地区142家互认实验室临床化学、临床免疫,临床检验专业的室内质量控制的现状进行调查,并对结果进行分析。结果发放临床化学、临床免疫和临床检验专业调查问卷各142份,分别有120、97和101家实验室回报了问卷,信息回馈率分别为84.5%、68.3%、71.1%,各专业有效回馈率均为100%。问卷调查结果显示:各专业>50%实验室设置了质量控制目标且大多为误差检出概率(Ped)95%,假失控概率(Pfr)5%;约70%实验室不同的检测项目使用相同的质控方案;使用最多的质控规则是12 s/13 s/22 s。现场调查结果显示,以临床化学专业为例,采用基于生物学变异的适当标准和WS/T 403-2012确定分析质量要求,发现在现有质量控制方法下,多数检测项目不能满足实验室所设置的质量控制目标要求,即Ped 95%,Pfr 5%。结论实验室需考虑实际情况,评估自身能达到的质量水平,为实验室设置合理的质量标准,制定适宜的个性化质量控制计划。 周睿 秦妍妍 郭健 何美懿 杨延敏 张瑞 张顺利 岳育红 宋智心 吴春颖 尹弘毅 梁玉芳 贾婷婷 王清涛关键词:临床化学试验 免疫学试验 血液学试验 糖尿病合并微血管病变患者血小板参数改变的临床意义 被引量:1 2009年 目的探讨糖尿病合并微血管病变患者血小板参数,包括PLT(血小板计数)、PCT(血小板压积)、MPV(平均血小板体积)、PDW(血小板分布宽度)变化的临床意义。方法采用BECKMAN COULTER ACT5diff AL全自动血液分析仪,分别对22例糖尿病合并微血管病变患者、60例单纯糖尿病患者、50例健康对照者的PLT、PCT、MPV、PDW进行测定,并分组比较,统计学采用方差检验。结果(1)糖尿病组(单纯糖尿病患者及糖尿病合并微血管病变组)与健康对照组比较PLT减低(P<0.05),MPV、PDW显著增高(P<0.01),PCT差异无统计学意义。(2)糖尿病合并微血管病变组与单纯糖尿病组相比PLT减低(P<0.05),MPV、PDW显著增高(P<0.01)。结论糖尿病患者与健康对照组比较,血小板数目减少,MPV、PDW明显增高,并且糖尿病合并微血管病变患者与单纯糖尿病组比较,血小板数目减少,MPV、PDW显著增高,提示检测血小板参数(PLT、MPV、PDW)对于监测糖尿病患者有无微血管病变的发生具有一定的临床意义。 宋智心 张景丹关键词:糖尿病 微血管病变 血小板检测 探讨Lys-C胰蛋白酶对于质谱法测定糖化血红蛋白的应用价值 被引量:1 2013年 目的探讨Lys-C胰蛋白酶在国际临床化学组织(International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,IFCC)推荐的质谱法测定糖化血红蛋白的参考方法中的应用价值。方法分别用两种特异性蛋白水解酶(GLU-C胞内蛋白酶和Lys-C胰蛋白酶)酶解血红蛋白后,进行SDS-PAGE电泳,衡量蛋白酶解的效率,再将消化后的血红蛋白进行质谱分析,测定标本中糖化血红蛋白的浓度。结果在相同的电泳条件下,Lys-C胰蛋白酶酶解血红蛋白的效率优于GLU-C;酶解后的血红蛋白标本经质谱方法分析可知,两种蛋白酶用于检测糖化血红蛋白浓度时,可以得到基本一致的结果,由两种方法绘制的标准曲线r2分别为0.929和0.998。结论在IFCC推荐的糖化血红的蛋白参考测量方法中,一直使用GLU-C胞内蛋白酶酶解血红蛋白,该研究尝试通过Lys-C胰蛋白酶的使用,降低整个实验成本。经结果分析,证实应用这两种特异性的蛋白酶检测糖化血红蛋白时,可以得到基本一致的结果,推荐使用文中所列方法将Lys-C胰蛋白酶作为酶解糖化血红蛋白的特异性蛋白酶。 宋智心 田恩冰 马怀安 王清涛关键词:血红蛋白A 质谱分析法 以转化医学的观点探讨临床实验室的发展 被引量:1 2012年 转化医学(translational medicine)作为医学研究的重要分支,强调在基础研究与临床应用之间建立直接联系,并倡导多学科的协作。随着转化医学的重要性在临床应用中不断提升,吸引了众多基础科研工作者和临床医师的广泛关注, 宋智心关键词:临床医师 血清糖化白蛋白检测方法及其专用候选标准物质 本发明公开了血清糖化白蛋白检测方法及其专用候选标准物质。本发明提供了一种利用同位素稀释液相色谱串联质谱法测定待测样品中糖化白蛋白含量的方法,包括如下步骤A:1)制备标准工作溶液和分离提纯待测样品的白蛋白;2)制备上机标准... 张瑞 任文华 王清涛 马怀安 宋智心 张顺利一种利用同位素稀释质谱法测量糖化血红蛋白的方法 本发明公开了一种利用同位素稀释液相色谱串联质谱法检测待测样品中糖化血红蛋白含量方法。该方法包括如下步骤:1)向标准品溶液和待测样品中均加入a摩尔<Sup>15</Sup>N-HbA<Sub>1c</Sub>-<Sup>1... 宋智心 王清涛 马怀安 张瑞 岳育红 左畅