吴莉芳
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
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- 重组人谷氧还蛋白1对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用被引量：8
- 2007年
- 目的探讨重组人谷氧还蛋白1(rhGrx1)对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型,病理形态学方法证实模型建立成功。小鼠尾静脉注射rhGrx1(5mg·kg-1和10mg·kg-1)后,观察脑组织中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及蛋白质羰基含量的变化,Western blot检测小鼠脑组织中p38MAPK表达水平的变化。结果HE染色证实模型建立成功且提示rhGrx1可改善缺血/再灌注损伤所致的小鼠脑组织病理形态学变化;rhGrx1能增加小鼠脑组织LDH、SOD活性、降低蛋白质羰基的含量。与假手术组小鼠相比,缺血和再灌注时脑组织p38MAPK蛋白表达量明显增加,注射rhGrx1后p38MAPK蛋白表达被抑制。结论rh-Grx1对局灶性脑缺血/再灌注损伤小鼠有一定保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK蛋白表达相关。
- 吴莉芳刘莹莹房绍红周宏博邹朝霞杨歌德任亚坤
- 关键词：谷氧还蛋白LDHSODP38MAPK
- 重组人谷氧还蛋白1在大肠杆菌中表达条件的优化、纯化及活性检测被引量：1
- 2006年
- 为进一步研究谷氧还蛋白1(Grx1)的生物学功能及作用机制,将已构建的pRSETA-Grx1融合蛋白表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达,并优化表达条件,用SDS-PAGE和凝胶影像分析.结果表明,当菌体密度OD600为1.0时开始诱导,加入终浓度0.5mmol/LIPTG,37℃,110±5r/min振荡培养5h,重组蛋白为可溶性,表达量达30%以上.用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白,获得蛋白质纯度达90%以上;W estern印迹结果表明,该蛋白具有免疫活性;MTT结果显示,终浓度为10mg/LGrx1重组蛋白具有保护细胞抵御500μmol/LH2O2作用(P<0.01).
- 刘莹莹邹朝霞周宏博吴莉芳房绍红
- 关键词：表达条件优化纯化
- 过表达Grx1抑制HEK293T细胞中H2O2诱导的p38MAPK信号通路被引量：3
- 2008年
- 谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)是细胞内一种重要的巯基-二硫键氧化还原酶,在细胞内氧化还原状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用.为进一步探讨Grx1的抗氧化机制,本实验将重组质粒pcDNA3.1(+)-hGrx1瞬时转染HEK293T细胞,经RT-PCR和Western印迹验证,细胞转染后实现了Grx1的过表达;以不同浓度H2O2为损伤因素,建立细胞氧化应激模型,检测过表达Grx1后细胞存活率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率的变化,观察过表达Grx1后细胞的抗氧化能力;用终浓度100μmol/L H2O2作用于细胞,利用Western印迹检测120 min内HEK293T细胞中p38MAPK磷酸化水平.实验结果表明,HEK293T细胞过表达Grx1后,缓解了细胞的氧化应激损伤;转染空载体组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后5min开始升高,15min达到最高值,并可维持至120min左右;而过表达Grx1组细胞p38MAPK磷酸化水平在H2O2刺激后各时间段没有明显改变,提示Grx1通过抑制H2O2诱导的p38MAPK信号通路激活发挥其抗氧化作用.
- 邹朝霞李强刘莹莹吴莉芳张春晶房绍红周宏博
- 关键词：谷氧还蛋白P38MAPK瞬时转染
- 重组人谷氧还蛋白1对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用
- 目的
探讨重组人谷氧还蛋白1(rhGrxl)对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。
方法
线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型，病理形态学方法证实模型建立成功。小鼠尾静脉注射rhGrx...
- 吴莉芳
- 关键词：谷氧还蛋白脑缺血再灌注损伤乳酸脱氢酶磷酸化P38MAPK组织病理
- 文献传递
