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吴炳义: 作品数：53 被引量：164H指数：7; 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>

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同种异体移植物炎症因子-1在结直肠癌细胞增殖、迁移及凋亡中的作用被引量：11: 2018年; 目的探讨同种异体移植物炎症因子-1(AIF-1)在结直肠癌(CRC)进展中的作用以及可能的作用机制。方法采用免疫组织化学染色和Western blot的方法检测70例CRC患者癌组织及癌旁正常组织中AIF-1的表达水平,并分析AIF-1的表达与临床病理特征的相关性。然后将AIF-1过表达质粒(AIF-1)和阴性对照质粒(NC)转染至CRC细胞株SW480,探讨AIF-1在体外细胞中的功能。Ed U增殖实验和流式细胞术用来评估细胞增殖和细胞周期;Transwell迁移实验和Annexin V-APC/7-AAD凋亡检测试剂盒用来分析细胞迁移和凋亡;SB203580用来阻断p38 MAPK通路。最后用western blot的方法检测CDK4,Cyclin D1,P21,P27,MMP2,MMP9,Bax,Bcl-2,Bcl-xl,p38和p-p38的表达水平。结果 AIF-1在结直肠癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织,其表达水平与淋巴结转移(P=0.008),TNM分期(P=0.003)和肿瘤大小(P=0.023)密切相关。体外增殖和周期实验结果显示,过表达AIF-1于SW480细胞后能降低Ed U细胞阳性率以及阻滞细胞的G1期(P<0.05);且Western blot结果显示过表达AIF-1于SW480细胞后能抑制CDK4、Cyclin D1的蛋白表达,增强P21、P27的蛋白表达。Transwell迁移结果显示过表达AIF-1能抑制SW480细胞的迁移(P<0.001),伴随着MMP2和MMP9的蛋白水平的下调。此外,AIF-1过表达能诱导SW480细胞凋亡(P<0.01),增强Bax和p-p38的蛋白水平,减弱Bcl-2和Bcl-xl的蛋白水平,而利用SB203580可以明显改善AIF-1过表达引起的凋亡。结论 AIF-1通过抑制细胞增殖和细胞迁移以及诱导细胞凋亡在结直肠癌中发挥肿瘤抑制作用,且AIF-1通过激活p38MAPK途径促进细胞凋亡。; 艾晓兰姚芳王晓睛段东北李科胡子有殷果王梅吴炳义; 关键词：结肠直肠癌增殖迁移凋亡

大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP质粒的构建及其在HEK293细胞中的表达: 2009年; 目的构建大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP表达质粒,并实现其在HEK293细胞的表达。方法提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增δ受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切、连接克隆入pIRES2-EGFP中,将获得的δ-pIRES2-EGFP重组子转染入HEK293细胞中,应用荧光显微镜观察EGFP和δ基因表达情况。结果酶切和测序结果表明δ基因正确构建入pIRES2-EGFP表达质粒中,转染了重组子的HEK293细胞在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光,应用细胞免疫荧光,可以观察到δ基因高强度表达。结论利用巢式RT-PCR等成功构建了δ-pIRES2-EGFP表达质粒,并在HEK293细胞中实现了高效表达。; 胡子有漆松涛张遐曹琼吴炳义; 关键词：Δ阿片受体巢式PCR PIRES2-EGFP HEK293

免疫力评估在肿瘤精准医学领域应用的现状及展望: 2021年; 免疫力评估在精准医学领域应用前景广阔,因为淋巴细胞在人体免疫应答过程中起核心作用,既往的研究表明,疾病在发生、发展、治疗和预后时的免疫功能状态不同。通过免疫力评估,能为临床医生提供确切的参考指标。免疫力评估已在肿瘤、糖尿病、哮喘、风疹、新型冠状病毒感染肺炎等疾病的诊断、治疗和预后方面发挥了积极的临床意义。由于疾病与机体免疫系统功能状态的密切关系,文章综述免疫细胞表型检测的临床应用,进行讨论和展望。; 范晓乐吴炳义张军一孟玉茹

TaqMan探针法荧光定量PCR检测脑脊液细菌方法的建立及应用被引量：7: 2011年; 目的建立TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法，用于脑脊液标本细菌的快速检测。方法针对细菌的16srRNA基因，设计合成细茼的通用引物和革兰阳性菌、革兰阴性菌分型探针，通过构建质粒和制作脑脊液模拟标本来研究引物和探针的检测特异度和敏感度。结果两种革兰分型探针只对相应的细菌可以检测到荧光信号，乙肝病毒DNA、白色念珠菌及人基因组DNA检测结果均为阴性，此方法最低可以检测到10个拷贝的质粒DNA以及100CFU／ml的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌。结论TaqMan探针法荧光定量PCR检测细菌的特异度和敏感度高，检测快速，对脑脊液细菌的早期诊断有重要意义。; 韩慧胡子有姚芳吴炳义; 关键词：TAQMAN探针荧光定量PCR 脑脊液细菌

酒精能够减少斑马鱼胚胎的神经前体细胞并抑制其神经元和神经胶质细胞的分化（英文）被引量：1: 2014年; 目的研究不同浓度的酒精对斑马鱼的神经前体细胞、神经元和神经胶质细胞的影响。方法在斑马鱼卵受精后5 h,在斑马鱼培养液中加1%、2%或2.5%的酒精。采用原位杂交和实时定量PCR的方法检测不同细胞的mRNA水平的变化,以反映酒精对斑马鱼胚胎神经发育的影响。结果不同浓度酒精处理后,斑马鱼胚胎神经前体细胞和神经元显著减少,并且随着酒精浓度的增加其数量减少更加显著。早期的神经胶质细胞标志物的表达随着酒精浓度的增加在尾部减少,而在头部增加。成熟的神经胶质细胞标志物表达随着酒精浓度的增加而显著减少。结论酒精可以导致斑马鱼胚胎神经前体细胞、神经元和胶质细胞数量减少,并抑制神经元和神经胶质细胞的分化。; 殷果姚芳陈小辉王楠王惠丽常红恩苑召虎吴炳义; 关键词：酒精斑马鱼神经前体细胞神经胶质细胞

槲皮素联合5-氟尿嘧啶对人结肠癌LoVo细胞凋亡、周期和迁移能力的影响被引量：4: 2016年; 目的探讨槲皮素与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合用药对人结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及其细胞周期的影响。方法将LoVo细胞分为4组,对照组:加入适量溶剂DMSO的阴性对照组;5-Fu组:加入10 mg/L5-Fu;Q50组:槲皮素浓度为50μmol/L;联合用药组:10 mg/L的5-Fu和50μmol/L的槲皮素联合处理LoVo细胞。LoVo细胞加药处理后,放入培养箱中48 h。流式细胞术检测LoVo细胞凋亡和细胞周期,Transwell实验检测LoVo细胞的迁移能力。结果流式细胞术检测发现对照组、5-Fu组、Q50组及联合用药组的凋亡率分别为(5.00±0.87)%、(5.97±0.67)%、(9.47±1.27)%、(18.03±0.86)%(P<0.05)。细胞周期结果显示处于G0/G1期的细胞分别占(72.48±0.65)%、(70.36±0.24)%、(69.34±1.09)%、(60.14±0.27)%,处于S期的细胞分别占(24.74±0.44)%、(26.33±0.24)%、(28.94±0.89)%、(36.37±0.17)%(P<0.05)。Transwell结果显示加入槲皮素后能抑制细胞的迁移数目。结论槲皮素可进一步促进5-Fu对LoVo细胞凋亡的影响,且能协同5-Fu对细胞周期产生影响,使G0/G1期细胞减少,S期细胞增多。此外,槲皮素和5-Fu联合应用,可抑制细胞的迁移,增强5-Fu对肿瘤生长和远处转移的抑制作用。; 王惠丽陈柳青刘艳邓文喻吴炳义; 关键词：槲皮素 5-FU LOVO 迁移

体外星形胶质细胞损伤后炎症模型的建立及应用被引量：6: 2007年; 目的建立胶质细胞损伤后体外炎症模型,探讨轻度低温、槲皮素及清蛋白对白细胞黏附及胶质细胞损伤的影响。方法利用原代培养的成熟星型胶质细胞采用体外划伤方式造成细胞损伤,然后与白细胞共培养建立星形胶质细胞损伤后体外炎症模型。将共培养的细胞放入CO2孵箱中,将温度控制在32℃的亚低温状态,探讨轻度低温、槲皮素及清蛋白对白细胞黏附及胶质细胞损伤的影响。结果白细胞主要黏附于损伤边缘的胶质细胞,并对其有损伤作用。32℃亚低温可明显降低白细胞对胶质细胞的黏附和损伤,但无白细胞存在时其作用不明显。槲皮素和清蛋白对白细胞的黏附无显著影响,对胶质细胞无保护作用。结论低温主要通过降低白细胞黏附达到保护胶质细胞作用,对单纯的细胞机械损伤无明显保护作用,提示胶质细胞损伤后的反应性增生不是介导白细胞黏附的关键因素。; 吴炳义孙树梅; 关键词：胶质细胞炎症白细胞

槲皮素调节葡萄糖氧剥夺损伤的星形胶质细胞细胞周期基因的表达: 2013年; 目的研究槲皮素对葡萄糖氧剥夺损伤星形胶质细胞基因表达的影响及作用机制。方法将原代培养成熟的星形胶质细胞分为单纯葡萄糖氧剥夺组和葡萄糖氧剥夺联合槲皮素处理组(槲皮素处理组),用基因芯片筛查缺血缺氧4 h后的槲皮素处理对星形胶质细胞基因表达变化的影响,并用实时定量PCR(qRT-PCR)对差异表达基因进行了验证。结果与单纯葡萄糖氧剥夺组相比,槲皮素处理组基因表达谱芯片筛查出的31个基因与细胞周期及其相关调控密切相关,其中上调基因为5个,下调基因26个。用qRT-PCR对其中6个基因进行了验证,检测结果和基因芯片分析结果一致。结论槲皮素能调控葡萄糖氧剥夺损伤的星形胶质细胞细胞周期相关基因的表达。; 姚芳张兰兰苑召虎曾勇吴炳义; 关键词：星形胶质细胞槲皮素基因芯片 REAL-TIME 细胞周期

神经胶质成熟因子γ抑制人结直肠癌LoVo细胞增殖并影响人脐静脉内皮细胞的骨架运动: 2021年; 背景:神经胶质成熟因子γ(glia maturation factor-gamma,GMFG)是细胞骨架运动重建过程中ADF/cofilin超家族蛋白成员之一,可以通过调节肌动蛋白介导细胞骨架重组参与细胞运动的调控。作者前期发现GMFG的高表达与结直肠癌肿瘤患者临床病理相关,但具体的上游及下游机制有待探究。目的:探索GMFG对人脐静脉内皮细胞骨架及LoVo细胞增殖的影响。方法:①将人脐静脉内皮细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架蛋白F-actin表达的关系;然后加入秋水仙素抑制细胞有丝分裂,分为对照组、0.5 mg/L秋水仙素组、1.0 mg/L秋水仙素组,流式细胞术观察3组细胞周期的变化,Western blot蛋白印迹观察3组细胞GMFG蛋白表达;②将人结直肠癌LoVo细胞接种在激光共聚焦皿中,待细胞贴壁稳定生长后,细胞免疫荧光染色观察GMFG的表达与细胞周期的相关性,然后采用siRNA技术干扰LoVo细胞中GMFG的表达,分为空白对照组、空转染组和siRNA-GMFG组,Edu实验检测细胞增殖率的变化。结果与结论:①在人脐静脉内皮细胞中,GMFG的表达与人脐静脉内皮细胞骨架运动有关,细胞骨架回缩时GMFG表达增多;秋水仙素抑制人脐静脉内皮细胞有丝分裂后,随秋水仙素用量增加G2/M期细胞占比增加,GMFG蛋白表达下降;②在LoVo细胞中,GMFG的表达强度与细胞有丝分裂有关,在细胞有丝分裂中后期GMFG表达增强;③siRNA技术干扰LoVo细胞GMFG表达后,细胞增殖率下降;④结果表明,干扰GMFG表达能够抑制人结直肠癌LoVo细胞的增殖率,并且细胞骨架运动与GMFG的表达存在一定的相关性。; 王惠丽陈志江吴炳义; 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞骨架 LOVO细胞秋水仙素肠癌

槲皮素对星形胶质细胞增殖及细胞周期相关蛋白cdc25A的影响: 2013年; 目的通过体外星形胶质细胞的划痕模型,观察槲皮素对星形胶质细胞增殖和其细胞周期的影响,并探究可能的信号通路,分析cdc25A的表达变化。方法经划痕处理过的原代培养的新生SD大鼠的星形胶质细胞用槲皮素处理后,将其放入37℃5%CO2孵箱中进行培养。分别通过Click-iT Edu test,流式细胞术和Western Blotting检测槲皮素对其增殖、细胞周期的影响及细胞周期相关蛋白cdc25A表达的变化。结果与对照组相比,在第24h时就能明显观察到槲皮素抑制划痕的愈合;槲皮素处理24h后,其增殖细胞百分比从20.92%降低到2.74%,G1期星形胶质细胞百分比从82.04%增加到92.06%,其S和G2期有一个相应的减少;50μmol/L槲皮素处理24h以后细胞周期相关蛋白cdc25A的表达强度下调约50%,具有明显的统计学差异(F=40.579,P<0.01)。结论通过划痕模型的研究发现,槲皮素可以通过抑制星形胶质细胞的增殖来抑制划痕的愈合,并通过降低细胞周期相关蛋白cdc25A的表达将其阻断在G1期。; 苑召虎胡子有姚芳张兰兰颜晓慧李科曾勇吴炳义; 关键词：星形胶质细胞槲皮素细胞周期 CDC25A

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