卢亦愚
- 作品数：281 被引量：1,403H指数：20
- 供职机构：浙江省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 一种核酸恒温荧光扩增检测方法及试剂盒
- 本发明公开了一种核酸恒温荧光扩增检测方法及试剂盒，所述方法是在待测样本恒温扩增反应液中加入逆转录酶AMV、单链结合蛋白、解链酶、核酸外切酶和荧光探针，50‑60℃恒温下进行核酸扩增反应，以标准样本为阳性对照，检测扩增曲线...
- 徐昌平冯燕卢亦愚
- 文献传递
- 基于vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR快速检测创伤弧菌的研究被引量：7
- 2007年
- 目的建立基于溶细胞毒素基因vvhA检测创伤弧菌（Vibrio vulnificus）的TaqMan实时荧光定量PCR。方法采用Primer Express软件，设计位于vvhA基因序列保守区的PCR引物和TaqMan探针，建立检测创伤弧菌vvhA基因100bp扩增产物的TaqMan实时荧光定量PCR。采用基因克隆技术，构建作为阳性对照的pMD19-vvhA100重组质粒。以最低扩增循环数（Ct值）、荧光强度增加值（△Rn）为观察指标，对vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR条件进行优化。以不同浓度的创伤弧菌及其它8种细菌DNA和pMD19-vvhA100为模板，对vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR的特异性、敏感性和重复性进行验证。创伤弧菌经腹腔和皮下注射及灌胃感染ICR小鼠，验证vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR对感染小鼠血液、皮下感染组织和肠内容物的检测效果。结果所建立的vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR仅对创伤弧菌DNA或pMD19-vvhA100呈现阳性检测结果，其检测灵敏度可达0．01ng创伤弧菌DNA或10^3个拷贝的pMD19-vvhA100，不同浓度pMD19-vvhA100三次检测结果的SD≤0．79，对腹腔和皮下感染创伤弧菌的小鼠血液、皮下组织标本检测结果均为阳性。结论所建立的创伤弧菌vvhA基因TaqMan实时荧光定量PCR具有快速、稳定、敏感、特异等优点，适合用于临床实验室进行创伤弧菌引起的败血症和创口感染快速诊断。
- 吴增辉楼永良卢中秋卢亦愚严杰
- 关键词：创伤弧菌TAQMAN探针实时荧光定量PCR
- 两种剂型脊髓灰质炎疫苗的热稳定性观察被引量：1
- 2000年
- 为了研究脊髓灰质炎液体疫苗和糖丸疫苗对热冲击后的稳定性差异 ,对 3 7℃孵箱放置不同天数后的两种疫苗分别测定了效价 ,在 -2 0℃保存下效价为 5 9logTCID5 0 /粒的糖丸疫苗 ,3 7℃放置 1天后其效价明显下降 ,到 5天后降为 0 ;而在 -2 0℃保存下效价为 5 7logTCID5 0 /0 1ml的液体疫苗 ,3 7℃放置 3天后仍能维持在 5 5logTCID5 0 /0 1ml左右。实验证明 :脊髓灰质炎液体疫苗不仅具有与糖丸疫苗同样良好的免疫效果 ,且具有质量可靠、热稳定性好等的综合优势 ,更适合我国使用。
- 姜晓路卢亦愚严菊英
- 关键词：脊髓灰质炎糖丸疫苗液体疫苗热稳定性
- 一种沙门氏菌的核酸恒温扩增检测试剂盒及检测方法
- 本发明公开了一种沙门氏菌核酸的恒温扩增检测试剂盒及检测方法，该试剂盒包含DNA提取试剂、恒温扩增反应液、阳性对照和阴性对照；本发明的检测试剂盒特异性高、灵敏度高；核酸扩增反应全部恒定同一温度，恒温扩增仅需35分钟，核酸试...
- 徐昌平余蓓蓓卢亦愚冯燕须周恒胡宗悦
- 文献传递
- 我国麻疹病毒流行株的H和N基因变异速率探讨被引量：17
- 2006年
- 从GenBank检索并下载了我国近40年的麻疹病毒血凝素蛋白(H)和核蛋白(N)的全基因组序列,用Bioedit7.0软件对参考株和代表株进行序列比对,并进行氨基酸进化树的构建,进一步从氨基酸层面分析麻疹流行株的变化速率。结果显示麻疹病毒H蛋白发生的变异,表现为近十年的变异率(1.33×10-3)大约为前三十年变异率(0.95×10-3)的1.4倍,而N蛋白发生的变异,表现为近些年的变异率(1.90×10-3)大约为前三十年变异率(1.01×10-3)的1.8倍。本研究结果提示麻疹病毒近年变异率有增快的趋势,今后需加强对麻疹病毒基因型变异和演变的监测。
- 李海峰卢亦愚严菊英夏哲智邹艳徐昌平冯燕
- 关键词：麻疹基因
- 浙江省麻疹病毒分离株的基因特性与免疫原性研究被引量：22
- 2006年
- 为了研究浙江省1999～2003年麻疹病毒分离株的抗原性变化以及基因特性,阐明其基因特性与麻疹流行的关系,以及抗原性变化对疫苗免疫效果的影响。我们从麻疹患者含漱液中分离麻疹病毒株,制备大鼠免疫血清,与疫苗株沪191和Edmonston株等进行交叉中和试验,测定各毒株之间抗原比;并采集儿童麻疹疫苗免疫前后血清,分别测定其对不同毒株的中和抗体滴度;采用RT-PCR法扩增麻疹毒株血凝素蛋白(H)及核蛋白(N)基因,进行核苷酸序列测定。结果浙江99-1和浙江02-2株与沪191株之间的抗原比分别为3.0和7.3;儿童免疫后血清对浙江02-2株的麻疹中和抗体平均几何滴度(GMT)为15.03,明显低于沪191疫苗株(GMT为68.12);浙江省1999～2003年麻疹分离株之间,H基因氨基酸同源性为99.8%,N基因氨基酸同源性为98.5%～100.0%;与沪191疫苗株的H基因和N基因相比较,分离株与其在氨基酸水平上同源性分别为95.5%～95.7%和95.9%～96.3%。从基因进化树显示,1999～2003年浙江省分离到的麻疹毒株属于H1基因型,但与疫苗株沪191在抗原性和基因特性上已存在明显的差异。
- 严菊英卢亦愚张健华冯燕史雯茅海燕龚黎明葛琼周敏李敏红
- 关键词：麻疹病毒抗原性基因特性
- 猪流感病毒及其基因重配对人类流感流行的影响被引量：4
- 2009年
- 2009年4月13日自墨西哥出现第一例人感染猪流感（H1N1）的死亡病例以来，至5月5日全球确认猪流感病例已上升至1490例，死亡人数30例。除墨西哥与美国外，其他有19个国家也报告了A／H1N1的确认病例。为此WHO在4月27日将全球流感大流行的警告级别提升到4级，并在2天后又进一步提高到5级，并把该流感称为甲型（H1N1）流感，
- 卢亦愚陈寅徐昌平冯燕
- 关键词：猪流感病毒基因重配
- 一种乙型流感病毒荧光扩增检测试剂盒及检测方法
- 本发明提供了一种乙型流感病毒荧光扩增检测试剂盒及其利用试剂盒检测乙型流感病毒的方法，试剂盒包括乙型流感病毒核蛋白基因标准品、荧光扩增检测试剂以及DNA聚合酶与逆转录酶，荧光扩增检测试剂主要包括一步法RT-PCR缓冲液、特...
- 卢亦愚严菊英茅海燕冯燕史雯李敏红周敏
- 文献传递
- 限制性酶切片段长度多态性分析用于乙型流行性感冒病毒巴拿马株与维多利亚株的快速鉴定被引量：2
- 2004年
- 利用限制性酶切片段长度多态性分析 (RFLP)鉴别乙型流行性感冒 (流感 )病毒的巴拿马株与维多利亚株 ,对乙型流感病毒血凝素 (HA)基因采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增后 ,用HindⅢ做酶切反应并进行琼脂糖凝胶电泳。结果显示 :乙型流感病毒维多利亚株或巴拿马株HA基因均能被特异性引物所扩增 ,且与甲1与甲3 型流感病毒无交叉反应。该片段经HindⅢ酶切后 ,乙型流感病毒巴拿马株在电泳谱上出现 6 0 3bp与 2 4 2bp的 2个片段 ,而乙型流感病毒维多利亚株在该片段无 HindⅢ酶切位点 ,仍呈 872bp的一个片段。表明该方法不仅可作为常规血清学方法的补充 ,对乙型流感病毒维多利亚株与巴拿马株作出正确判定 。
- 史雯卢亦愚严菊英李敏红周敏
- 关键词：乙型流行性感冒病毒
- 检测甲型H1N1流感病毒抗药性突变的引物和探针及方法
- 本发明提供了一组检测甲型H1N1流感病毒抗药性突变的特异性扩增引物和荧光探针及其应用，以及检测甲型H1N1流感病毒抗药性突变的方法。采用本发明方法，操作方法简单，结果直观明了；引物和探针敏感性强，特异性好；在流感检测与监...
- 陈寅张严峻卢亦愚茅海燕周敏
- 文献传递
