刘建华
- 作品数：74 被引量：102H指数：6
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区重大科技专项国家科技支撑计划新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 一株新疆野鸭源新城疫病毒F基因的克隆及序列分析
- 张慧敏木哈买提江·铁格斯加尔肯苏占强杜润慈冉多良姚刚刘建华
- 新疆褐牛CD46基因的原核表达及其多克隆抗体的制备
- 2017年
- 旨在克隆并表达新疆褐牛CD46基因,制备其多克隆抗体,为进一步研究牛CD46分子生物学功能奠定基础。采用RT-PCR方法从新疆褐牛脾脏中扩增CD46基因全长,进行测序,并对测序结果进行生物信息学分析,将CD46部分序列亚克隆于pET-28a(+)和pVAX1载体中。将阳性重组质粒pET-28a-△CD46转化于E.coli Rosetta-gamiB(DE3)感受态细胞,诱导表达截短CD46蛋白。用切胶纯化的His-△CD46融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;采用ELISA测定多克隆抗体的效价;取无内毒素重组质粒pVAX1-△CD46转入BHK-21(仓鼠肾细胞)细胞,表达产物以制备的多克隆抗体为一抗,采用Western blot法检测该多克隆抗体的特异性。CD46基因的测序结果表明,部分基因蛋白表达、纯化条带大小与预期一致;制备的抗牛CD46多克隆抗体效价高于1∶128 000,并具有良好的特异性。
- 木哈买提江.铁格斯张慧敏杜润慈加尔肯苏战强冉多良刘建华
- 关键词：新疆褐牛CD46融合蛋白多克隆抗体
- 马疱疹病毒1型gp2基因分子特征
- 2022年
- 为了探索α疱疹病毒亚科的马疱疹病毒特有基因gp2的功能及分子结构,本试验以EHV-1 XJ2015株为研究对象,扩增其gp2基因并测序,继而进行遗传进化分析、氨基酸序列差异性分析和蛋白质性质分析。结果显示,30株EHV-1病毒gp2蛋白氨基酸序列相似性达90.38%;gp2蛋白预测包括1个信号肽、1个螺旋跨膜结构域和1个核外运信号;gp2蛋白二级结构以无规卷曲为主,高达88%,极性分子居多,亲水性氨基酸占52.02%,第25~130位和第273~565位氨基酸亲水性和抗原性较强,易形成潜在的抗原表位。由此可见,gp2基因属于EHV-1较保守的基因,gp2蛋白是分泌型蛋白,且具有良好的抗原性。本试验为进一步解析EHV-1 gp2基因及其编码蛋白功能、制作基因工程疫苗和诊断试剂提供了生物信息学依据。
- 刘建华吴桂灵胡月加尔肯贾钦瑞孙文程撒瑞雪张嗣玉冉多良
- 关键词：分子结构生物信息学分析
- 兽医传染病学实验教学中的生物安全问题与对策
- 2023年
- 动物传染病实验室的生物安全管理是动物传染病学实验教学中必不可少的重要工作,实验课中的任何不当操作或失误都可能引发严重的生物安全问题,因此在确保教学质量的情况下,如何做好生物安全工作,成为兽医传染病学实验教学的重要研究课题。探讨了兽医传染病学实验教学的实验室管理、试验动物管理、动物采样及动物解剖等环节中存在的生物安全问题及其应对措施。
- 加尔肯刘建华
- 关键词：兽医传染病学实验教学生物安全
- 牛病毒性腹泻/粘膜病病毒核酸疫苗的构建及其免疫效果研究被引量：2
- 2013年
- 为提高牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD/MD)核酸疫苗的免疫效力,本实验应用PCR方法扩增BVD病毒(BVDV)E0基因,构建真核表达质粒pVAX1-E0,转染293T细胞,经RT-PCR和western blot分析显示,转染细胞能够瞬时表达E0蛋白。并分别将pVAX1、pVAX1-E0或将pVAX1-E0分别与一种表达细胞因子基因的重组质粒作为佐剂(pVAX1-IL-2、pVAX1-IL-4及pVAX1-IFN-γ)免疫小鼠,采用间接ELISA法检测免疫小鼠BVDV抗体效价,以MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。实验结果表明,与pVAX1-E0相比,接种pVAX1-E0/pVAX1-IL-2小鼠血清E0抗体水平及淋巴细胞增殖水平显著提高(p<0.01),表明细胞因子基因佐剂IL-2能够有效提高BVDV E0核酸疫苗免疫效果,可以刺激小鼠产生良好的免疫应答。
- 宫玉玲冉多良季新成刘建华
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒细胞因子核酸疫苗
- 马疱疹病毒1型gB糖蛋白表位与小鼠C3d串联重组质粒免疫效果分析被引量：1
- 2017年
- 为了探究马疱疹病毒1型gB糖蛋白表位与小鼠C3d串联重组质粒的免疫效果。设计合成完整的抗原表位串联体B;以小鼠脾脏总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增出小鼠C3d基因;以EHV-1基因组为模板扩增出gB基因;构建重组质粒B-pVAX1、gB-pVAX1、C3d-pVAX1、B-C3d-pVAX1和gB-C3d-pVAX1;转染BHK-21细胞后能正常表达;将重组质粒免疫BALB/c雄性小鼠。结果表明:B-pVAX1免疫组抗体水平、IFN-γ和IL-4相对表达量均高于gB-pVAX1免疫组、C3d-pVAX1免疫组和对照(PBS)免疫组,差异极显著(P<0.01);B-C3dpVAX1免疫组抗体水平、IFN-γ和IL-4相对表达量均高于B-pVAX1免疫组、C3d-pVAX1免疫组和对照(PBS)免疫组,差异极显著(P<0.01);gB-C3d-pVAX1免疫组抗体水平、IFN-γ和IL-4相对表达量均高于gB-pVAX1免疫组、C3d-pVAX1免疫组和对照(PBS)免疫组,差异极显著(P<0.01);重组表位串联体B能够增强小鼠体液免疫和细胞免疫,同时C3d作为分子佐剂具有增强免疫的作用。
- 李静鲍子磊范斌胡月宋焕堂刘建华
- 关键词：B细胞表位重组质粒免疫效果
- 三黄鸡“支气管”堵塞病的诊断和治疗
- 2014年
- 鸡的许多传染病都会造成呼吸系统损伤,并可导致大批死亡。2010年后,新疆乌鲁木齐周边地区的一些鸡群都出现了一种以气管出血、气囊浑浊和支气管被淡黄色干酪样物质堵塞为主要病理变化的呼吸系统疫病,其发病率和死亡率高,危害严重。本文对一例典型"支气管"堵塞病例,采集病料后制作石蜡包埋切片,进行了病理组织学检查,并用中药"法贝灵"为主的药物组方进行了鸡群治疗。病理组织学观察发现,患鸡的初级支气管、次级支气管和三级支气管均被炎性渗出物堵塞;"法贝灵"为主的药物组方治疗效果显著。
- 刘英玉张毅王金泉夏利宁刘建华翟少华谢鹏辉喇斐燕苏战强
- 关键词：支气管病理组织学
- 牛病毒性腹泻病的研究概况被引量：2
- 2016年
- 介绍了牛病毒性腹泻病的病原、临床症状、诊断方法及预防措施,以期为养殖户提供参考。
- 孟小林刘建华刘晓娜贾林军唐燕
- 关键词：牛病毒性腹泻
- 犬细小病毒病的诊治被引量：1
- 2014年
- 随着社会的进步，人们生活水平的不断提高，犬作为宠物在人们的日常生活中的地位不断提升，且给人们的生活增添不少乐趣。但是与此同时由于预防措施的不恰当导致的犬疾病也倍受关注。下面就通过三例犬细小病毒病为例简单的介绍一下犬细小病毒病的诊断、治疗过程以及基本的预防措施。希望能引起广大养犬爱好者的重视。
- 彭永刚贾海军刘建华
- 关键词：犬细小病毒病诊治生活水犬疾病宠物养犬
- 马疱疹病毒1型gB糖蛋白线性B细胞表位的预测与鉴定被引量：3
- 2017年
- 试验旨在应用生物信息学技术综合分析马疱疹病毒1型(equine herpesvirus 1,EHV-1)gB糖蛋白,预测B细胞表位,筛选出具有潜在诊断价值的线性B细胞表位。将EHV-1gB糖蛋白的基因序列输入DNAStar软件中的Protean工作区中,经参数综合比较分析筛选潜在的B细胞表位,克隆、表达预测表位的基因片段,利用表达的融合蛋白作为抗原与马疱疹病毒阳性血清反应。经预测分析,gB糖蛋白的B细胞表位可能位于第6—10、23—32、53—65、72—98、111—120、152—166和173—180位氨基酸区域。本试验成功构建并原核表达含7个潜在B细胞表位的融合蛋白。Western blotting试验结果显示,其中5个融合蛋白能被马疱疹病毒阳性血清识别。本试验利用生物信息学技术结合分子生物学技术成功筛选到5个潜在的B细胞表位,为EHV-1表位诊断、表位疫苗抗原的设计奠定了技术基础。
- 李静刘建华付强宋焕堂范斌胡月冉多良
- 关键词：B细胞表位抗原表位预测原核表达
