刘勇攀 作品数:11 被引量:25 H指数:3 供职机构: 杭州市余杭区第一人民医院 更多>> 发文基金: 江苏省社会发展科技计划 湖北省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
幽门螺杆菌提取物体外对人胃癌细胞SGC-7901形态的影响 被引量:3 2008年 目的:探讨幽门螺杆菌(H pylori)刺激人胃癌细胞SGC-7901后,对细胞形态,迁移以及细胞骨架的影响.方法:从人胃黏膜组织中分离培养H pylori,将得到的H pylori菌体超声裂解,用超声提取物刺激SGC-7901细胞,直接观察SGC-7901细胞形态的变化:细胞迁移活动用Boyden迁移槽和划线法分析;用phalloidin对细胞内F-actin进行荧光染色,研究其对细胞骨架的作用.各组间细胞迁移数量比较用单因素方差分析,组间两两比较用SNK检验:对照组和刺激组细胞发生蜂鸟表型的百分率进行t检验.结果:H pylori菌体超声提取物刺激人胃癌细胞SGC-7901后,细胞的活动性增强,高浓度和低浓度刺激组与对照组相比细胞迁移数明显提高(F=12697.314,P<0.01),两两之间相比也具有统计学意义(P<0.01).受刺激后蜂鸟表型细胞数较对照组大大提高(t=29.626,P<0.01).对照组细胞仅有少量应激纤维形成,H pylori刺激10 min后,应激纤维增加.结论:H pylori可诱导胃癌细胞SGC-7901发生形态改变,促进其迁移,并且增加细胞内细胞骨架的形成. 陆芬英 张尤历 王文兵 陈永昌 张宇川 刘勇攀 吴莺关键词:幽门螺杆菌 胃癌细胞 细胞骨架 大端口覆膜支架与标准无覆膜支架治疗胃癌所致胃出口梗阻的对照研究 2015年 现在,有许多类型的金属支架用于治疗胃出口恶性梗阻,这些标准支架与缓解食管梗阻的金属支架相似。然而,远端胃癌引起的胃出口梗阻不同于食管恶性梗阻,其近端胃腔往往是宽大的。 石定 刘勇攀 冯国建 季峰 暴银素关键词:胃出口梗阻 远端胃癌 覆膜支架 金属支架 食管梗阻 戊乙奎醚预处理对脓毒症小鼠肺损伤时MAPK信号转导通路的影响 被引量:8 2009年 目的探讨戊乙奎醚(PHC)预处理对脓毒症小鼠肺损伤时丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的影响。方法健康雌性昆明小鼠105只,体重20~25g,随机分为3组(n=35):假手术组(S组)、脓毒症(CLP)组和戊乙奎醚(PHC)组。采用盲肠结扎并穿孔法制备脓毒症模型。PHC组于造模前1h腹腔注射戊乙奎醚0.45mg/k,S组和CLP组于造模前1h注射等容量生理盐水。于造模后即刻测定肺微血管通透性;造模后12h时进行动脉血气分析,观察肺组织病理结果,测定肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK1/ERK2)和c—jun氨基末端蛋白激酶(JNK)表达。结果与S组比较,CLP组PaO2、PaO2/FiO2和pH值降低,肺微血管通透性和肺组织MDA含量升高,SOD活性降低,磷酸化的p38MAPK、ERK1/ERK2和JNK表达上调(P〈0.05或0.01);与CLP组比较,PHC组PaO2、PaO2/FiO2和pH值升高,肺微血管通透性和肺组织MDA含量降低,SOD活性升高,磷酸化的p38MAPK和ERK1/ERK2表达下调(P〈0.05或0.01)。结论戊乙奎醚预处理可通过抑制MAPK信号转导通路(p38MAPK和ERK1/ERK2)的激活,从而减轻脓毒症小鼠肺损伤。 刘勇攀 王焱林 詹佳 张宗泽 王成夭关键词:胆碱能拮抗剂 P38丝裂原活化蛋白激酶类 细胞外信号调节MAP激酶类 JNK丝裂原活化蛋白激酶类 Ⅰ型胶原蛋白基因在胃癌、食管癌中的表达 被引量:6 2008年 [目的]应用荧光差异显示技术筛选胃癌中特异表达的基因,并验证其在胃癌、食管癌中的表达,为进一步了解胃癌、食管癌发生、发展的分子机制提供帮助。[方法]应用荧光差异显示技术(DD-PCR)分析胃癌及其相对应的正常胃黏膜组织,获得差异表达的基因片段,这些片段经过二次PCR再扩增后进行克隆和测序,通过在GenBank中同源性检索,查找与差异片段相对应的同源基因。应用半定量PCR,荧光定量PCR等方法进一步验证该基因在胃癌及食管癌中的表达差异。[结果]通过DD-PCR得到的差异片段中的一个片段对应于人Ⅰ型胶原蛋白基因。该基因的读码框长4395bp,编码1464个氨基酸,编码蛋白分子量约139.01kD。该基因在胃癌及食管癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织,并且在食管癌组织中的表达差异较胃癌中更明显。[结论]人Ⅰ型胶原蛋白基因在胃癌及食管癌中均呈高表达,推测其可能在胃癌及食管癌的发生发展中起作用。 刘勇攀 张尤历 高广 张宇川 陆芬英 吴莺关键词:胃肿瘤 食管肿瘤 聚合酶链反应 RPS15a基因在胃癌中高表达 2014年 目的:研究核糖体蛋白S15a(ribosomal protein S15a RPS15a)基因在胃癌及癌旁组织中表达差异,为进一步了解胃癌发生、发展的分子机制提供帮助。方法应用荧光定量PCR等方法进一步验证该基因在胃癌及癌旁组织中的表达差异,并在多种肿瘤细胞中的表达量进行比较。结果该基因在胃癌组织中的表达量高于其对应的癌旁组织,但在多种肿瘤细胞中的表达量无显著差异。结论 RPS15a基因在胃癌中呈高表达,说明其可能与细胞恶性生物学行为相关。在多种肿瘤细胞中表达量无显著差异,推测其可能在恶性肿瘤中的高表达具有普遍性。 刘勇攀 石定 叶水凤关键词:胃癌 定量PCR RNA干扰技术在消化系肿瘤基因治疗中的应用 2008年 刘勇攀 范钰 张尤历关键词:RNA干扰 小干涉RNA 消化系肿瘤 基因治疗 两种途径治疗胆道恶性梗阻的对比分析 被引量:1 2011年 目的分析比较经胃十二指肠镜放置内支架引流(ERBD)和经皮肝穿刺胆管放置内支架引流(PTBS)治疗恶性梗阻性黄疸的效果。方法收集经ERBD和PTBS治疗的晚期恶性梗阻性黄疸患者68例,其中49例行ERBD治疗(ERBD组),19例行PTBS治疗(PTBS组)。观察两组一次性手术成功率、并发症发生率、术后2周血清总胆红素水平及术后住院时间。结果两组手术一次性成功率比较差异无统计学意义(P>0.05),ERBD组的并发症发生率显著低于PTBS组(P<0.05)。ERBD组45例和PTBS组17例一次性手术成功的患者中,术后2周血清总胆红素水平均较术前显著降低(P<0.01),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。ERBD组术后住院时间显著短于PTBS组(P<0.01)。结论 ERBD和PTBS均为治疗晚期恶性梗阻性黄疸的有效方法,但ERBD比PT-BS并发症少,术后住院时间短,PTBS可考虑在ERBD失败后和技术条件限制情况下使用。 刘勇攀关键词:恶性梗阻性黄疸 RNA干扰技术干涉后核糖体蛋白S15a在胃癌中的表达及意义 被引量:1 2014年 目的探讨RNA干扰(RNAi)技术干涉后核糖体蛋白S15a(RPS15a)在胃癌中的表达及意义。方法选取12例胃癌患者手术切除的胃癌组织,利用RNAi干涉RPS15a基因,将小片段克隆到质粒中,分别提取质粒后转染胃癌细胞BGC823。将未转染、随机小片段转染非编码序列、siRPS15a-1转染、siRPS15a-2转染的BGC823细胞分为BGC823-WT组、siNC组、siRPS15a-1组、siRPS15a-2组,RT-PCR法及Western blot分别检测各组RPS15a RNA及蛋白的表达情况,流式细胞仪检测细胞增殖的变化。结果 RNAi后细胞中出现了明显的绿色荧光,提示此转染方式是可行的。转染检测结果表明,本实验提取的RNA未受到质粒DNA的污染,可以进行表达的比较。siRPS15a-1组、siRPS15a-2组RNA及蛋白表达相对灰度比值与BGC-WT组、siNC组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),BGC-WT组与siNC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RNAi后细胞增殖速度显著下降,多数细胞集中在G_0/G_1期。结论 RNAi技术不仅可以下调RPS15a在胃癌中表达,而且还可以抑制胃癌细胞的增殖活性。 刘勇攀 石定 王泽军 于香关键词:核糖体蛋白 胃癌 RNA干扰 无痛胃镜检查对冠心病患者心电图的影响 被引量:4 2010年 于香 刘勇攀关键词:无痛胃镜 冠心病 心电图 幽门螺杆菌对人胃癌细胞SGC-7901中SHP-2及细胞骨架的影响 被引量:3 2008年 目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H pylori)刺激人胃癌细胞SGC-7901后,对细胞内SHP-2表达及细胞骨架的影响.方法:将临床分离的胃癌H pylori菌体裂解,以超声提取物刺激SGC-7901细胞1h,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量法测定刺激前后SHP-2表达量的变化;并将PCR产物进行克隆和测序.将不同疾病(胃炎,胃溃疡,胃癌)的菌株H pylori超声提取物刺激SGC-7901细胞10min,采用phalloidin对细胞内骨架进行荧光染色,研究其对细胞骨架的影响.将野生型和突变型RhoA质粒转入细胞后,再以胃癌H pylori超声提取物刺激,进一步观察细胞内骨架的变化.结果:胃癌H pylori菌体超声提取物刺激SGC-7901细胞1h后,细胞内SHP-2表达量没有明显变化.胃炎,胃溃疡,胃癌H pylori菌体超声提取物刺激人胃癌细胞SGC-7901后,与对照组相比,细胞内骨架增多(65.4±0.510,63.37±0.475,64.53±0.522vs20.34±1.376,均P<0.05),但这三种菌株间相比无统计学意义.转染入野生型RhoA质粒的细胞经胃癌H pylori菌体超声提取物刺激后,细胞内骨架较未转染者增多(72.99±1.818vs61.78±1.288,P<0.05),而转染入无活性突变型RhoA质粒的细胞经刺激后,细胞内骨架与未转染者无明显差别.结论:胃癌H pylori超声提取物未能引起细胞内SHP-2mRNA表达量的改变;胃炎,胃溃疡,胃癌H pylori菌体超声提取物能够增加细胞内骨架的形成,其作用与H pylori菌种无关,RhoA活性的增强是其中的一个重要中间环节. 张尤历 陆芬英 王文兵 张宇川 刘勇攀 吴莺关键词:幽门螺杆菌 胃癌细胞 SHP-2 细胞骨架 RHOA