余养盛
- 作品数:14 被引量:36H指数:4
- 供职机构:南开大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金天津市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 一种微生物转化生产胱氨酸的方法
- 一种微生物转化生产胱氨酸的方法。本发明方法包括:在以恶臭假单胞菌TS-1138细胞为酶源的情况下,以羟胺为抑制剂,酶法转化底物DL-2-氨基-Δ<Sup>2</Sup>噻唑啉-4羧酸(DL-2-Amino-Δ<Sup>2...
- 白钢杨文博刘春琴余养盛
- 文献传递
- 假单胞菌TS1138 L-半胱氨酸脱巯基酶的研究
- 本文通过PCR方法扩增得到假单胞菌TS1138L-半胱氨酸脱巯基酶基因(cd),将其克隆至克隆载体pBluescriptSKII,测定了含有脱巯基酶基因(cd)的1.2kbDNA片段的序列;同时,将其克隆至表达载体pET...
- 余养盛李洋金永杰白钢杨文博
- 关键词:L-半胱氨酸脱巯基酶假单胞菌基因克隆基因表达
- 文献传递
- 假单胞菌TS1138 L-半胱氨酸脱巯基酶基因的克隆与表达被引量:2
- 2006年
- 提取假单胞菌TS1138染色体基因,以自行设计的引物通过PCR方法扩增得到L-半胱氨酸脱巯基酶基因(cds),将其克隆至克隆载体pBluescript SKⅡ,并转化入大肠杆菌DH5α,测定了含有脱巯基酶基因(cds)的1.2 kb DNA片段的序列;同时,将其克隆至表达载体pETH,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析,重组蛋白量占菌体总蛋白的36.8%,经Ni-NTA柱亲合层析后,重组蛋白纯化率达88%以上.用非变性PAGE方法对基因表达的脱巯基酶进行了鉴定.
- 白钢李洋余养盛杨文博游松刘忠孙丹
- 关键词:L-半胱氨酸脱巯基酶假单胞菌基因克隆
- 一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用
- 一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用。涉及利用免疫磁性微球进行酶的分离纯化和固定化的方法。本发明采用生物特异性耦联的方法,将单克隆或多克隆抗体固定于磁性微球载体上,得到可用于分离纯化和固定化酶的免疫磁性微球...
- 白钢余养盛刘春琴曹宇杨文博
- 文献传递
- 假单胞菌生物合成L-半胱氨酸途径中脱巯基酶的研究被引量:1
- 2006年
- 通过PCR方法扩增得到假单胞菌TS1138L-半胱氨酸脱巯基酶基因(cd),将其克隆至pBluescript SKII载体,测定了含有L-半胱氨酸脱巯基酶基因的1·2kb DNA片段序列,并与其它菌株的脱巯基酶基因进行了同源性比较;同时,将其克隆至表达载体pET-21a(+),IPTG诱导表达,表达产物经Ni-NTA柱亲合层析后,得到纯化的重组蛋白。利用脱巯基酶的活性染色方法对重组表达的L-半胱氨酸脱巯基酶进行了鉴定,并探讨了L-半胱氨酸脱巯基酶的酶学性质,以及在生物转化合成L-半胱氨酸途径中的关键作用。
- 余养盛李洋金永杰白钢杨文博
- 关键词:L-半胱氨酸脱巯基酶假单胞菌基因克隆酶学性质
- 桑枝生物碱与儿茶素的降血糖作用被引量:19
- 2007年
- 耿鹏朱元元杨洋高智慧余养盛肖会姣白钢
- 关键词:降血糖作用儿茶素生物碱桑枝控制血糖常见病
- 一种微生物酶法生产L-色氨酸的方法
- 一种微生物酶法生产L-色氨酸的方法。本发明利用恶臭假单胞菌TS1138(Pseudomonas putidaTS1138)和高效表达色氨酸酶的大肠杆菌菌体的全细胞、菌体裂解液或固定化酶为酶源,从底物DL-2-氨基-Δ<S...
- 白钢陈宁杨文博余养盛刘春琴段静静
- 文献传递
- 假单胞菌L-半胱氨酸合成酶的纯化和性质研究被引量:7
- 2004年
- 假单胞菌TS 1 1 38的细胞浆液通过硫铵沉淀、SephadexG 75凝胶过滤、DEAE Cellulose5 2离子交换、SephadexG 1 0 0凝胶过滤等分离纯化手段分别将从L ATC合成L 半胱氨酸的两个酶———L ATC水解酶和L SCC水解酶纯化了 83 9和 90 3倍。SDS PAGE鉴定均为单一条带 ,两种酶的相对分子质量分别为 37 5和 42 8kD ;酶反应的最适温度均为 35℃ ,最适pH分别为 7 0和 8 0 ;酶的米氏常数分别为 0 67mmol L和 0 1 5mmol L ,最大反应速度分别为0 39× 1 0 3mmol L·min和 0 42× 1 0 3mmol L·min。
- 金永杰杨文博刘忠白钢余养盛
- 关键词:酶纯化酶性质
- 一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用
- 一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用。涉及利用免疫磁性微球进行酶的分离纯化和固定化的方法。本发明采用生物特异性耦联的方法,将单克隆或多克隆抗体固定于磁性微球载体上,得到可用于分离纯化和固定化酶的免疫磁性微球...
- 白钢余养盛刘春琴曹宇杨文博
- 文献传递
- L-半胱氨酸产生菌恶臭假单胞菌TS1138的鉴定和诱变育种被引量:4
- 2007年
- 从土壤中分离得到一株利用DL-2-氨基-Δ2-噻唑啉-4-羧酸合成L-半胱氨酸的TS1138菌株,通过形态学特征、生理生化特征、(G+C)(摩尔分数)和16S rRNA基因序列对其进行了分类鉴定,确定TS1138菌株为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida).该菌株具有将DL-2-氨基-Δ2-噻唑啉-4-羧酸不对称地水解生成L-半胱氨酸的性能.采用了L-半胱氨酸产物的检测方法即18-磷钨酸法、薄层层析法和旋光度法.将TS1138菌株进行亚硝基胍诱变,得到TS1138菌株脱巯基酶缺失突变株TS1138-10,其产L-半胱氨酸能力较出发菌株提高了5000/以上.TS1138-10的稳定性实验表明,该菌株的高产L-半胱氨酸能力具有稳定性的遗传特性.
- 孙丹余养盛杨文博田旺白钢
- 关键词:L-半胱氨酸