于婷
- 作品数：39 被引量：72H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- 炭疽毒素保护性抗原的不同结构域对其表达可溶性的影响
- 2008年
- 目的:对炭疽毒素保护性抗原(PA)的不同结构域进行了缺失突变,以期找到免疫原性降低而功能变化不大的PA蛋白突变体。方法:在对PA结构域的缺失突变体进行表达时,意外发现不同的突变体表达效果之间存在很大差异,遂用DNAStar软件对PA的4个结构域和突变体进行分析。结果:PA蛋白结构域2的表面特性与其他结构域存在很大差异。结论:推断这种表面特性影响了PA突变体的可溶性特征。
- 任声权易绍琼于婷杨秀旭刘树玲赵兴卉陈薇
- 关键词：炭疽毒素保护性抗原结构域缺失突变体
- 复合干扰素突变体在毕赤酵母中的表达、纯化及活性分析被引量：4
- 2003年
- 根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素突变体基因 ,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K ,将重组载体pMEX CIFNm用SacⅠ线性化后 ,转化毕赤酵母GS115 .转化子经诱导后 ,培养上清有抗病毒活性的蛋白产生 .经过离子交换 ,疏水层析 ,凝胶过滤三步层析纯化 ,得到了纯度大于95 %的重组复合干扰素突变体 ,经N端氨基酸序列分析表明 ,该蛋白N端序列与理论值一致 ,质谱测定分子量为 19 3kD ,与理论值一致 .用细胞病变抑制法测定其活性 ,并结合Lowry法蛋白定量计算其比活性为 6× 10 8IU mg ,与复合干扰素的比活相当 .
- 于长明付玲齐连权张晓鹏于婷来大志王海涛陈薇
- 关键词：毕赤酵母纯化活性
- TF-1细胞增殖法测定神经生长因子生物学活性的建立与应用被引量：8
- 2012年
- 目的:建立并优化用于检测神经生长因子(NGF)生物学活性的TF-1细胞增殖法,并应用于重组人NGF和鼠NGF制品的活性检测。方法:将梯度稀释的人NGF国际参考品与TF-1细胞相作用,通过MTT法测定细胞增殖情况,建立测定NGF活性的TF-1细胞增殖法;从粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)残留、NGF加样稀释率、TF-1细胞接种浓度、培养时间等多个环节对实验条件进行优化;将建立的TF-1细胞增殖法应用于重组人NGF和鼠NGF的活性检测。结果:建立了用于NGF活性检测的TF-1细胞增殖法;实验条件优化结果表明,在无GM-CSF残留的情况下,将稀释至1/4的NGF样品与4×105/mL的细胞相互作用,培养48 h,可以得到更为典型的的四参数曲线;利用条件优化后建立的检测方法对重组人NGF和鼠NGF各2批样品分别进行4次测定,结果平均值分别为10.01×105、10.81×105和3.55×105、3.30×105U/mg,变异系数分别为7.5%、7.2%和7.2%、9.1%,检测结果稳定均一,表明检测方法具有很好的重复性。结论:建立并优化了用于NGF活性检测的TF-1细胞增殖法,该方法操作简便、定量准确、重复性好、稳定可靠,可有效应用于人NGF和鼠NGF制品的活性检测。
- 于婷宋小红付玲侯利华
- 关键词：神经生长因子生物学活性
- 一种抗炭疽PA抗原的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种具有人源化、嵌合和鼠源化形式的抗炭疽PA抗原的单克隆抗体，以及所述抗体在制备炭疽治疗药物中的应用。本发明公开的抗体具有特异的抗原结合性、优异的毒素中和活性以及良好的动物保护功能。
- 陈薇李建民李冰张金龙侯利华宋小红于婷徐俊杰付玲张军刘树玲任军
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌黏附因子ClfA作为金黄色葡萄球菌疫苗组分的研究
- 2010年
- 目的研究黏附因子丛生因子A(clumping factor A,ClfA)在金黄色葡萄球菌(SAU)不同菌株中的分布情况,为开发具有广泛保护效果的SAU疫苗奠定基础。方法采用PCR法扩增目的基因,构建重组质粒,以大肠杆菌BL21(DE3)为表达宿主,对目的蛋白进行表达、纯化。PCR及点杂交法检测ClfA在不同菌株中的分布情况。结果得到纯度较高的目的蛋白,PCR及点杂交结果显示ClfA存在于菌株USA300,而在菌株546、1884、1885中并无分布。结论 ClfA在SAU各菌株中分布不广泛,可能难以作为具有广泛保护效果的SAU疫苗组分。
- 张晓艳易绍琼付玲刘树玲于婷刘颖陈薇
- 关键词：金黄色葡萄球菌疫苗聚合酶链反应
- 半乳糖凝集素-1的表达纯化与生物活性分析被引量：1
- 2009年
- 目的:获得重组人半乳糖凝集素-1(galectin-1)蛋白,并分析其生物学活性。方法:PCR方法扩增目的基因,将其克隆到原核表达载体pET21a(+),获得重组质粒pET-galectin;将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导,获得目的蛋白的表达;采用Ni-NTA亲和层析柱对目的蛋白进行纯化,用红细胞凝集试验分析其生物学活性。结果与结论:成功构建重组原核表达质粒pET-galectin,目的蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,经Ni-NTA亲和层析柱一步纯化后,得到的蛋白纯度可达80%以上。红细胞凝集试验结果表明获得的重组蛋白具有较好的生物学活性,可进一步用于半乳糖凝集素-1功能研究。
- 易绍琼任声权于婷张晓艳刘树玲陈薇
- 关键词：半乳糖凝集素原核表达蛋白纯化
- 金黄色葡萄球菌截短SasA蛋白在大肠杆菌中的表达及应用
- 本发明涉及在大肠杆菌中高效表达金黄色葡萄球菌截短的SasA(Serine-rich adhesion forplatelets)蛋白的方法。根据GenBank报导的金黄色葡萄球菌SasA基因全长序列(GenBank：BX...
- 陈薇易绍琼于长明徐俊杰侯利华付玲任军于婷
- 文献传递
- 复合干扰素在毕赤酵母中的分泌表达、纯化及活性分析被引量：6
- 2004年
- 目的 在毕赤酵母中高效分泌表达复合干扰素。方法 根据毕赤酵母密码子偏性合成了复合干扰素基因 ,克隆至分泌型酵母表达载体pMEX9K ,线性化后转化毕赤酵母GS115 ,筛选高表达菌株。诱导后的培养上清经过离子交换 ,疏水层析 ,凝胶过滤三步层析纯化 ,用细胞病变抑制法测定其活性 ,并结合lowry法蛋白定量计算其比活性。结果 SDS PAGE分析显示 ,重组蛋白以可溶性分子的形式存在于上清液中 ,经纯化后纯度达到 96 % ,其N端氨基酸序列与理论值一致 ,比活与干复津相当。结论 复合干扰素在毕赤酵母中获得高效分泌表达 。
- 于长明齐连权来大志张晓鹏孔毅荣于婷付玲陈薇
- 关键词：毕赤酵母基因表达
- 一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种抗鼠疫杆菌F1抗原的单克隆抗体，以及所述抗体在制备鼠疫治疗药物中的应用。本发明公开的抗体具有特异的抗原结合性、低免疫原性以及良好的动物保护功能。
- 陈薇李建民张金龙任军李冰宋小红于婷刘树玲
- 文献传递
- 炭疽毒素受体CMG2胞外区的截短表达、纯化及鉴定分析
- 2010年
- 【目的】分析CMG2胞外区的分子结构与功能,探讨ATR与PA结合的活性位点及特征,为阐明炭疽毒素的致病机理提供依据。【方法】用pQE30表达质粒在大肠杆菌内表达长短不同的3个CMG2胞外区截短片段,经纯化后,用Western blotting和细胞保护性实验对3个重组蛋白进行分析。【结果】发现3个重组蛋白均可与4B5单抗结合,但均没有细胞保护活性。【结论】3个截短蛋白失去了与PA结合的能力,说明CMG2的187～217之间氨基酸残基对PA结合很重要,不可或缺。
- 屈野徐俊杰于婷付玲宋小红陈薇
- 关键词：炭疽毒素受体截短表达
