万敬员
- 作品数：93 被引量：487H指数：13
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金衢州市科技计划项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学文化科学更多>>
- 重组质粒phPPARδ-IRES2-EGFP高效体外转染表达体系的建立
- 2007年
- 目的:建立phPPARδ-IRES2-EGFP重组质粒高效体外转染表达的体系。方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine2000将phPPARδ-IRES2-EGFP转染入293细胞,荧光显微镜观察质粒转染细胞GFP报告基因表达强度及转染效率,并对转染细胞hPPARδ的表达进行荧光定量PCR和Western Blot检测。结果:荧光显微镜下可见转染phPPARδ-IRES2-EGFP质粒的293细胞绿色荧光蛋白(GFP)报告基因高表达,转染效率高达(85±10)%;荧光定量PCR和Western Blot检测的结果表明,phPPARδ-IRES2-EGFP转染的293细胞其hPPARδ表达水平高于空载体转染对照组(P<0.01)。结论:成功建立phPPARδ-IRES2-EGFP质粒的高效体外转染表达体系,为hPPARδ受体功能的研究及基于hPPARδ为靶标的药物筛选平台的建立奠定了基础。
- 章涛万敬员杨俊卿周元国周岐新
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Δ转染效率293细胞
- 青心酮对活化RAW264.7细胞株血红素氧合酶-1mRNA/一氧化碳及TNF-α表达的影响被引量：5
- 2004年
- 目的观察青心酮对活化 RAW264.7细胞株血红素氧合酶-1mRNA/一氧化碳(Hemeoxygenase-1/carbon monoxide,HO-1mRNA/CO)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法用 LPS 做刺激剂,建立活化细胞模型。分别用 RT-PCR 法检测 HO-1mRNA 的表达,血红蛋白结合法检测 CO 的相对含量,Western-blot 方法检测 TNF-α蛋白质的表达。结果 10^(-5)mol/L 青心酮使活化巨噬细胞 HO-1mRNA 表达增加,CO 增加,TNF-α蛋白表达下降。结论青心酮上调活化 RAW264.7细胞株 HO-1mRNA/CO 的表达,抑制 TNF-α蛋白的产生,这可能是 DHAP 抗炎作用机制之一。
- 张代娟吴萍盘茜万敬员张力吴涛周晓燕叶笃筠
- 关键词：青心酮血红素氧合酶-1一氧化碳肿瘤坏死因子-Α
- COX-3:对乙酰氨基酚的作用靶点?被引量：13
- 2010年
- COX-3是环氧合酶的一种新型剪接异构体,与COX-1源于同一基因。不同物种如犬、鼠、人类,COX-3基因序列不同,编码的氨基酸序列也不同,COX-3蛋白的功能可能不同。COX-3对对乙酰氨基酚的抑制作用非常敏感,被认为是对乙酰氨基酚的作用靶点。COX-3的发现可能成为解开对乙酰氨基酚解热止痛作用机制的一把钥匙。
- 吴孟娇万敬员
- 关键词：对乙酰氨基酚剪接异构体
- 小檗碱对氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞促炎细胞因子和活性氧的影响被引量：8
- 2017年
- 目的:研究小檗碱对氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞炎症细胞因子和活性氧的影响及其可能分子机制的探讨。方法:分别用不同浓度的小檗碱处理小鼠RAW 264.7巨噬细胞,6 h后,分别用酶连免疫法检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α和白介素-1β生成;荧光分光光度计检测细胞内活性氧;定量逆转录聚合酶连反应和流式细胞术分析巨噬细胞Toll样受体4信使RNA和蛋白表达。结果:相对于空白组,氧化型低密度脂蛋白显著地促进巨噬细胞生成肿瘤坏死因子-α和白介素-1β,产生活性氧,上调Toll样受体4信使RNA和蛋白表达(P<0.05);进一步发现小檗碱剂量依赖地抑制氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞肿瘤坏死因子-α和白介素-1β生成;减轻氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞活性氧产生;下调氧化型低密度脂蛋白诱导巨噬细胞Toll样受体4表达。结论:小檗碱能有效地抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞促炎细胞因子和活性氧的生成,其作用机制可能是通过下调Toll样受体4表达。
- 陈博万敬员
- 关键词：小檗碱氧化性低密度脂蛋白巨噬细胞促炎症细胞因子活性氧
- 微波提取对桂枝-甘草药对化学成分影响的研究被引量：1
- 2015年
- 目的研究微波提取对桂枝-甘草药对化学成分的影响。方法微波提取桂枝-甘草药对,测定主要化学成分甘草酸和桂皮醛的含有量,考察微波功率和提取溶剂对提取率的影响。结果当提取溶剂为40%乙醇,微波功率为200W时,甘草酸和桂皮醛的提取率分别为5.65、2.52 mg/g。结论微波提取法效率较高,但微波功率和提取溶剂分别对不同极性成分的提取率和相对含有量会产生较大影响。因此,在微波提取中药复方或药对时,应关注其对化学成分的影响。
- 黄一可万敬员夏之宁
- 关键词：微波提取甘草酸桂皮醛
- 芍药苷减轻四氯化碳诱导的急性肝损伤被引量：9
- 2018年
- 为研究芍药苷对四氯化碳（CCl_4）诱导的急性肝损伤的保护作用及相关机制。将36只健康雄性C57BL/J小鼠随机分成6组：空白组,芍药苷对照组,CCl_4模型组（0.1%,20 mL/kg）,高、中、低剂量芍药苷＋CCl_4组（10 mg/kg,30 mg/kg,100 mg/kg）,每组6只。24 h后眼球取血收集血清,测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性。用苏木精-伊红（HE）染色,观察肝脏的组织学改变;试剂盒测定肝组织中SOD、GSH-PX、CAT的活性及MDA和GSH含量;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6含量;试剂盒检测小鼠肝组织中Caspase-3的活性;q RT-PCR检测肝组织中HO-1 mRNA的表达。实验发现PAE降低小鼠血清ALT、AST水平,改善肝脏的病理形态;芍药苷抑制CCl_4诱导氧化应激,升高肝组织HO-1 mRNA水平;降低TNF-α、IL-6含量;芍药苷减低肝组织中Caspase-3活性,减少肝细胞凋亡。由此可知,芍药苷可保护CCl_4诱导的急性肝细胞损伤,该保护作用可能与抑制脂质过氧化,减少促炎细胞因子产生,减少肝细胞凋亡,促进抗氧化蛋白表达有关。
- 郭心怡尹昕茹袁红梅万敬员
- 关键词：急性肝损伤四氯化碳血红素加氧酶-1芍药苷
- 虎杖苷对小鼠脓毒症模型ALT、AST、TNF-α及COX-2的影响被引量：13
- 2013年
- 目的研究虎杖苷对小鼠脓毒症致急性肝损伤的保护作用,并初步探讨其机制。方法采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)小鼠脓毒症模型,并设假手术对照组。在CLP手术前1h,采用不同剂量虎杖苷(50、100、300mg/kg)干预,随后每6h观察小鼠一般情况,24h后处死存活小鼠,收集血清和肝组织样本。分别采用比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;采用酶联免疫法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)含量;采用免疫印迹法检测肝组织环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达;并取部分肝组织进行病理组织学分析。结果 CLP后24h,小鼠死亡率高达50%,生化指标和肝脏病理显示病变明显,模型成功率达90%,相对于假手术组,血清ALT、AST活性、TNF-α水平和肝组织中COX-2蛋白表达显著升高(P<0.01);虎杖苷呈剂量依赖地改善脓毒症诱导的死亡率,抑制ALT、AST活性和TNF-α升高(P<0.05),降低肝组织中COX-2表达,减轻肝脏病理损伤。结论虎杖苷有效地保护脓毒症诱导的急性肝损伤,其作用机制可能通过抑制TNF-α生成和COX-2的表达。
- 李晓会吴孟娇张丽娜郑佳佳张力万敬员
- 关键词：虎杖苷盲肠结扎穿孔急性肝损伤环氧合酶-2
- 从白介素受体相关激酶反馈平衡调节与清热解毒中药抗脓毒症相关作用机制被引量：4
- 2019年
- 天然免疫TLR信号是机体防御病原体第一道防线,但过度活化失控导致脓毒症,因此,寻找其平衡的分子靶标和有效药物就显得尤其重要。白介素-1受体相关激酶(IRAKs)是TLR信号关键分子,它连接受体和下游转录因子,决定天然免疫的信号流向,影响其结局。研究发现,这些信号激酶可发生多态性表达,产生正性和负性的分子异构体,平衡机体防御和炎症。无疑,调控正负IRAK激酶平衡将成为防控脓毒症的新靶标。清热解毒中药具有免疫调节和抗炎活性,现代医学用分子生物学、病理学和免疫学的方法,从调控IRAK激酶信号中确证平衡天然免疫的内源性机制,阐明了清热解毒中药的物质基础和分子机制,为中药现代化提供了新的思路。
- 陈博万敬员
- 关键词：脓毒症炎症中医药清热解毒
- 羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用被引量：11
- 2008年
- 目的研究羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用及其初步机制。方法建立四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤模型,检测羟基积雪草苷(3、10、30 mg/kg)对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝组织一氧化氮(NO)的影响;Western-blotting检测肝组织中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达,并取部分肝组织进行HE染色,观察病理学改变。结果羟基积雪草苷明显降低急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性及肝组织中NO的量,抑制肝组织中iNOS、COX-2蛋白的表达,病理切片显示羟基积雪草苷组病变程度远较模型组为轻。结论羟基积雪草苷具有一定的肝保护作用,其机制可能与其抗炎作用有关。
- 李洪忠万敬员张力罗福玲章卓周岐新
- 关键词：羟基积雪草苷急性肝损伤一氧化氮环氧合酶2
- IRAK-M在TLRs信号转导中负性调节作用的研究进展被引量：7
- 2009年
- 白细胞介素1受体相关激酶(interleukin-1 receptor-associatd kinase,IRAK)家族被认为是TLR/IL-1R信号通路中重要的信号分子。迄今为止,已发现4个IRAK家族成员,其中IRAK-1和IRAK-4有激酶活性,IRAK-2和IRAK-M无激酶活性。最近的研究发现IRAK-M参与负性调控TLR信号通路和具有天然免疫的作用。本文就IRAK-M的结构特点及在TLR信号转导的分子机制和免疫耐受中的作用进行综述。
- 郑佳佳万敬员
- 关键词：负性调节
