龚坚
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 供职机构：湖北医药学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金湖北省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生机械工程更多>>
- 丁苯酞对脑低灌注老龄大鼠胆碱能神经功能的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察丁苯酞(NBP)对脑低灌注大鼠学习记忆的改善作用,探索其对胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响。方法永久性结扎老龄大鼠双侧颈总动脉3个月,制备脑低灌注模型。实验分4组:假手术组、模型组、NBP 30和120 mg/kg组。后两组连续给予NBP45 d后,用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习和记忆以及保存记忆的能力。同时,取皮层和海马,用生化法检测ChAT和AChE活力。结果水迷宫定位航行实验中,NBP可以显著缩短脑低灌注大鼠找到安全台的潜伏期。空间探索实验中,NBP明显增加脑低灌注大鼠在目标象限活动时间的百分比。同时,NBP可以显著增加脑低灌注大鼠皮层和海马ChAT活力,而对脑组织AChE的活力无明显影响。结论 NBP可以改善脑低灌注大鼠的学习记忆缺陷,其中通过增加了ChAT活力,改善胆碱能系统功能是其重要机制之一。
- 罗超苗亚玲赵万红龚坚李伏燕彭吉霞
- 关键词：丁苯酞胆碱乙酰基转移酶乙酰胆碱酯酶
- 顺铂与培美曲塞对肺癌A549及SPC-A-1细胞作用的研究
- 2013年
- 目的:研究顺铂(DDP)与培美曲塞对体外培养的人肺癌A549及SPC-A-1细胞增殖活力的影响。方法:分别用不同浓度的DDP(1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)作用细胞株A549及SPC-A-1细胞,DDP5μg/ml联合培美曲塞10mmol/L作用细胞株A549及SPC-A-1细胞;48h后用MTT法测细胞增殖,并按细胞的抑制率(100%)=(1-实验组吸光度/阳性对照组吸光度)×100%计算不同浓度DDP及DDP(5μg/ml)与培美曲塞10mmol/L联用对细胞的抑制率,比较细胞抑制率的差异。结果:DDP(5μg/ml)联合培美曲塞10mmol/L处理A549细胞、SPC-A-1细胞48h抑制率分别为(53.2200±0.0192)%、(73.7800±0.0171)%。DDP1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml处理A549细胞、SPC-A-1细胞48h抑制率逐渐增高,20μg/ml时最高,分别为(49.4300±0.0403)%、64.8700±0.0280)%。结论:DDP(1.25～20μg/ml)明显抑制2株细胞的增殖,作用呈现浓度依赖性。而DDP(5μg/ml)与培美曲塞10mmol/L联合对SPC-A-1细胞的增殖抑制更为明显。
- 王燕孙晓东王珺龚坚余明华
- 关键词：顺铂培美曲塞A549SPC-A-1
- 从分子水平理解基因的显性和隐性被引量：6
- 2011年
- 1显、隐性基因的提出
早在基因的本质认识之前,就提出了基因的显性和隐性概念,孟德尔在其豌豆杂交实验中提出遗传因子有显性因子和隐性因子,当二者共存于一个植株时,表现出显性性状,当两个因子均为显性因子时,也表现出显性性状,只有两个因子都为隐性因子时,才表现出隐性性状。
- 王燕阮绪芝孙晓东龚坚
- 关键词：分子水平基因显性
- 阻断Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖被引量：2
- 2012年
- 目的 Delta-like 4(DLL4)是Notch信号通路的配体之一,是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明DLL4的高表达与肺腺癌转移预后密切相关。该文旨在研究DLL4在A549细胞中的表达,以及DLL4基因表达对人A549细胞增殖与凋亡的影响。方法 (1)体外培养A549细胞,免疫细胞化学法检测DLL4在A549细胞中的表达及定位;(2)设计并化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lipofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染A549细胞,RT-PCR进行DLL4-mRNA定量,Western blot分别检测A549细胞DLL4蛋白的改变;(3)四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的存活和生长变化;(4)激光共聚焦显微镜检测Annexin V-FITC标记的A549细胞的细胞凋亡比率。结果 (1)A549细胞表达DLL4蛋白,且定位于胞浆中;(2)DLL4-mRNA和DLL4蛋白的表达在对照组与干扰组之间有显著差异(P<0.05);(3)MTT检测显示抑制DLL4表达对A549细胞的增殖有抑制作用,DLL4干扰组细胞增殖抑制率为43.85%,未处理组细胞增殖抑制率为23.81%;(4)抑制DLL4基因表达,A549细胞的凋亡比率明显升高,DLL4干扰组细胞凋亡率为(25.01±4.32)%,未处理组细胞凋亡率为(14.24±0.98)%。结论 DLL4在A549细胞表达。特异性阻断DLL4/Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 桑明王燕王珺孙晓东罗超龚坚彭新春余明华
- 关键词：DLL4RNA干扰A549细胞细胞增殖
- 两种人脐静脉内皮细胞培养方法的比较被引量：4
- 2013年
- 目的:用两种不同的方法培养人脐静脉内皮细胞,比较两种方法的优缺点。方法:(1)方法1,用0.125%胰酶加0.02%的EDTA消化液消化、方离脐静脉内皮细胞,用含20%的胎牛血清的DMEM完全培养液,于37℃、5%CO2条件下培养。(2)方法2,用胶原酶Ⅱ消化脐静脉内皮细胞,用含20%胎牛血清+细胞生长因子+明胶铺板,于37℃、5%CO2条件下培养。比较两种方法对细胞活力、培养细胞数量等方面的影响。结果:以改良方法培养的内皮细胞4h贴壁生长,细胞数量达到整瓶的80%～90%,48～72h生长最快,细胞融合,内皮细胞呈单层铺路石样外观。传统方法培养的内皮细胞24h后细胞数量只达到整瓶的20%～30%,细胞融合较慢。结论:用0.125%胰酶加0.02%的EDTA灌注脐静脉消化内皮细胞是获取内皮细胞的一种好方法,更加简便、经济,是建立稳定的人脐静脉内皮细胞分离和培养的好方法。
- 王燕王君龚坚王汉琴
- 关键词：人脐静脉内皮细胞消化液
- 丁苯酞对脑低灌注大鼠学习记忆的改善作用被引量：3
- 2011年
- 目的:观察丁苯酞(NBP)对脑低灌注大鼠学习记忆的改善作用,并探索其生化机制。方法:永久性结扎老龄大鼠双侧颈总动脉3个月,制备脑低灌注模型。实验分4组:假手术组、溶剂对照组、NBP30 mg.kg-1和120 mg.kg-1组。后2组连续给予NBP45 d后,用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆。同时,取脑组织,用生化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果:在水迷宫定位航行试验中,NBP可以显著缩短脑低灌注大鼠找到安全台的潜伏期。在空间探索试验中,NBP明显增加脑低灌注大鼠在目标象限活动时间的百分比。同时,NBP降低了大鼠脑组织代偿性增高的SOD活力和MDA水平。结论:NBP可以改善脑低灌注大鼠的学习记忆缺陷,其中减轻脑组织氧化应激损伤是重要机制。
- 罗超赵万红苗亚玲龚坚李伏燕彭吉霞
- 关键词：丁苯酞脑低灌注学习记忆超氧化物歧化酶丙二醛
- 激光扫描共聚焦显微镜在细胞凋亡检测中的应用被引量：1
- 2014年
- 激光扫描共聚焦显微镜是先进的图像分析仪器之一。本文主要介绍几种应用激光扫描共聚焦显微镜进行细胞凋亡的常用方法。
- 王珺谢玉波方娟龚坚
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜细胞凋亡
- hFAM92A1在人宫颈癌细胞不同周期时相的表达被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨h FAM92A1在人宫颈癌He La细胞不同周期时相的表达差异。方法:常规培养Hela细胞,应用血清饥饿法将He La细胞同步化于G1期,胸腺嘧啶核苷双阻断法同步化于S、G2期,秋水仙素阻断法同步化于M期,应用流式细胞术检测同步化效率,应用RT-PCR方法检测h FAM92A1在人宫颈癌He La细胞不同周期时相的表达水平。结果:流式细胞仪检测细胞同步化效率G1期为77.5%、S期为85.5%、G2期为61.9%、M期为44%;FAM92A1基因在各期均有表达,但存在差异,以S期表达最高。结论:FAM92A1基因在He La细胞不同周期时相的表达有较大差异。
- 方娟王珺龚坚王燕阮绪芝
- 关键词：基因子宫颈细胞周期
