黄畅宇
- 作品数：6 被引量：33H指数：3
- 供职机构：湖南省人民医院更多>>
- 发文基金：湖南省医药卫生科研计划课题湖南省科技计划项目湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转录因子Klf2和Nrf2/Bach1调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在气道上皮细胞中的作用被引量：3
- 2012年
- 目的通过研究锌指Krüppel样转录因子2(Klf2)及红系衍生核因子相关因子2(Nrf2)/BTB-CNC异体同源体1(Bach1)在经香烟烟雾提取物(CSE)刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达,了解其感受氧化应激对靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)的调控作用。方法采用酶消化法提取大鼠原代气管-支气管上皮细胞,并用10%CSE干预细胞6 h,收集细胞,双酶法检测γ-GCS活性;通过免疫细胞化学法观察Nrf2/Bach1的核转位;采用Western blot和RT-PCR技术研究细胞中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS的蛋白及mRNA表达。结果大鼠气管-支气管上皮细胞经CSE诱导后其γ-GCS活性明显增高。免疫细胞化学结果显示Nrf2经CSE刺激后出现由核外向核内的转位,Bach1经CSE刺激后出现由核内向核外的转位。Western blot结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白水平较对照组显著升高(P<0.05);RT-PCR结果显示CSE处理组中Klf2、Nrf2、Bach1、γ-GCS mRNA水平较对照组显著升高(P<0.05)。直线相关分析表明γ-GCS蛋白表达与Klf2、Nrf2、Bach1呈正相关(P<0.05)。结论 CSE可能通过转录因子Klf2、Nrf2、Bach1调节γ-GCS的表达。
- 黄畅宇戴爱国
- 关键词：香烟烟雾提取物Γ-谷氨酰半胱氨酸合酶
- 应用二代测序技术诊断肺结核病及肺非结核分枝杆菌病各一例并文献复习被引量：21
- 2019年
- 目的利用二代基因测序(NGS)技术对2例可疑肺结核病及肺非结核分枝杆菌病的肺部感染患者进行明确诊断,同时进行文献复习,探讨NGS技术在病原微生物感染诊断方面的价值。方法收集2例拟诊肺部感染待查患者的支气管肺泡灌洗液,采用NGS技术检测致病病原体基因。以"二代测序"或"NGS"和"微生物"或"感染"为关键词,通过万方和中国知网数据库对2000年1月至2018年1月的中文文献进行检索,以"NGS,infectious diseases,China"为关键词,通过PubMed数据库检索2018年1月前的英文文献,结合文献进行分析。结果通过NGS分别检测到结核分枝杆菌1例及非结核分枝杆菌1例。共检索到中文文献221篇,排除学位论文、会议论文和报纸,最终保留"感染性疾病及传染病"和"呼吸系统疾病"学科分组中的期刊报道10篇,英文文献3篇。报道中均提出NGS对相关病原体的诊断与研究作用。结论 NGS有望实现精准医疗的目的,如感染性疾病的早期诊断、控制传播、精准治疗、良好预后等。
- 黄畅宇胡瑞成张有志李圣青
- 关键词：结核分枝杆菌非结核分枝杆菌
- 锌指Krüppel样转录因子2对慢性阻塞性肺疾病支气管上皮细胞中γ谷氨酰半胱氨酸合成酶的作用被引量：6
- 2017年
- 目的探讨锌指Krüppel样转录因子2（KLF2）对慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）支气管上皮细胞中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的调控作用。方法（1）临床试验：收集湖南省肿瘤医院胸外科2008年12月—2009年12月肺癌伴或不伴慢阻肺肺叶切除患者临床肺组织标本，分为慢阻肺组和对照组，应用原位杂交及免疫组化检测两组患者肺组织中KLF2、γ-GCS mRNA及蛋白的表达情况；并对KLF2 mRNA及蛋白与γ-GCS mRNA及蛋白，KLF2及γ-GCS蛋白与吸烟指数、第1秒用力呼气容积（FEV1）占预计值百分比（FEV1 %）、FEV1与用力肺活量（FVC）的比值（FEV1 /FVC）进行相关分析。（2）动物实验：提取大鼠原代支气管上皮细胞，加入10%烟草烟雾提取物（TSE）培养6 h后，用酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞谷胱甘肽（GSH）含量；将KLF2的特异性抑制剂用脂质体转染至细胞中抑制KLF2蛋白表达；再分为KB组（不予任何处理的空白对照组）、KB＋TSE组（加入TSE处理）、NC组（转染miRNA的对照组）、NC＋TSE组（miRNA转染和TSE处理）、92a组（转染KLF2抑制剂）、92a＋TSE组（KLF2抑制剂转染和TSE处理），用逆转录-PCR、Western印迹法观察各组细胞中KLF2、γ-GCS的mRNA及蛋白质表达变化。结果（1）临床试验：慢阻肺组肺组织中KLF2mRNA、蛋白和γ-GCS mRNA、蛋白呈强阳性表达，均显著高于对照组（0.32±0.04比0.19±0.03、0.35±0.05比0.22±0.03和0.28±0.03比0.16±0.03、0.31±0.05比0.21±0.03，均P〈0.01），且两者表达部位一致；KLF2蛋白与γ-GCS mRNA及蛋白表达均呈正相关（r＝0.705、0.722，均P〈0.01），KLF2及γ-GCS蛋白与吸烟指数、FEV1 %、FEV1/FVC均呈正相关（r＝0.552、0.728、0.670及r＝0.631、0.727、0.657，均P〈0.01）。（2）动物实验：大鼠支气管上皮细胞中GSH含量KB＋TSE组显著高于KB组[（28.05±2.04）比（7.27±0.33） nmol/mg，P〈0.01]; KLF2 mR
- 李洁戴爱国黄畅宇胡瑞成
- 关键词：慢性阻塞性支气管上皮细胞
- 香烟烟雾对细胞生物学功能的影响被引量：3
- 2012年
- 香烟烟雾中含有大量的化学有毒物质，其颗粒物和挥发性有机物可不同程度地造成炎症的产生、细胞毒性增加、染色体损伤和DNA链断裂，从而引起慢性阻塞性肺疾病、肺癌等疾病的发牛。氧化应激机制是目前研究的热点。本文主要从吸烟与呼吸系统疾病、香烟烟雾对细胞的损伤机制、香烟烟雾对气道上皮细胞的作用三大方面对香烟烟雾对细胞生物学功能的影响进行综述，有助于呼吸道疾病的诊断和治疗。
- 黄畅宇戴爱国
- 关键词：细胞氧化应激生物学功能
- KLF2调控Nrf2//Bach1在CSE诱导的大鼠气道上皮细胞氧化与抗氧化机制中的作用
- 【目的】研究Klf2及Nrf2//Bach1在经CSE刺激的大鼠气道上皮细胞中的表达，明确其感受氧化应激对靶基因γ-GCS的调控作用；探讨CSE对气道上皮细胞凋亡的影响，及其与氧化抗氧化反应之间的关系；观察KLF2质粒转...
- 黄畅宇
- 关键词：香烟烟雾提取物Γ-谷氨酰半胱氨酸合酶
- 文献传递
- KLF2对吸烟相关大鼠气道上皮细胞氧化应激反应的调控被引量：1
- 2018年
- 目的 通过研究转录因子锌指Krüppel样转录因子2 (KLF2)及红系衍生核因子相关因子2 (Nrf2)在吸烟相关大鼠气道上皮细胞中的表达情况,明确其感受氧化应激对靶基因γ-谷氨酰半胱氨酸合酶 (γ-GCS-HS)的调控作用;观察 KLF2质粒转染细胞后分别对 Nrf2和γ-GCS-HS表达水平的影响。方法 将22只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和慢性阻塞性肺疾病 (COPD)模型组,每组11只,采用每日熏香烟和2次气管内滴入脂多糖 (LPS)复制COPD大鼠模型。逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)检测肺组织 KLF2、Nrf2、γ-GCS-HSmRNA 的表达;蛋白质免疫印迹(Westernblot)分别检测KLF2、Nrf2、γ-GCS-HS蛋白表达水平。给予KLF2质粒转染细胞使基因过表达,分为4组:空白质粒组、空白质粒+香烟烟雾提取物 (CSE)组、KLF2质粒组、KLF2质粒+CSE组,采用RT-PCR、Westernblot观察细胞中 KLF2、Nrf2、γ-GCS-HS的 mRNA及蛋白表达变化。结果 大鼠肺功能指标 [第0 3秒用力呼气容积 (FEV0 3)、FEV0 3/用力肺活量、呼气峰流速]在COPD组较对照组明显降低 (P 值均<0.01),COPD组大鼠肺部病理改变符合COPD的形态学改变。RT-PCR及 Westernblot结果显示:COPD组 KLF2、γ-GCS-HSmRNA水平均显著高于对照组 (P值均<0.05),但2组Nrf2mRNA水平比较,差异无统计学意义。Westernblot结果显示:COPD组KLF2、Nrf2及γ-GCS-HS蛋白质的相对表达量均明显高于对照组 (P 值均<0.05)。KLF2过表达质粒成功转染细胞后,大鼠气道上皮细胞中Nrf2、γ-GCS-HSmRNA及蛋白质表达水平均显著高于转染空白质粒组 (P 值均<0.01)。空白质粒+CSE组中Nrf2、γ-GCS-HSmRNA与蛋白质水平均明显高于空白质粒组 (P 值均<0.05)。KLF2质粒+CSE组中Nrf2、γ-GCSmRNA与蛋白质水平均明显高于KLF2质粒组 (P 值均<0.05)。KLF2质粒+CSE组中 Nrf2、γ-GCS-HSmRNA与蛋白质水平均明显高于空白质粒+CSE组 (P 值均<0.05)。结论 吸烟可以诱发氧化应激反应,KLF2参与氧化�
- 黄畅宇戴爱国胡瑞成
- 关键词：香烟烟雾提取物
