鲍永耀
- 作品数：31 被引量：134H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- Bcl-2表达与小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的关系被引量：2
- 2000年
- 利用免疫荧光技术和激光扫描共聚焦显微镜（共焦镜）技术检测了地塞米松介导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡时凋亡抑制基因 Ｂｃｌ－２表达的时空变化。结果显示，免疫荧光技术和共焦镜技术可对细胞内的蛋白表达作定量和定位检测，凋亡巨噬细胞内 Ｂｃｌ－２ 逐渐减少；核中 Ｂｃｌ－２相对量逐渐减少，胞浆中 Ｂｃｌ－２相对量逐渐增多；Ｂｃｌ－２表达和地塞米松介导的巨噬细胞凋亡是极显著负相关。结果表明，地塞米松介导巨噬细胞凋亡时，凋亡抑制基因Ｂｃｌ－２表达发生时空改变，Ｂｃｌ－２表达极显著抑制地塞米松介导巨噬细胞凋亡。免疫荧光技术结合共焦镜技术是一种理想的蛋白表达检测方法。
- 乔东访黄行许马晓冬鲍永耀朴英杰
- 关键词：巨噬细胞细胞凋亡BCL-2
- 共聚焦显微镜及其参数选择被引量：8
- 1997年
- 本文介绍了激光扫描共聚焦显微镜的成像原理，分析了该仪器的侧向分辨率和轴向分辨率与物镜及有关量的关系。针对＊CAS570对有关光学、机械、电子等方面的学数选择进行了详细的讨论，并给出各参数之间的关系。
- 雷国华鲍永耀朴英杰黄辉
- 关键词：共聚焦显微镜
- 大剂量地塞米松快速高效诱导巨噬细胞凋亡被引量：4
- 2000年
- 运用透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、原位末端标记法 (TUNEL)染色等技术 ,检测了大剂量地塞米松处理小鼠腹腔巨噬细胞的各种变化 .结果显示 ,大剂量地塞米松处理的巨噬细胞发生胞体皱缩、染色质凝聚、胞质浓缩 ;TUNEL染色呈阳性 ;0 5h后DNA凝胶电泳即呈梯状条带 ;流式细胞术作周期分析出现凋亡峰等明显的凋亡特征 .并且随处理时间延长凋亡率升高 .结果表明 ,大剂量地塞米松快速。
- 黄行许陈练波鲍永耀朴英杰黄有国
- 关键词：腹腔巨噬细胞细胞凋亡地塞米松大剂量
- 人胚腱细胞转化生长因子-β受体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ密度分析被引量：1
- 2001年
- 目的 观察转化生长因子-β受体I 、II和III （TβRI 、II 、III）在体外培养的肌腱细胞中的表达情况，探讨TGF-β1对细胞周期及增殖指数PI值的影响。方法 采用免疫组化法鉴定受体的表达，流式细胞仪法分析了同一细胞周期不同亚时相的TβRI 、II 、III受体数目差别并观察了不同浓度的TGF-β1对细胞周期及增殖指数PI值(S+G2M)的影响。结果 TβRI 、II 、III在体外培养的肌腱细胞中均有表达，TβR I 、II 、III平均荧光强度在G1期分别是7.93±0.20、8.76±0.16、8.46±0.14，而在G2M期分别是17.7±0.36、18.9±0.35、18.3±0.67。细胞周期分析表明：TGF-β1作用下，G0/G1%呈降低趋势，而S%呈升高趋势，反映细胞增殖活力的PI值也呈升高趋势，尤以5 ng/ml 以上浓度时为显著(P<0.05)。结论 在肌腱细胞周期的不同亚时相，肌腱细胞TβRI 、II 、III各自密度均具显著差别（P<0.01），TGF-β1能促进腱细胞增殖。TGF-β受体系统不同亚时相的差别可能是其调控细胞增殖活动的生物学基础。
- 王尉王子灿鲍永耀朴英杰
- 关键词：肌腱细胞转化生长因子-Β受体流式细胞仪细胞周期
- 荧光定量测量方法在共聚焦显微镜上的应用被引量：20
- 1998年
- 根据共聚焦显微镜ACAS570测量原理，结合巨噬细胞研究，认定性和定量方面，叙述了通过荧光图像测量细胞胞内游离Ca2＋、胞浆pH、细胞膜电位、线粒体膜电位、细胞膜磷脂和受体流动性、细胞内蛋白的方法，给出了用于定量测量的荧光探针工作曲线的制定方法和不同实验中选择荧光探针所需注意的问题。
- 雷国华鲍永耀周俊岭朴英杰吴建春
- 关键词：共聚焦显微镜荧光探针巨噬细胞
- 虎杖甙可引起腹腔巨噬细胞膜部分去极化被引量：4
- 1998年
- 应用亲脂性阴离子荧光染料DiBAC4（3）标记小鼠腹腔巨噬细胞，以粘附式细胞仪观察虎杖甙对腹腔巨噬细胞膜电位的影响。结果：10mg／L虎杖甙并不能引起细胞内荧光强度的明显改变，而50mg／L及100mg／L虎杖甙可使细胞内荧光强度明显增强。结论：一定浓度的虎杖甙能引起腹腔巨噬细胞细胞荧光值升高即膜的部分去极化。
- 李建明金丽娟鲍永耀
- 关键词：虎杖甙腹腔巨噬细胞去极化内毒素休克
- 白细胞介素-1β对骨髓基质细胞膜电位及细胞内Ca^(2+)和pH的影响
- 1999年
- 采用荧光染料 Ｄｉ Ｂ Ａ Ｃ４（３）， Ｆｌｕｏ３／ Ａ Ｍ 和 Ｓ Ｎ Ａ Ｌ Ｆ Ｃａｌｃｅｉｎ／ Ａ Ｍ 分别标记小鼠骨髓基质细胞（ Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ），在激光扫描共聚焦显微镜下直接监测重组人白细胞介素１β（ Ｉ Ｌ１β）刺激后细胞膜电位，细胞内游离 Ｃａ２＋ 浓度和胞浆 ｐ Ｈ 的实时动态变化． 结果发现： Ｉ Ｌ１β加入测定体系后浓度依赖性地引起 Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ 膜电位的迅速改变． 低浓度时发生去极化反应，高浓度时发生超极化反应． 非受体方式作用的 Ｉ Ｌ１β肽段 １６３１７１ 对膜电位无影响． Ｉ Ｌ１β不影响细胞内 Ｃａ２＋ 的浓度和胞浆ｐ Ｈ． 研究表明膜电位的变化为 Ｉ Ｌ１ 受体后早期事件，它与细胞内 Ｃａ２＋的浓度和胞浆 ｐ Ｈ 的调节无关．
- 陈娜娜吴曙光郭丹鲍永耀
- 关键词：白细胞介素-1骨髓基质细胞膜电位
- 荧光探针Fluo-3/AM和FuraRed测量单细胞中比率钙被引量：6
- 1999年
- 应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜（laserscanningconfocalmicroscope，LSCM简称共焦显微镜）和钙离子指示剂Fluo－3／AM、FuraRed荧光探剂双标记技术，测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃，Fluo－3／AM浓度10μmol／L，FuraRed浓度10μmol／L的条件下，昆明小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获良好的标记效果。用比率探针测量细胞内Ca^2＋的动态变化，使Ca^2＋的定性定量测定不受染料浓度、细胞大小、照射光强度以及一定程度的光漂白和染料泄漏等因素的影响，提供了一种准确定性定量细胞内Ca^2＋的实时、动态、原位变化的新方法。
- 马晓冬朱晓亮赵清张瑾张飒雷国华黄行许鲍永耀
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜荧光探针
- 利用粘附式细胞仪测定培养巨噬细胞内pH值
- 1997年
- 用ｐＨ值敏感荧光探针Ｓｎａｆｌｃａｌｃｅｉｎ－ＡＭ标记体外培养４８小时的小鼠腹腔巨噬细胞，５７０型粘附式细胞仪观察巨噬细胞在对刀豆素Ａ进行受体介导内吞过程中细胞内ｐＨ值的变化。结果显示，开始内吞后细胞内ｐＨ值即降低，内吞进行到第５分钟细胞内ｐＨ值降到最低，在此后的６分钟内均维持于这一较低水平。本法灵敏度高，简便快捷，适用范围广，可无损伤观察活细胞或细胞器ｐＨ值的变化。
- 张薇雷国华鲍永耀
- 关键词：粘附式细胞仪巨噬细胞PH值
- 小鼠腹腔巨噬细胞凋亡时线粒体的改变及其调控被引量：3
- 2001年
- 目的 研究小鼠腹腔巨噬细胞凋亡过程中线粒体和磷酸烟酰胺腺嘌呤 (NADPH)氧化酶活性的变化以及信使分子对线粒体膜电位、细胞内活性氧 (reactive oxygen species,ROS)和凋亡的影响。 方法 激光扫描共聚焦显微术、流式细胞术和荧光标记技术等。 结果 1.地塞米松诱导巨噬细胞快速凋亡 ;2 .线粒体膜电位快速去极化 ,NADPH氧化酶活性剧降 ,ROS快速减少 ,ROS清除剂促进凋亡 ;3.蛋白激酶 C(protein kinase C,PKC)促进凋亡、ROS急剧减少、线粒体膜去极化 ;环腺苷酸 (c AMP)抑制凋亡、ROS急剧减少、线粒体膜去极化 ;环鸟苷酸(c GMP)、酪氨酸蛋白激酶 (TPK)略抑制凋亡 ,不影响 ROS变化 ,但影响线粒体膜去极化。 结论 1.地塞米松处理使线粒体内 NADPH氧化酶活性剧降 ,生成 ROS迅速减少从而促进巨噬细胞凋亡 ;2 .信使分子影响线粒体生成ROS的变化以及线粒体膜去极化从而影响巨噬细胞凋亡。提示线粒体变化 ,尤其是 ROS和膜电位的变化影响巨噬细胞凋亡。
- 黄行许乔东访马晓冬鲍永耀朴英杰
- 关键词：线粒体活性氧膜电位凋亡细胞小鼠
