高鸽
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人酪氨酸酶相关蛋白1(TRP1)编码基因反义核酸对人黑素细胞及恶性黑素瘤细胞影响的研究
- 目的:获得TRP1编码基因序列,构建其反义真核表达载体,并用反义重组载体转染TRP1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,以进一步研究其在黑素细胞及恶性黑素瘤细胞中的生物学功能。方法:按文献报道的TRP1核苷酸序列设计合成P...
- 李春英高天文李廷慧孙东杰李强高鸽刘玉峰
- 关键词：反义RNA恶性黑素瘤
- 文献传递
- TRP-1编码基因反义核酸对黑素细胞增殖及功能的影响被引量：9
- 2004年
- 目的构建酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)反义真核表达载体并转染TRP-1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,进一步研究其对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞增殖及功能的影响。方法将TRP-1基因反向亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,转染黑素细胞及恶性黑素瘤细胞。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRP-1mRNA水平的变化,免疫印迹法检测TRP-1蛋白水平的改变。通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,并用L-多巴测定酪氨酸酶活性的改变。结果成功构建重组反义表达载体pcDNA3.1/TRP-1(-),转染细胞稳定表达TRP-1反义核酸。RT-PCR提示TRP-1mRNA水平显著下降,免疫印迹提示其TRP-1蛋白表达水平降低。流式细胞检测表明反义TRP-1转染细胞发生细胞周期G1期阻滞。转染组黑素细胞及黑素瘤细胞酪氨酸酶活性抑制率分别达46%和54%。结论TRP-1在黑素细胞及黑素瘤细胞的增殖及功能方面发挥重要作用,TRP-1反义核酸转染细胞细胞周期受到阻滞,酪氨酸酶活性明显降低。
- 李春英高天文李廷慧孙东杰李强高鸽刘玉峰
- 关键词：反义核酸细胞增殖细胞功能黑色素瘤黑素细胞
- TRP-1编码基因反义核酸对良恶性黑素细胞凋亡的影响
- 2004年
- 目的 观察TRP 1反义核酸对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞凋亡的影响。方法 将TRP 1反义核酸真核表达载体转染至黑素细胞及恶性黑素瘤细胞 ,以透射电镜及流式细胞仪分别观察细胞的凋亡情况。结果 电镜下可见各期凋亡细胞及凋亡小体 ;流式细胞仪检测表明TRP 1反义核酸转染黑素细胞及空载体转染对照组黑素细胞的凋亡率分别为 2 4.4%及 1.2 % ,TRP 1反义核酸转染的恶性黑素瘤细胞及空载体转染对照组恶性黑素瘤细胞的凋亡率分别为7.0 %及 2 .2 %。结论 TRP 1基因在维持良、恶性黑素细胞生长方面发挥重要作用 ,其反义核酸能明显促进良恶性黑素细胞的凋亡。
- 李春英高天文曹云新刘健孙东杰李强高鸽刘玉峰
- 关键词：反义核酸恶性黑素瘤肿瘤细胞细胞凋亡
- TRP-1反义核酸转染黑素细胞 黑素瘤细胞的光镜及电镜观察
- 2005年
- 目的 观察TRP 1反义核酸真核表达载体转染的黑素细胞及黑素瘤细胞形态学改变, 探讨TRP 1功能。方法 将TRP 1反义核酸真核表达载体转染黑素细胞及黑素瘤细胞,以倒置光学显微镜及透射电镜分别观察细胞显微结构及超微结构的变化。结果 光镜下可见TRP 1反义核酸转染的黑素细胞及黑素瘤细胞树突变短粗,细胞胞体增大,呈上皮样细胞改变;电镜下可见线粒体变大,电子密度降低,溶酶体、脂滴、糖原颗粒增多,细胞核肿胀及凋亡细胞。结论 TRP 1在黑素细胞及黑素瘤细胞形态学改变中发挥重要作用,本研究为阐明TRP 1基因的功能提供较为全面的形态学证据。
- 李春英高天文王刚刘健孙东杰李强卢涛高鸽刘玉峰
- 关键词：反义核酸恶性黑素瘤黑素细胞
