高继业
- 作品数：32 被引量：80H指数：6
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- 相关领域：农业科学医药卫生文化科学生物学更多>>
- 鸭疫里默氏菌生长凝集-解凝集生长(GADAG)现象及超微形态观察
- 微量凝集试验测定抗体效价，选择2，3，4，6和81og2效价的血清各1份，无菌检验合格，按照1：100比例加入LB中，接种RA AF株细菌，37℃培养观察。结果是，4-81og2效价的血清各组于培养3h后出现凝集块，随时...
- 黄伟高继业崔兆连李莹莹王振兴谢立飞
- 关键词：鸭疫生长发育血清抗体
- 文献传递
- 猪源ETEC的黏附素基因克隆与原核表达被引量：1
- 2012年
- [目的]克服传统方法制备黏附素抗原的缺点。[方法]应用PCR对猪源性产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)的黏附素F4、F5和F6的质粒中扩增出faeG、fanC和fasG基因片段,克隆测序并与pET 32a(+)构建重组表达载体。将重组表达载体转化E.coli表达菌株BL21(DE3),并分析其免疫原性。[结果]重组表达载体经IPTG诱导获得高效表达。血凝抑制试验表明,鼠抗血清能抑制标准的ETEC强毒株凝集红细胞,抑制效价在1∶128以上。这说明克隆表达的猪源ETEC黏附素蛋白具有良好的免疫原性。[结论]该研究可为进一步开发抗体制剂奠定基础。
- 徐刚高继业郎静宇唐妤李阁李继祥
- 关键词：产肠毒素性大肠杆菌黏附素原核表达免疫原性
- 鸭疫里默氏杆菌不同分离株生化特性及胞外蛋白酶的检测
- 2009年
- 研究测定了29株鸭疫里默氏杆菌不同分离株的生化指标,并采用底物平板法、底物-PAGE法检测了鸭疫里默氏杆菌胞外蛋白酶的产生情况。结果显示,所有分离株接触酶阳性,硝酸盐还原试验、M.R和V.P试验、尿素酶、精氨酸酶阴性,大部分菌株不发酵碳水化合物,能缓慢液化明胶,明胶液化阳性率为89.7%(26/29)。底物平板法和底物-PAGE法检测发现,89.7%(26/29)的鸭疫里默氏杆菌分离株能产生降解明胶和脱脂奶蛋白的胞外蛋白酶,且该酶类活性可被EDTA抑制。
- 唐妤李继祥高继业丁孟建汪敏
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌生化特性胞外蛋白酶
- 鸭肝炎病毒CQ株基因组5'端非编码区的克隆与测序分析
- 2014年
- 鸭肝炎（duckheptitis，DH）是雏鸭的一种急性、高度接触性、致死性传染病，其病原为鸭肝炎病毒（Duckhepatitisvirus，DnV）。传统分类法将DHV分为3种血清型，即血清I型、Ⅱ型、Ⅲ型，其中血清I型属于小RNA病毒科，而血清Ⅱ型、Ⅲ型均属于星状病毒科，因此有学者将DHV分为血清I型、台湾新型和韩国新型，分别对应于基因A型、B型和C型。
- 高继业江海海汪军卿陈苏鸿黄伟谢立飞
- 关键词：鸭肝炎病毒测序分析非编码区小RNA病毒血清型DHV
- 鸭疫里默氏杆菌三磷酸甘油醛脱氢酶的鉴定及其分子特征分析被引量：1
- 2015年
- 为探讨鸭疫里默氏杆菌(R.anatipestifer)致病的分子机制,检测了血清Ⅰ、Ⅱ型分离菌株CZ2、AF菌体细胞表面蛋白及分泌蛋白的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性,对gap基因进行PCR检测、克隆测序和生物信息学分析,并以抗重组GAPDH小鼠Ig G为一抗对GAPDH的分布进行免疫印迹分析。结果显示,R.anatipestifer CZ2、AF株菌体细胞表面及细胞上清液蛋白能将3-磷酸甘油醛转化为1,3-二磷酸甘油酸,具有GAPDH活性;编码基因开放阅读框大小为1 002 bp,编码334个氨基酸,理论相对分子质量36 700;R.anatipestifer的GAPDH含有NAD+结合区和活性催化区2个结构域,不含信号肽序列或疏水区,与肠溶血性大肠杆菌等病原微生物的GAPDH处于同一分支,属Ⅰ类GAPDH。结果证明,R.anatipestifer CZ2、AF株具有胞外分泌的GAPDH,可能在其致病过程中发挥重要作用。
- 高继业杨致邦黄伟黎容红黄静杨利
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌胞外蛋白
- 脓肿分枝杆菌耐利福平机制的研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨脓肿分枝杆菌耐利福平的机制。方法采用棋盘微量稀释法,分别测定利福平在加入不同浓度的改变细胞壁通透性的试剂和主动外排泵抑制剂时对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度。通过利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度的变化情况来分析细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平机制中的作用。结果随着TWEEN-80、Trixon X-100、甲苯、乙醚、CCCP、利血平和泮托拉唑浓度的增加,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度逐渐降低。对于TWEEN-80、Trixon X-100、CCCP和泮托拉唑,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度由512μg/mL降至小于32μg/mL,0.1%的TWEEN-80、0.006 25%的Trixon X-100、0.1μg/mL的CCCP和32μg/mL的泮托拉唑为最适浓度;对于甲苯、乙醚和利血平,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度由512μg/mL降至64μg/mL,0.25%的甲苯、0.25%的乙醚和8μg/mL的利血平为最适浓度。它们均能促进利福平对脓肿分枝杆菌的抑菌作用。结论细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平的机制中有重要作用。
- 范贵荣杨致邦黄进高继业
- 关键词：脓肿分枝杆菌利福平主动外排
- 屠宰场生鸡肉肠炎沙门氏菌的污染途径被引量：7
- 2010年
- 目的:研究屠宰场生鸡肉肠炎沙门氏菌的主要污染途径。方法:以屠宰场生鸡肉样品为研究对象,在利用多聚酶链反应(PCR)检测肠炎沙门氏菌污染的基础上,通过流行病学的方法研究生鸡肉污染与肉鸡感染的关系。结果:屠宰场生鸡肉样品肠炎沙门氏菌污染阳性率为9.03%(26/288),样品污染与样品来源屠宰场间无统计学联系,但与养殖场的肉鸡感染肠炎沙门氏菌有联系;养殖场肉鸡感染肠炎沙门氏菌与生鸡肉污染有正的统计学联系(相对危险性=18.5);肉鸡实验性感染肠炎沙门氏菌后的带菌时间可达42d,排菌达56d以上。结论:屠宰场生鸡肉肠炎沙门氏菌的污染途径主要为内源性污染。
- 李继祥高继业唐妤丁孟建朱周福
- 关键词：肠炎沙门氏菌污染途径
- 肉鸡源肠炎沙门氏菌的分离与鉴定及生物学特性观察被引量：24
- 2009年
- 自2007年9月以来,重庆某肉鸡养殖场的15~30日龄肉鸡流行一种以纤维素渗出性心包炎、气囊炎和肝周炎为主要特征的疾病。为探索该病病因及制定有效防治措施,笔者对其病原菌进行了分离鉴定及生物学特性观察。利用SS营养琼脂平板分离,经生化及PCR鉴定出26株肠炎沙门氏菌。分离菌株能将试验鸡、鸭及小鼠致死,并能复制出与临床表现一致的病例。药敏试验结果显示,26株分离菌对阿莫西林、氧氟沙星等常用抗菌药物广泛耐药。以CQ0709株制备灭活菌苗免疫5日龄鸡后15 d,及12日龄注射特异性蛋黄抗体后24 h对人工感染均有很好的保护力。以上结果表明,耐药性肠炎沙门氏菌是危害重庆某肉鸡养殖场肉鸡的病原。
- 丁孟建高继业唐妤汪敏李继祥
- 关键词：肉鸡肠炎沙门氏菌药敏试验PCR
- 鸭疫里默氏杆菌培养滤液对鸭胚成纤维细胞形态的影响被引量：6
- 2008年
- 为探索鸭疫里默氏杆菌的致病机制,研究了鸭疫里默氏杆菌培养滤液对鸭胚成纤维细胞形态的影响。结果显示,鸭疫里默氏杆菌AF株的培养滤液能使鸭胚成纤维细胞形态发生变化,表现为细胞膜和细胞质逐渐丢失、核浓缩等;90%(27/30)的鸭疫里默氏杆菌临床分离菌株能液化明胶,具有致病性,培养滤液具有改变鸭胚成纤维细胞形态的生物学活性;10%(3/30)的菌株不液化明胶,无致病性,培养滤液无改变鸭胚成纤维细胞形态的生物学活性;经硫酸铵盐析、阴离子交换、疏水和凝胶过滤层析,从AF株培养滤液中分离获得分子质量约为55 ku、能水解明胶及改变细胞形态的活性蛋白质。证实,降解明胶的蛋白水解酶是鸭疫里默氏杆菌培养滤液影响鸭胚成纤维细胞形态的活性物质,可能是细菌的毒力因子之一。
- 李继祥唐妤黄承洪赵洁高继业丁孟建汪敏
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌培养滤液形态学鸭胚成纤维细胞
- 鸭疫里氏杆菌形态及超微结构与外膜蛋白在抗血清诱导下的改变被引量：1
- 2013年
- 为研究鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer)感染康复鸭抗血清的体外抗菌活性,将血清2型R.anatipestifer AF株接种于含抗血清的TSB培养基并培养10h,在电子显微镜下观察其细胞形态和超微结构的变化,并分别采用SDS-PAGE和RT-PCR技术对其OMPs成分和OmpA表达水平进行分析。结果显示,R.anatipestifer菌体细胞由杆状变为中部有环形凹陷的球状,活菌细胞胞内及胞间有大量外膜泡,且部分细胞胞质内及胞内膜泡边缘分布有电子密度较高的稠密小体;另外,菌体细胞的OMPs较阴性对照组和空白对照组缺少6条蛋白多肽,分子质量大小分别为33、36、44、50、55和65ku,且OmpA的表达量显著下降(P<0.01)。研究结果证明,R.anatipestifer在中部及端部存在3个潜在的分裂位点,抗血清能诱导分裂位点发生改变并抑制OmpA的表达,致使其形态由杆状变为球状。
- 高继业崔兆莲黄伟杨致邦王振兴温亚兰范贵荣
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌超微结构外膜蛋白
