高志斌
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 供职机构：四川大学华西公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 雌马酚对体外培养小鼠睾丸3β-HSD、P450Scc和Vimentin表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨睾丸体外培养模型下雌马酚(Equol)暴露对乳鼠睾丸组织结构、睾酮合成相关酶和波形蛋白(Vimentin)的mRNA及蛋白表达影响。方法用浸浴式通气旋转装置体外培养小鼠睾丸组织。实验随机分为DMSO溶剂对照组和4个Equol剂量组(终浓度为0.01、0.10、1.00、10.00μmol/L),培养72h。HE染色观察睾丸组织病理形态学变化;实时荧光定量PCR检测睾酮合成相关基因及Vimentin表达水平;免疫组化法检测睾丸组织相关蛋白表达。结果 HE染色结果显示经Equol处理的睾丸组织未观察到明显病理学变化。实时荧光定量PCR结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,Equol各剂量组3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450Scc)、Vimentin mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,3β-HSD、P450Scc、Vimentin的表达在Equol 0.10μmol/L剂量组上调,10.00μmol/L剂量组下调。结论 Equol可影响体外培养的小鼠睾丸3β-HSD、P450Scc、Vimentin表达,对睾丸生理功能可能存在潜在的不利影响。
- 钟灵毓朱彦锋徐华高志斌李敏李云
- 关键词：雌马酚器官培养乳鼠睾丸
- 小鼠睾丸体外培养模型研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对睾酮合成及机制的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨睾丸体外培养模型下邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响。方法用浸浴式一次性通气旋转装置体外培养小鼠睾丸组织。实验分为二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组和4个DEHP剂量染毒组(终浓度0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)。分别培养24、48、72h,每24h通气一次。放射免疫法测定收集培养基中睾酮水平;Elisa法测定收集培养基中抑制素基因β_B基因(INHBβ)水平;实时荧光定量(QT)-PCR检测睾丸组织相关基因表达水平;HE染色观察睾丸组织病理学变化;免疫组化法检测睾丸组织相关蛋白表达。结果与DMSO溶剂对照组相比,DEHP一定浓度范围内,可使睾酮合成增加,但在DEHP100.0μmol/L染毒48、72h,睾酮合成开始减少。Elisa测定INHBβ在DEHP 0.1μmol/L、1.0μmol/L染毒组合成增加,从DEHP 10.0μmol/L开始合成减少。QT-PCR检测结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)、抗细胞色素P450 17α羟化酶(P450c17)、细胞色素P450侧链裂解酶(P450Scc)、波形蛋白(vimentin)mRNA表达下降,尤其是DEHP 100.0μmol/L剂量组(P<0.05),INHBβmRNA表达无显著变化。HE染色,各组睾丸组织未观察到明显病理学改变。免疫组化检测结果显示,与DMSO溶剂对照组相比,蛋白3β-HSD、P450c17、P450Scc表达增强,vimentin表达减弱,尤其是DEHP 10.0μmol/L、100.0μmol/L两个剂量染毒组。结论 DEHP暴露对体外培养睾丸的睾酮合成有影响,其机制可能由于其影响了相关功能基因表达,进而对睾酮合成产生正负调控两种作用。
- 徐华黄洁李敏高志斌朱彦锋李云
- 关键词：器官培养邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯乳鼠睾丸实时荧光定量PCR
- 旋转通气培养法建立小鼠睾丸体外培养模型被引量：6
- 2015年
- 目的通过探索适宜的培养条件,建立小鼠睾丸器官培养模型。方法利用旋转通气培养法在体外培养睾丸,优化培养条件,并与Transwell小室培养法进行形态学比较。HE染色观察睾丸组织结构的变化,Brd U染色法观察睾丸在体外的细胞增殖,放射免疫法观察体外培养睾丸的睾酮分泌能力,免疫组化法观察睾丸中功能蛋白的表达。结果通过培养结局的对比,旋转通气培养法培养的睾丸组织形态更完整。睾丸大小以0.3~0.8 mm3为宜。各组精原细胞增殖指数呈上升趋势,Sertoli细胞增殖指数呈下降趋势：3 d组精原细胞增殖指数的增加与1 d组相比有统计学差异（P〈0.05）,5 d组Sertoli细胞增殖指数的减小与1 d组相比有统计学差异（P〈0.05）。睾酮分泌量随培养天数的增加而减少且差异均有统计学意义（P〈0.05）。培养3 d后,Leydig细胞胞浆内可见3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）、细胞色素P450 17α羟化酶（P450c17）、胆固醇侧链裂解酶（P450Scc）蛋白的表达,Sertoli细胞胞浆内可见波形蛋白（Vimentin）表达。结论利用旋转通气培养法成功建立睾丸器官体外培养的模型。
- 刘艺朱彦锋高志斌李敏钟灵毓印德娇李云
- 关键词：睾丸器官培养睾酮
- 用小鼠睾丸体外培养模型研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对睾酮合成的影响及机制
- 目的：利用睾丸体外培养方法探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响,探讨相关的分子机制.方法：用浸浴式一次性通气旋转装置体外培养小鼠睾丸.实验共分1个DMSO溶剂对照组和0.1...
- 徐华黄洁李敏高志斌朱彦锋李云
- 关键词：器官培养邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯乳鼠睾丸
- 双酚A对体外培养小鼠睾丸睾酮合成的影响及机制被引量：2
- 2013年
- 目的探讨睾丸体外培养模型下双酚A(BPA)暴露对小鼠睾丸睾酮合成及基因表达的影响。方法采用睾丸器官体外培养方法,将睾丸随机分为DMSO溶剂对照组和4个BPA剂量染毒组(终浓度为10-7、10-6、10-5和10-4mol/L)。分别培养24、48和72h,每24h通气一次。HE染色光镜下观察睾丸组织形态学变化,放射免疫法检测培养液睾酮浓度,免疫组化法检测睾丸组织相关蛋白表达。实时荧光定量PCR检测睾丸组织相关基因表达水平。结果 10-4mol/L剂量组支持细胞数目减少,部分间质细胞核固缩或呈絮状改变;随着时间的延长睾酮分泌逐渐减少,与DMSO对照组相比,10-5mol/L剂量组在48h时睾酮合成增加(P<0.05),其余各剂量组睾酮分泌降低,以10-4mol/L剂量组较明显(P<0.01);睾酮合成相关酶3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P45017a羟化酶(P450c17)及波形蛋白(Vimentin)的基因及蛋白表达水平下降。结论 BPA能通过抑制3βHSD、P450scc、P450c17及Vimentin等相关酶的表达,干扰间质细胞睾酮的合成。
- 黄洁徐华高志斌李敏朱彦锋李云
- 关键词：双酚A睾丸睾酮
- 双酚A对体外培养小鼠睾丸睾酮合成的影响及机制
- 目的：建立小鼠睾丸器官体外培养模型,观察双酚A(bisphenol A,BPA)对小鼠睾酮合成的影响以及3β-羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P45017a羟化酶(P450c1...
- 黄洁徐华高志斌李敏朱彦峰李云
- 关键词：双酚A睾酮
- 猪血酶解产物的小鼠初级精母细胞染色体畸变试验
- 2013年
- 目的通过小鼠初级精母细胞染色体畸变试验评价猪血酶解产物的遗传毒性。方法采用经口灌胃给药,制备小鼠精母细胞染色体标本,观察染色体畸变类型和畸变率。结果受试物各剂量组总畸变细胞率、常染色体单价体率和性染色体单价体率与阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);阴性对照组与阳性对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论猪血酶解产物在本试验剂量范围内未见遗传毒性,小鼠初级精母细胞染色体畸变试验为阴性。
- 高志斌李敏李云黄承钰
- 关键词：染色体畸变
