陈锋
- 作品数：16 被引量：43H指数：4
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市科技计划天津市应用基础与前沿技术研究计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术电子电信更多>>
- 人宫颈癌基因蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用
- 2014年
- 目的:制备人宫颈癌基因蛋白单克隆抗体并初步用于肝癌血清检测。方法:重组表达HCCR-1蛋白胞外区(第167th-360th氨基酸)进行动物免疫,用含有HCCR蛋白抗原表位的融合蛋白筛选阳性克隆。通过ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定抗体性质,并用于肝癌血清样本检测。结果:获得3株抗人HCCR蛋白单克隆抗体,其中B3抗体特异性、灵敏度较好。ELISA结果表明B3只识别GST-HCCRep蛋白和His-HCCR蛋白,与其他蛋白没有交叉反应;B3可检测到10 mg/L的GST-HCCRep蛋白;B3抗体亲和力常数Kaff=1.86×107(L/mol);Western Blot结果表明该抗体可识别天然HCCR蛋白;免疫组化检测表明肝癌组织中有HCCR蛋白表达而正常组织中未见表达;肝癌患者血清HCCR阳性率达到75%。结论:成功制备了HCCR单克隆抗体,为建立新的肝癌早期诊断方法奠定了基础。
- 陈锋姥勇陈旭义樊豪军侯世科
- 关键词：人宫颈癌基因单克隆抗体肝癌
- 抗TLR4纳米抗体制备及其对革兰阴性菌脓毒症大鼠模型的作用研究
- 目的：脓毒症流行病学调查研究显示全球每年有1800万脓毒症患者，死亡率高达30％~50%，如并发感染性休克，患者的病死率可高达80％。因此，探索脓毒症发病机制，研究脓毒症的拮抗药物或治疗措施，对脓毒症患者的救治具有重要的...
- 陈锋
- 关键词：脓毒症炎症因子抗原表达
- 罗格列酮对高原肺水肿大鼠的保护作用被引量：2
- 2017年
- 目的探讨罗格列酮对高原肺水肿大鼠的保护作用。方法将36只sD大鼠随机（随机数字法）分为6组：对照组（Control）、低压低氧模型组（HH）、罗格列酮低剂量组[RSG—L，剂量为5mg／（kg·d）]、中剂量组[RSG-M，剂量为10ms／（kg·d）]、高剂量组[RSG—H，剂量为20mg／（kg·d）]、地塞米松组[Dex，剂量为4ms／（kg·d）]，每组6只。连续给药3d后，置于模拟海拔6000In低压低氧动物实验舱内，维持恒温恒湿，每24h给药1次。72h后，处死大鼠，用湿干质量比（W／D）法检测肺组织含水量，考马斯亮蓝法检测肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量，微量酶标法测量肺组织中谷胱甘肽（GSH）含量，TBA法测量肺组织中丙二醛（MDA）含量，wsT-1法测量肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）含量。光镜观察肺组织病理变化。结果与Control组比较，HH组W／D（5．08±0．24）和BALF蛋白含量（351：06±44．55）μg／mL明显增加（P〈0．01），病理结果显示肺泡及肺间质内可见红细胞，肺泡内有粉红色液体渗出，肺间隔增宽明显，炎细胞浸润；肺组织SOD活性（10．65±0．94）U／mgprot、GSH含量（1．63±0．20）μmol／grpot显著降低（P〈0．01），MDA含量（2．15±0．18）nmol／mgprot明显升高（P〈0．01），血清TNF-d（56．92±2．87）pg／mL、IL-6（217．80±48．01）pg／mL水平明显增加（P〈0．01），而IL-10（76．85±16．72）pg/mL水平下降（P〈0．05）；与HH组比较，罗格列酮各剂量组W／D和BALF蛋白含量明显下降，肺组织病理改变明显改善，肺组织SOD活性、GSH含量明显升高（P〈0．01），MDA含量降低（P〈0．01），血清TNF-仅、IL-6水平明显下降（P〈0．01），而IL-10水平明显上升（P〈0．01）。结论罗格列酮通过抑制氧化应激，减少炎症因子释放，
- 李光宗陈锋刘英富张益郁硕樊毫军侯世科
- 关键词：罗格列酮高原肺水肿氧化应激炎症
- 紧急医学救援培训结业考试质量分析
- 2014年
- 目的分析紧急医疗救援培训结业考试——客观结构化临床考试(OSCE)的考试质量,对考试结果做出准确解释,建立规范化、标准化的紧急医疗救援培训考核方法。方法组织9位临床专家和教师设计并制订了10站的OSCE。33名国家级紧急医学救援队队员按培训大纲培训结束后,用这种OSCE进行操作技能结业考核。采用扩展的Angoff法,计算分界组分数(合格分数),运用SPSS19.0录入数据,描述性统计了考试成绩分布情况,分析计算了考试难度、区分度、Cronbach系数的α值和内容效度等指标。结果考试平均分为72.3±7.1分,成绩基本符合正态分布。考试的整体难度系数为0.723,信度分析Cronbach系数α值为0.941,OSCE成绩与平时成绩的相关系数为0.899。每个考站的难度在0.48至0.83之间、区分度在0.11至0.89。分界组分数的为63.2,其中合格30人、不合格3人。结论设计和实施的OSCE结构合理,具有良好的区分度、信度和效度,考试结果真实可信,客观评价了国家级紧急医学救援队队员的能力水平,可作为卫生应急工作培训的考核方式。运用扩展的Angoff法确定合格标准准确地解释了考试结果,为国家级紧急医学救援队科学组训和考核提供了有效参考。
- 陈锋侯世科樊毫军
- 关键词：卫生应急客观结构化临床考试考试分析
- 高原低氧加重脂多糖诱导大鼠肺组织的慢性炎症被引量：2
- 2017年
- 目的探讨高原低氧对大鼠慢性炎症的影响。方法 40只SD大鼠随机均分为正常对照组(对照组)、慢性炎症组(慢炎组)、高原低氧组(高低组)、高原低氧+慢性炎症组(高+慢组);慢炎组大鼠尾静脉注射脂多糖(LPS,0.5 mg/kg),每周2次,连续注射4周,高+慢组经慢炎组相同处理后,同高低组大鼠一起置于模拟海拔6000m的高原低氧环境中连续3 d;然后进行肺组织取材、病理切片HE染色观察。外周血白细胞分类和计数,酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测血清和肺组织IL-6、TNF-α水平,Western印迹检测肺组织IL-6蛋白表达。结果经LPS和高原低氧暴露处理过的大鼠肺组织出现炎细胞浸润、肺泡间毛细血管扩张的病理学变化;外周血白细胞分类和计数。ELISA结果显示,与对照组相比,慢炎组、高低组均能导致大鼠外周血白细胞总数增加(P<0.01),血清和肺组织IL-6和TNF-α水平均升高(均P<0.05);高原低氧和慢性炎症具有交互作用(P<0.01),高+慢组进一步增加了外周血白细胞数,并促进IL-6和TNF-α的表达升高(P<0.01)。结论通过大鼠脂多糖慢性炎症模型,证实高原低氧可加重慢性炎症发展。
- 张益李光宗郁硕陈锋刘英富霍景瑞郑淑芳
- 关键词：炎症高原低氧脂多糖类白细胞介素6
- 基于物联网的灾害医疗救援体系构建被引量：6
- 2014年
- 探讨了物联网技术在灾害医疗救援中的应用,旨在提高灾害医学救援效率。以医疗卫生信息化技术和物联网关键技术为基础,采用系统分析的方法,剖析灾害医疗救援体系的基本要素和体系结构。围绕人员、物资和信息3个要素,提出了基于物联网的灾害医疗救援组织指挥体系、伤员救治体系、物资保障体系的建设模式。
- 陈锋侯世科樊毫军
- 关键词：物联网灾害医学医疗救援
- 接种密度对C57BL/6小鼠CIK细胞增殖、分化及杀瘤作用的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨不同接种密度对C57BL/6小鼠细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖分化及杀瘤作用的影响,进一步优化CIK细胞培养方法。方法:按照1×10~6/mL(A组)、4×10~6/mL(B组)、8×10~6/mL(C组)、12×10~6/mL(D组)4种接种密度培养细胞,加入必要的细胞因子,14 d后收获细胞,通过流式细胞术、CCK-8法对细胞增殖、分化、杀瘤作用进行分析。结果:培养过程中,C组细胞形态及增殖能力优于A、B组,在14 d时收获细胞并对其进行检测时发现,C组CD3^+/NK1.1^+细胞所占比例明显高于A、B组,杀瘤活性也优于A、B组;D组细胞密度过大,在7 d细胞进入快速增殖期后出现大面积死亡。结论:适当提高C57BL/6小鼠CIK细胞的接种密度利于细胞增殖、分化及杀瘤作用的形成,选择8×10~6/mL的接种密度是较为合适的。
- 李光宗曾喜欢刘英富霍景瑞郁硕张益侯世科陈小义陈锋
- 关键词：细胞培养增殖
- 可溶性GST-CRH蛋白原核表达条件的优化及纯化被引量：5
- 2017年
- 目的通过谷胱甘肽巯基转移酶(GST)-促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)原核表达条件的优化及纯化,获得可溶性好、纯度高的重组GST-CRH蛋白。方法通过对GST-CRH转化菌表达温度、菌液密度(OD600)、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱导时间的摸索,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测可溶性GST-CRH蛋白的表达情况,GST琼脂糖凝胶进行GST-CRH的纯化,Western Blot对表达的目的蛋白进一步鉴定。结果起始OD6000.8、IPTG工作浓度0.1 mmol/L、30℃诱导8 h为GST-CRH最优诱导条件;融合蛋白经Western Blot鉴定为表达的GST-CRH,纯化后纯度>95%。结论建立了GST-CRH的原核表达及纯化方法,获得了高纯度的GST-CRH可溶性蛋白。
- 郁硕陈锋刘英富霍景瑞李光宗张益丁辉樊毫军
- 关键词：促肾上腺皮质素释放激素原核表达纯化
- 抗Toll样受体4胞外C端结构域单克隆抗体制备及其治疗脓毒症的初步效果被引量：1
- 2016年
- 目的制备针对Toll样受体4（TLR4）胞外C端结构域的单克隆抗体，并探讨抗TLR4C端单克隆抗体对脓毒症的影响。方法原核表达、丙烯葡聚糖凝胶（SephacrylS-100）纯化获得大鼠来源的TLR4C端多肽（氨基酸序列：368—579，命名为TLR4-C），免疫6～8周雌性Balb／c小鼠，经细胞融合、抗体筛选、纯化等程序制备抗TLR4-C单克隆抗体，采用Western印迹、细胞免疫荧光对制备的TLR4-C单克隆抗体进行特异性检测。通过细胞实验和脓毒症动物模型实验进行抗体活性测定。（1）细胞实验：100μg/ml抗体加入培养的NR8383作用1h，加入10ng／ml脂多糖（LPS）继续培养12h后，ELISA检测培养基中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的释放水平；（2）脓毒症动物模型实验：40只SD大鼠按随机数字表法分为对照抗体组、B—D5抗体组，每组尾静脉分别注射50mg／kg相应抗体，1h后经腹腔给予10mg／kg致脓毒症剂量的LPS，4h后检测两组血清TNF—α含量，并连续72h观察两组动物存活情况。结果获得3株特异性高、且能结合TLR4-C和TLR4全蛋白的抗TLR4-C单克隆抗体。细胞活性测定显示，1株单克隆抗体（B—D5）能明显抑制细胞TNF—α的释放，其余2株对抑制细胞TNF-α的作用较弱。动物模型实验显示，B—D5抗体组TNF-α水平为（1．54±0．18）ng／ml，明显低于对照抗体组的（0．51±0．10）ng／ml（P〈0．01），B—D5抗体组存活率（70％）明显高于对照抗体组（30％）（P〈0．05）。结论制备的抗TLR4C端单克隆抗体具有很好的TLR4中和作用，明显提高大鼠的存活率，对LPS诱发的脓毒症具有较好的保护作用。
- 陈锋刘英富李光宗张益郁硕侯世科
- 关键词：TOLL样受体4抗体单克隆脓毒症
- 大肠杆菌亚型致脓毒症模型比较研究被引量：4
- 2018年
- 目的探讨不同种类大肠杆菌诱导的脓毒症模型损伤程度。方法将152只小鼠随机数字表法分为对照组、DH5α组、44102组和25922组,每组38只。DH5α组、44102组和25922组分别腹腔注射300μL浓度为1.0×10~9CFU/kg的大肠杆菌DH5α、44102和25922,以不同种类大肠杆菌诱导脓毒症模型,对照组腹腔注射等体积生理盐水。(1)造模8 h后,每组各取4只小鼠,进行外周血细菌培养,计算细菌菌落数。(2)造模12 h后,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6水平(每组10只);采用蛋白免疫印迹法(Westernblot)测定血清中晚期炎症因子高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平(每组4只);使用自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、血肌酐(CR)水平(每组10只);取肺肝肾组织经甲醛固定后,进行苏木精-伊红(HE)染色(每组10只)。结果 DH5α组、44102组、25922组细菌菌落形成数量,炎症因子TNF-α、IL-6以及HMGB1蛋白,肝肾功能指标ALT、AST、CR、BUN均呈依次增高趋势(P<0.01)。DH5α组、44102组、25922组的肺泡结构损伤程度、肝炎性细胞浸润程度及肾小球萎缩程度由重到轻依次为25922组、44102组、DH5α组,对照组肺、肝、肾组织无明显损伤。结论大肠杆菌25922诱导脓毒症模型损伤严重,可用于研究脓毒症初期炎症风暴阶段的动物模型;大肠杆菌44102诱导脓毒症模型损伤适中,可用于无需限定脓毒症分期实验的动物模型;大肠杆菌DH5α诱导脓毒症模型损伤较轻,可用于探索脓毒症免疫抑制期治疗方法的动物模型。
- 张晶晶孔宪斌霍景瑞王蕾刘颖杨晓晖田毅侯振江陈锋陈旭义孙世中夏天光孙中磊黄梦强刘英富
- 关键词：脓毒症全身炎症反应综合征疾病模型大肠杆菌肿瘤坏死因子Α白细胞介素6
