陆辉明
- 作品数:10 被引量:13H指数:3
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程更多>>
- 一种耐辐射球菌抗逆相关基因及其应用
- 本发明提供一种耐辐射球菌抗逆相关基因,名称为Inducer of pleiotropicproteins promoting DNA repair,来源于耐辐射球菌菌株(Deinococcusradiodurans R1...
- 华跃进陆辉明高冠军
- 文献传递
- DNA辐射损伤实时生物监测系统的构建
- 在受到辐射等物理、化学和生物因素的作用后,DNA会发生损伤甚至双链断裂,从而导致生物体SOS DNA修复系统中相关基因的启动。在本文中,我们将DNA损伤诱导子recA基因的启动子与EGFP融合后转入耐辐射球菌中,研究不同...
- 高冠军陆辉明华跃进
- 关键词:耐辐射球菌DNA损伤生物传感器
- 文献传递
- 类核环形结构在耐辐射球菌电离辐射抗性中不起主要作用被引量:1
- 2007年
- 近来基于透射电子显微镜研究的论点“耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans)R1类核致密的环形结构是其极端辐射抗性的关键因素”已引起广泛争议.本文在以前研究基础上系统地比较了野生型R1菌株、pprI(DR0167)基因突变株YR1及pprI基因功能补偿株在电离辐射前后的类核结构的形态差异.荧光显微镜观察结果显示:(ⅰ)具有超强电离辐射抗性的野生型菌株R1细胞类核主要呈现紧凑的环形结构,而同样有环形类核结构的pprI突变株YR1细胞却对辐射非常敏感;(ⅱ)2个pprI基因功能补偿株,YR1001(pprI全基因功能补偿株)类核绝大多数呈现絮乱松散的不规则形态,YR1002(pprI部分基因功能补偿株)呈现约60%左右的环形类核结构,这两个菌株都具有与野生型R1同样的电离辐射抗性;(ⅲ)另一pprI部分基因功能补偿株YR1004(敲除pprI基因3′端333个碱基对)对电离辐射极其敏感,其约60%左右的细胞含有环形的类核结构.上述结果表明,耐辐射球菌类核的环形结构在辐射极端抗性中不起主要作用.
- 高冠军陆辉明尹龙飞华跃进
- 关键词:电离辐射
- 耐辐射球菌DNA修复机制研究新进展被引量:3
- 2007年
- 耐辐射球菌是迄今为止发现的最耐辐射的原核生物,是研究DNA损伤与修复的模式生物。根据国内外实验室和本实验在耐辐射球菌研究上取得的最新研究成果,本文从该细菌的结构特征、分子防御机制、重要修复基因、基因组学和蛋白质组学等方面综述了耐辐射球菌在DNA修复机制方面取得的进展,探讨了未来揭示该细菌独特高效的DNA修复分子机理可能采取的途径。
- 黄丽芬陆辉明华孝挺华跃进
- 关键词:耐辐射球菌DNA修复蛋白质组学基因组学
- 耐辐射球菌基因DRB0099缺失突变株的构建及逆境分析被引量:3
- 2008年
- 耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans R1)有着极强的辐射抗性。研究其抗辐射的机理对于处理放射性废料有着潜在的应用价值。在耐辐射球菌的基因组中,许多序列的功能未知。其中DRB0099尤为引人注意。将DRB0099缺失突变构建该基因的突变株。对野生型和突变体进行比较后发现,在正常生长条件下的前期阶段(0~16h),突变体生长速度比野生型慢。16h以后,野生型逐渐进入稳定生长期。这时,突变株的生长速度高于野生型。但是,野生型的浓度一直高于突变株。表明在DRB0099被删除后,耐辐射球菌的生长可能受到了阻滞。在紫外线照射的条件下,尽管野生型随着照射剂量的增加,存活率越来越低,但是要比突变体高许多。野生型具有比突变体更强的修复DNA双链断裂的能力。DRB0099可能直接参与了对DNA的修复。突变体对H2O2的敏感程度高于野生型,表明野生型耐辐射球菌在对抗活性氧保护其蛋白质、DNA或者DNA修复方面具有比突变体更强的功能。在低浓度H2O2处理条件下,尽管野生型和突变体的存活率都出现下降趋势,但二者的差值并不大。随着H2O2剂量的增加,二者的差值越来越大。表明随着活性氧浓度的增加,蛋白质和DNA损伤的数量增加,失去DRB0099基因功能的突变体比野生型更容易受到损伤。在紫外线照射处理或者H2O2处理条件下,DRB0099能够保护蛋白质和DNA。
- 常胜合舒海燕陆辉明华跃进李宗伟田双起王雁萍陈林海谈重芳秦广雍
- 关键词:突变株
- 一个定向突变及遗传改造的重组质粒及其应用
- 本发明提供一个用于耐辐射球菌目的基因定向突变和染色体遗传改造的重组基因,具有SEQ ID №:1的核苷酸序列,是表达耐辐射球菌热激蛋白GroEL基因的启动子PgroEL与卡那霉素抗性基因KanR的融合DNA片段。本发明的...
- 华跃进陆辉明高冠军黄丽芬
- 文献传递
- 耐辐射球菌DNA修复开关基因pprI缺陷性突变和功能补偿性突变株的建立被引量:5
- 2005年
- PprI是近来在耐辐射球菌Deinococcus,radiodurans中发现的一个极其重要的DNA修复开关基因.以已测序的野生型菌株R1为材料,运用PCR突变法将克隆具有自身GroEL启动子和卡那霉素抗性基因的DNA片段反向重组到pprI基因中去,首次获得了卡那霉素抗性的、pprI功能完全破坏的突变株YR1.辐射细胞生存率结果表明,YR1对辐射异常敏感.另外,将含有GroEL启动子和卡那霉素抗性基因的DNA片段重组到质粒pRADZ3中,获得了具有卡那霉素抗性的表达质粒pRADK;再将体外克隆的具有pprI完整基因和C-末端结构域截短的PprI蛋白基因片段分别重组到pRADK中.研究结果表明,含有pprI完整基因的表达质粒在YR1中能够正常表达,并完全恢复到野生型的极端抗性;而C-末端结构域截短的PprI蛋白基因片段虽能在YR1中正常表达,但对辐射异常敏感,不能恢复其极端抗性.上述pprI基因功能缺陷性和功能补偿性突变株的建立,为深入研究细胞体内PprI蛋白质的定位、结构域与功能的关系,以及原位研究PprI蛋白质的理化特性提供了十分有效的方法.
- 高冠军陆辉明黄丽芬华跃进
- 关键词:性基因DNA修复卡那霉素抗性耐辐射球菌
- 一种耐辐射球菌抗逆相关基因及其应用
- 本发明提供一种耐辐射球菌抗逆相关基因,名称为Inducer of pleiotropicproteins promoting DNA repair,来源于耐辐射球菌菌株(Deinococcusradiodurans R1...
- 华跃进陆辉明高冠军
- 文献传递
- 检测环境放射性和遗传毒性物质的耐辐射球菌生物传感器的构建被引量:2
- 2008年
- 基于经遗传修饰的极端抗辐射细菌——耐辐射球菌,构建了一个实时全细胞生物传感器,以检测高放射性环境中的放射性物质和遗传毒物.把加强型绿色荧光蛋白(eGFP)连接到耐辐射球菌中一个可受DNA损伤诱导调控的关键基因——recA基因的启动子后,所得到的融合DNA片段(PrecA-egfp)由质粒携带转化入耐辐射球菌R1菌株,从而最终获得了生物传感器菌株DRG300.这个改造过的菌株可以在recA基因启动子的引发下表达eGFP荧光蛋白,从而发出荧光.根据耐辐射球菌活细胞中荧光强度和eGFP蛋白表达量之间的相关性,我们发现在DRG300菌株中荧光的产生量同DNA损伤因子(如γ射线和丝裂霉素C)之间有很显著的剂量相关性.同以前报道的全细胞传感器相比,本研究构建的这个重组菌株同时具有广阔的剂量探测范围和较高的灵敏度.研究结果表明,DRG300可作为一个潜在全细胞生物传感器,基于此构建的检测系统,可以用来实时监测环境中放射性和毒性污染物所造成的生物学危害.
- 高冠军范陆陆辉明华跃进
- 关键词:耐辐射球菌生物传感器EGFPRECA丝裂霉素C
- 一个感受DNA损伤因子的启动子及其应用
- 本发明提供一个可感受DNA损伤因子的启动子,来源于耐辐射球菌菌株(Deinococcus radiodurans R1),具有SEQ ID No:1的核苷酸序列。本发明提供的启动子,与一些报告基因相结合,并导入到相关宿主...
- 华跃进陆辉明范陆
- 文献传递