脂肪来源干细胞在皮肤组织损伤修复中的表型和功能变化 被引量:5 2012年 目的:通过模拟皮肤损伤修复过程中局部微环境的变化,了解脂肪来源干细胞(adi pose t i ssue deri ved st em,cAeSCl)l的表型改变对细胞功能的影响。方法:由手术废弃皮肤和脂肪组织获取实验所需细胞,并培养扩增。对不同传代数的ASC细胞进行脂肪细胞诱导分化,了解细胞的可诱导分化性能;构建ASC细胞-胶原凝胶,贴壁或悬浮培养,对ASC凝胶进行α-SMA免疫组化染色;培养基中添加TGF-β1,观察TGF-β1对ASC细胞表型和可诱导分化能力的影响;收集培养上清液,El i sa法测定比较成纤维细胞和ASC细胞的细胞生长因子分泌水平,以及经TGF-β1作用,ASC细胞表型发生变化后细胞生长因子分泌水平的变化。结果:ASC细胞可以多次传代,仍保持较好的可诱导分化特性;在培养过程中,张力和TGF-β1可以使ASC获得α-SMA阳性表型;ASC细胞相比成纤维细胞,有较高的VEGF和KGF分泌水平,但TGF-β1分泌水平极低(未测到),获得α-SMA阳性表型的ASC细胞的VEGF分泌水平继续大幅上升,而且也分泌了较高水平的TGF-β1。结论:ASC细胞在创伤局部环境的刺激下或经体外人工诱导,可以产生更有利于创伤愈合的表型。对ASC细胞特性的了解和调控,将有利于ASC细胞在组织修复再生方面的应用。 郭亚东 张明君 孙要文 张振信 杨旅军关键词:脂肪来源干细胞 表型 细胞生长因子 发际缘小切口面部年轻化的探索 目的:为了探索一种切口小、创伤轻、恢复快、术后瘢痕遗留不明显,手术并发症少。疗效可靠,对受术者正常工作和生活影响不大,简便易行的面部年轻化手术新方法。方法:于2007 年采用颞部发际缘w 切口实施面部年轻化手术。 张振信 王本峰 徐子寒 高文杰 郭亚东三维激光扫描技术在皮肤扩张表面积测量中的应用及与注水量相关性分析 被引量:2 2019年 目的:分析三维激光扫描技术在头部、颈部、胸部及下肢扩张皮肤表面积测量中的应用及与注水量的相关性。方法:回顾性选取60例烧伤整形医学美容外科患者,术后7d采用三维激光扫描技术在头部、颈部、胸部及下肢扩张皮肤行表面积测量。手术分Ⅰ、Ⅱ期进行,Ⅰ期放置皮肤扩张器,并于术后每周定期行注水处理,注水时间为3个月;Ⅱ期采用三维激光扫描技术并于Geomagic Qualify检测软件下测量扩张皮肤表面积,分析皮肤扩张面积与注水量的相关性。结果:皮肤软组织扩张表面积从小到大依次为大腿内侧、大腿外侧和胸部、额部、颈部、面颊部以及头顶部;扩张部位表面积与其修复部位密切相关;皮肤扩张面积与注水量呈正相关(r=0.57,P<0.01)。结论:基于三维激光扫描技术可通过Angel色素分析软件等选择最佳扩张器行皮瓣扩张和手术预构。 郭亚东 李晓晴 孙要文 秦高平关键词:三维激光扫描技术 瘢痕 注水量 软组织扩张术 siRNA靶向抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制研究 2019年 目的:探讨siRNA靶向抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制。方法:构建阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤模型,检测阿霉素处理的细胞中Nox2蛋白质的表达。根据实验设计分为正常组、单纯siRNA-Nox2转染组、阿霉素模型组及siRNA-Nox2转染+阿霉素处理组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化应激水平。Western blotting法检测siRNA靶向抑制Nox2对阿霉素诱导的细胞凋亡的影响。结果:Western blotting结果表明,与正常组相比,阿霉素模型组细胞Nox2蛋白质水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。MMT法检测结果提示,相较于阿霉素模型组,siRNA-Nox2转染可提高细胞增殖能力和存活率,差异有统计学意义(P<0.05)。与阿霉素模型组相比,siRNA转染+阿霉素组细胞MDA和ROS水平降低,SOD活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果表明,siRNA-Nox2转染可显著降低阿霉素诱导的细胞凋亡,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:siRNA靶向抑制Nox2保护阿霉素诱导的人皮肤成纤维细胞损伤,其机制与降低胞内氧化应激和ROS水平有关。 郭亚东 孙要文 秦高平 吴红娟关键词:阿霉素 人皮肤成纤维细胞 眼轮匝肌-上睑提肌固定重睑成形术联合V-Y内眦赘皮矫正术治疗41例单睑伴内眦赘皮患者的疗效 被引量:29 2019年 目的观察眼轮匝肌-上睑提肌固定重睑成形术联合V-Y内眦赘皮矫正术治疗单睑伴内眦赘皮患者的治疗效果。方法选取2014年9月至2017年11月本院82例单睑伴内眦赘皮患者,依据随机数字表法分为观察组(n=41)与对照组(n=41)。两组均行眼轮匝肌-上睑提肌固定重睑成形术,于此基础上,观察组同期行V-Y内眦赘皮矫正术,对照组同期行Z成形术。统计两组近期疗效、术后并发症发生率,并对比术前、术后3个月内眦间距、眼裂变化情况及术后1周、1、3个月瘢痕评分。结果观察组近期治疗总有效率(95.12%)与对照组(92.68%)相比,差异无统计学意义(P> 0.05);观察组术后3个月内眦间距较对照组小(P<0.05);观察组术后3个月眼裂长度较对照组长,眼裂角及倾斜度均较对照组小(P<0.05);两组间术后1周、1个月瘢痕评分相比,差异均无统计学意义(P> 0.05);观察组术后3个月瘢痕评分较对照组低(P<0.05);观察组术后并发症发生率(7.32%)较对照组(24.39%)低(P<0.05)。结论对单睑伴内眦赘皮患者联合采用眼轮匝肌-上睑提肌固定重睑成形术联合V-Y内眦赘皮矫正术治疗,并发症发生率较低,中期疗效更为显著,值得临床推广应用。 郭亚东 孙要文 李晓晴关键词:眼睑成形术 动眼肌 泪器 睑裂狭小 SND1通过识别TINCR的甲基化位点促进瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长 被引量:2 2021年 目的探讨葡萄球菌核酸酶结构域蛋白1(SND1)与组织分化诱导非编码RNA(TINCR)的相互作用及其对TINCR表达水平和瘢痕疙瘩生长的影响。方法收集2016年6月-2018年5月在陕西省人民医院接受治疗的Ⅱ、Ⅲ度烧伤患者的瘢痕疙瘩组织样本(n=27)。运用生物信息学方法预测TINCR序列中的RNA甲基化位点;培养人原代正常皮肤成纤维细胞(HFs)和瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs),设置HFs组和KFs组。取对数生长期KFs,设置:(1)对照组、空载组及甲基转移酶样蛋白3(METTL3)过表达组;(2)对照组和3-脱氮基腺苷(DAA)组;(3)对照组、SND1重组蛋白组及SND1重组蛋白+DAA组。采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测HFs和KFs中TINCR的相对表达水平,甲基化RNA免疫沉淀技术(MeRIP)联合RT-qPCR检测TINCR的甲基化水平,Western blotting检测SND1和METTL3蛋白的相对表达水平,放线菌素D处理联合RT-qPCR检测TINCR残留水平,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力。取18只BALB/c裸鼠,构建瘢痕疙瘩异种移植模型,随机分为瘢痕疙瘩组、瘢痕疙瘩+SND1重组蛋白组及瘢痕疙瘩+SND1重组蛋白+DAA组,每组6只,采用HE染色观察瘢痕疙瘩组织生长情况,免疫组化染色和Western blotting检测SND1在瘢痕疙瘩组织中的表达水平。结果TINCR第三外显子含有7个潜在的RNA甲基化位点。与HFs相比,KFs中TINCR相对表达水平(5.43±0.35 vs.1.00±0.11,P<0.01)和甲基化水平(19.73%±1.56%vs.10.25%±1.13%,P<0.01)均明显升高,SND1和METTL3蛋白相对表达水平明显增高(P<0.01),甲基化的TINCR与SND1和METTL3均有结合。与空载组相比,METTL3过表达可促进METTL3 mRNA和蛋白的表达(mRNA:6.03±0.55 vs.1.09±0.09,P<0.01;蛋白:4.33±0.35 vs.0.96±0.08,P<0.01)、增高TINCR甲基化水平(32.89%±2.88%vs.19.04%±1.72%,P<0.01)和相对表达水平(4.65±0.32 vs.1.00±0.10,P<0.01)。与对照组相比,DAA处理可降低TINCR的稳定性[(8.50±1.13)h vs.(12.90±1.41)h,P<0.001]和甲基化水平(7.43%±0.55%vs.1 秦高平 孙要文 郭亚东 李建武 程亮 韩峰 宋勇关键词:成纤维细胞 瘢痕疙瘩 综合微创手术治疗腋臭1066例临床疗效观察 被引量:9 2018年 目的:探讨联合负压抽吸、小切口直视皮下修剪及电刮勺热灼的综合性微创方法治疗腋臭的临床疗效。方法:2006年1月-2016年12月笔者科室采用微创综合疗法治疗腋臭1 066例,沿腋窝尺侧腋皱襞附近作一长约0.5~1.0cm小切口,在腋窝中央作一长约1cm辅助切口。沿手术切口负压抽吸浅层脂肪,在直视下修剪皮下残余脂肪组织及真皮网状层的毛囊球,电刮勺依次在皮下烧灼静止期毛囊,术后打包加压包扎7d。结果:本组共1 066例患者,随访6~12个月,显效913例,有效142例,无效11例,有效率为98.97%。术后血肿23例,5例发生皮片坏死,植皮后创面愈合,其余均通过换药治愈。结论:联合负压抽吸、小切口直视皮下修剪及电刮勺热灼的综合方法能有效根治腋臭,具有安全、高效、术后并发症少等优点。 秦高平 郭亚东 宋勇 孙要文关键词:腋臭 顶泌汗腺 抽吸术 刮除术 剪除术 微创 柔性扩张联合局部外用倍他米松乳膏治疗小儿包茎的疗效观察 被引量:2 2016年 2003年1月至2015年1月,共对225例小儿包茎患儿采用柔性扩张术联合局部倍他米松治疗.患儿年龄4- 12岁,208例(92.4%)术后7d阴茎水肿基本消退,排尿正常,均在1次柔性扩张术后治愈;17例因包皮粘连紧密,术后水肿较重且未积极配合下翻包皮,行2-3次柔性扩张.随访2-24个月,221例(98.2%)达到治愈标准.柔性扩张术联合局部倍他米松乳膏可治愈小儿包茎,并降低感染、瘢痕形成、包皮系带损伤等并发症,是安全、有效、简易、经济的治疗方案. 徐子寒 高文杰 王本峰 郭亚东 张振信关键词:倍他米松 延期植皮术联合牵引术在重度关节瘢痕挛缩畸形中的应用 被引量:5 2014年 目的 探讨在重度关节瘢痕挛缩畸形治疗中,采用延期植皮术联合牵引术的效果.方法 2000年3月至2013年5月,临床治疗25例.对重度关节瘢痕挛缩畸形患者,一期行瘢痕切除松解术,术中保留关节部位的血管、神经、肌腱等重要组织,创面用脱细胞猪皮生物敷料覆盖、包扎.术后行关节部位持续皮牵引7~14d,待关节恢复到伸直位,即行二期自体皮移植术.结果 25例患者二期植皮术后2~3周创面一期愈合,皮片完全成活、色泽及弹性良好,关节屈伸基本正常.经3个月至11年的随访,除1例肩关节功能锻炼不积极,效果欠佳,其余均无瘢痕增生、挛缩,关节功能恢复满意.结论 延期植皮术联合牵引术可有效提高皮片成活率、减轻瘢痕形成,关节功能得到良好恢复,提高了患者生活质量。 徐子寒 张振信 王本峰 孙要文 郭亚东 高文杰 秦高平关键词:瘢痕 牵引术 柱状微粒皮移植联合异种脱细胞真皮基质在小面积Ⅲ度烧伤创面修复中的应用 被引量:7 2020年 目的观察柱状微粒皮移植联合异种脱细胞真皮基质敷料在小面积Ⅲ度烧伤肉芽创面修复中的治疗效果。方法选择2018年4月至2020年4月住院治疗的小面积Ⅲ度烧伤肉芽创面患者16例,创面面积2.3 cm×2.4 cm^5.2 cm×15.5 cm。每例患者创面按1∶1分为甲、乙两个治疗区,甲区采用单纯中厚皮移植,乙区给予柱状微粒皮移植联合真皮基质敷料覆盖,获得两组配对样本:A组(16例甲区治疗组)和B组(16例乙区治疗组)。术后给予打包包扎或适度加压包扎。观察两组创面愈合时间、上皮化情况、愈合后瘢痕增生情况及瘙痒程度。对数据进行配对t检验。结果两组创面愈合时间比较,其差异具有统计学意义;两组创面愈合早期均未见明显水疱甚至破溃糜烂等情况,但A组供皮区愈合后早期6例出现水疱,2例出现破溃糜烂,B组供皮区未出现上述情况;A组及B组创面愈合后3~6个月瘢痕增生不明显,轻度瘙痒,两组愈合创面温哥华瘢痕评定量表评分比较,其差异无统计学意义(P>0.05),但是A组供皮区愈合后瘢痕增生明显,中度瘙痒;B组供皮区创面愈合后瘢痕增生不明显,无瘙痒,温哥华瘢痕评定量表评分两组比较,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论柱状微粒皮移植联合脱细胞真皮基质敷料治疗小面积Ⅲ度烧伤创面方法安全有效,创面愈合质量高,供皮区瘢痕增生不明显,该方法值得推广。 王国栋 慕生枝 韩锋 范荣辉 郭亚东 李建武 郑博文 孙要文