邵静
- 作品数：12 被引量：69H指数：5
- 供职机构：中山大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝细胞生长因子诱导骨髓间质干细胞分化为心肌细胞被引量：28
- 2004年
- 目的 :探讨肝细胞生长因子 (HGF)体外诱导骨髓间质干细胞 (MSC)定向分化心肌细胞的一种新方法。方法 :分离SD大鼠骨髓MSC ,培养至 4 - 6代后 ,添加HGF(终浓度 10 μg/L)持续培养 30d ,倒置显微镜下动态观察分化细胞的自律性搏动和对 0 1%异丙肾上腺素和无Ca2 + 孵育液的反应 ,并行心肌肌凝蛋白表达鉴定。结果 :分化第 14 - 2 0d骨髓间质干细胞增殖形成集落 ,10 % - 5 0 %克隆中开始出现持续节律收缩的细胞群体 ,节律频率为 70- 90次 /min ,异丙肾上腺素加快其搏动速率 ,无Ca2 + 孵育液则抑制之。细胞心肌肌凝蛋白表达鉴定为心肌细胞。结论 :HGF可诱导骨髓间质干细胞分化为心肌细胞 。
- 方天翎闵军邓小耿钱世鵾褚忠华陈亚进邵静魏菁陈积圣
- 关键词：肝细胞生长因子心肌分化
- RNA干扰内源性一氧化氮合酶基因对舌鳞状细胞癌细胞增殖活性影响的实验研究
- 2007年
- 目的研究内源性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)对肿瘤细胞凋亡和增殖活性的影响。方法采用 RNA 干扰技术,将含有 iNOS 基因的特异性短发夹状 RNA(shorthairpin RNA,shRNA)片断的质粒载体转染入 Tca8113细胞,免疫组化检测细胞中 iNOS 的蛋白表达改变情况;流式细胞仪及甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTY)法检测细胞凋亡率和生长曲线的变化情况。结果质粒转染入 Tca8113细胞后,实验组细胞中 iNOS 蛋白表达显著低于两对照组(P<0.01);而凋亡率明显高于两对照组(P<0.01);生长曲线显示实验组细胞增殖活性受到一定抑制。结论 RNA 干扰技术沉默 iNOS 基因可提高 Tca8113细胞的凋亡,并降低细胞的增殖活性。
- 杨岚陈伟良曾曙光张树标邵静
- 关键词：一氧化氮合酶鳞状细胞
- 热休克蛋白对树突状细胞成熟的影响研究被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨热休克蛋白 (HSP)对树突状细胞 (DCs)成熟的影响 ,同时对其形态学动态变化进行研究。方法 :从肝癌组织中提取HSP(gp96 )抗原肽复合物 ;肝癌细胞进行热休克处理诱导其表面表达HSP ,再用DiI荧光标记 ;将两种HSP与DCs混合培养 ,动态观察DCs捕获抗原和成熟过程中的形态学变化。流式细胞仪检测不同情况下热休克蛋白对DCs成熟表型的影响。结果 :使用DiI标记的方法良好地显示了DCs摄取抗原的形态学变化 ;DCs通过直接接触、包绕、形成囊泡和伸出伪足且末端形成囊泡 4种方式摄取抗原 ;热休克蛋白可促进DCs成熟表型的表达。结论 :DiI是适合DCs形态学研究的良好的荧光标记物 ;DCs捕获抗原有 4种不同方式 ;不同热休克蛋白均可促进DCs成熟 。
- 钱世鵾闵军褚忠华李东印邵静魏菁区庆嘉
- 关键词：热休克蛋白质类树突细胞肝肿瘤
- 大量培养诱导乳腺癌患者自体DC和CIK细胞的研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨获得大量乳腺癌患者自体树突状细胞(dendritic cells,DCs)和细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced cells,CIK细胞)的可行性。方法实验组,乳腺癌患者经外周血干细胞动员,取50mL外周血分外周血单个核细胞(PBMC),用AIM-V无血清培养基培养DCs和CIK,并设健康人对照组,用RPMI1640完全营养培养基。结果实验组PBMC产出2×108个并诱导出1.2×107个DCs和2×109个CIK细胞,显著高于对照组(P<0.01)。DCs的CD86、CD11c和HLA-DR分子都有较高表达,CIK细胞CD3+、CD56+双阳性细胞达到14.41%。细胞毒实验提示CIK细胞有强大的杀瘤活性。结论乳腺癌患者经外周血干细胞动员,用AIM-V无血清系统培养,少量外周血可诱导大量优质自体DCs和CIK细胞。
- 王先明何劲松陈伟财王敏闵军邵静
- 关键词：树突状细胞
- 免疫磁性分选骨髓干细胞亚群Thy-1^(low) Lin^- Sca-1^+被引量：1
- 2003年
- 目的 采用免疫磁性细胞分选系统 (MACS)分离纯化骨髓干细胞亚群Thy 1lowLin Sca 1+ 。方法 收集小鼠股骨骨髓细胞 ,用MACS系统 ,通过三步分选步骤选择Thy 1lowSca 1+ 细胞 ,去除Lin+ 细胞 ,得骨髓干细胞亚群Thy 1lowLin Sca 1+ ,流式细胞仪分析其纯度 ,计算回收率。结果 分选出的Thy 1lowLin Sca 1+ 细胞纯度和回收率分别为 72 .3 6% ,82 .43 % ,达到MACS分选CD3 4+ 细胞水平。结论 MACS系统能有效分选骨髓干细胞亚群Thy 1lowLin Sca 1+ ,纯度和回收率高。
- 何劲松陈积圣闵军魏菁蔡云峰邵静
- siRNA靶向沉默hTERT基因对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡和周期的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究hTERT-siRNA对人胰腺癌Capan-2细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。方法利用RNAi技术靶向沉默Capan-2的hTERT基因表达,应用细胞直接计数法和流式细胞术(FCM)检测Capan-2细胞的增殖、凋亡和细胞周期的变化。结果在hTERT-siRNA的使用浓度为50nm、Lipo转染浓度为3μl/2ml转染体积和hTERT沉默效率为100%的条件下,转染hTERT-siRNA24h后,细胞生长已明显减慢,抑制细胞增殖率为26.39%(P<0.05),第2、3、5、7天抑制细胞增殖率分别为46.77%、70.61%、84.71%和85.99%(P<0.001)。随着转染细胞按常规培养时间的延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.001),以24h后更明显;活性细胞明显减少(P<0.001),而损伤细胞明显增多(P<0.001),以6h后明显;死亡细胞明显增多(P<0.001),以24h后更明显。siRNA组与阴性对照组和Lipo对照组均有明显差异(P<0.001)。G0～G1期细胞明显增多(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),以24h后明显;G2～M期细胞明显减少(P<0.01),以48h后明显;晚期凋亡细胞增多(P<0.05),以48h后明显。结论hTERT-siRNA可抑制人胰腺癌Capan-2细胞生长,使较多的细胞停留在G0～G1期,而进入G～M期和S期的细胞减少,可促进细胞凋亡。
- 钟英强魏菁罗招凡傅玉如邵静刘娟朱兆华
- 关键词：胰腺肿瘤细胞周期
- 严重急性呼吸综合征患者康复期T淋巴细胞亚群变化的临床应用分析被引量：8
- 2005年
- 段朝晖黄嘉凌罗晓红刘然义邵静魏菁闵军黄健黄文林
- 关键词：T淋巴细胞亚群患者康复期SARS患者多器官损伤肺部病变
- 含淤胆血清的培养体系体外诱导胚胎干细胞表达肝细胞功能的研究被引量：10
- 2004年
- 目的 探讨病理微环境体外诱导对小鼠胚胎干细胞(ESC)表达肝细胞功能的作用。 方法 悬滴培养ESC发育5-7 d的拟胚体,将其离散细胞种植于不同的分化体系,观察ESC在自主分化、肝细胞生长因子(HGF)或5％淤胆血清+HGF诱导下每天的分化情况(倒置相差显微镜),以及细胞的糖原、甘油三酯、白蛋白及尿素氮合成功能,细胞吲哚氰绿(ICG)和荧光二乙酯(FDA)染色的情况。 结果 ESC自主分化难以控制,分化为3个胚层的细胞。HGF促进ESC向内脏内胚层和中胚层(心肌)分化,但两者仅能表达低水平的肝细胞特异性功能。引入淤胆血清的HGF诱导体系中ESC能分化为较为均一的多角形细胞,具有较高水平的糖原、甘油三酯、白蛋白和尿素氮合成能力,ICG和FDA染色阳性。 结论 自主分化和HGF诱导ESC表达肝细胞代谢的能力有限。体外模拟病理性微环境可诱导ESC定向分化为肝系细胞,并具有较高水平的肝细胞代谢功能。
- 方天翎闵军邓小耿钱世鹍褚忠华陈亚进邵静魏菁陈积圣
- 关键词：ESC分化HGF肝细胞功能体外诱导
- 严重急性呼吸道综合征冠状病毒Spike蛋白抗原特异性的临床应用研究
- 2005年
- 目的探讨严重急性呼吸道综合征(SARS)患者的SARS冠状病毒(SARSCoV)抗体产生情况以及SARSCoVSpike蛋白抗原的特异性。方法运用酶联免疫法(ELISA)和蛋白质印迹法(WesternBlotting)检测95例SARS患者体内抗体的产生情况和验证病毒Spike蛋白抗原的特异性。结果95例SARS患者血清抗体结果中,大部分患者出现抗体阳性,抗SARSCoVIgM总阳性率为91.6%(87/95),抗SARSCoVIgG总阳性率为97.9%(93/95);高暴露人群组和正常对照组的抗SARSCoVIgM和抗SARSCoVIgG阳性率为0%。经过携带Spikeprotein基因的重组病毒AdSn感染COS1细胞后表达的S蛋白抗原,使用SARS患者抗血清能够检测出特异性蛋白条带;重组病毒感染CNE2细胞后,表达的S蛋白抗原,能够通过不同患者抗血清同时检测到相应的特异性抗原蛋白。结论SARS患者感染SARSCoV后,体内可产生相应抗体;利用SARS患者所产生特异性抗血清,可以检测出克隆SARSCoV的Spike基因所表达的Spike蛋白。
- 段朝晖罗晓红刘然义邵静黄嘉凌朱振宇黄健黄文林
- 关键词：抗原抗原特异性E蛋白SARS患者
- 阳离子脂质体Lipofectamine2000对人胰腺癌Capan-2细胞的毒性作用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨阳离子脂质体Lipofectamine2000(Lipo)在一定浓度下对细胞毒性的作用机制。方法应用一定毒性浓度的Lipo作用于胰腺癌Capan-2细胞,利用细胞直接记数法和流式细胞术检测其对Capan-2细胞生长、细胞凋亡和周期的影响。结果Lipo与siRNA的浓度均影响转染率的高低。在2ml转染体积中,Lipo在5μl的浓度下,使Capan-2细胞生长明显减慢,以第3天后更加明显(P<0.001)。随着转染细胞按常规培养的时间延长,早期凋亡细胞明显增多(P<0.05),活性细胞明显减少(P<0.01),而损伤细胞和死亡细胞明显增多(P<0.001),以48h后更明显;G0～G1期细胞明显增多(P<0.05),G2-M期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞明显减少(P<0.01),晚期凋亡细胞减少(P<0.05)。结论在一定浓度下,Lipo可影响细胞的生长、早期凋亡和细胞周期分布,因此,利用Lipo在不同的细胞系进行基因转染过程中Lipo应进行浓度梯度筛选。
- 钟英强魏菁傅玉如邵静梁倚文林燕华刘娟朱兆华
- 关键词：脂质体LIPOFECTAMINE胰腺肿瘤细胞生长流式细胞术
