赵建朋
- 作品数:6 被引量:15H指数:3
- 供职机构:石河子大学生命科学学院更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 中度嗜盐菌产α-淀粉酶发酵条件优化和酶活性质研究被引量:4
- 2009年
- 实验室从新疆盐湖分离得到1株产α-淀粉酶中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05,对该菌株进行发酵条件优化和酶活性质研究,发现该菌株适宜的液态发酵工艺条件为:培养基碳源为酵母浸粉,氮源为大豆分离蛋白,两者比例1:1,培养温度33%,发酵时间72h,初始pH值7.0。最大酶活为98U,最佳反应温度为75℃,pH值为6.0-9.0。
- 康壮丽郝凤霞胡文革赵建朋
- 关键词:中度嗜盐菌Α-淀粉酶发酵条件酶活性
- 新疆艾比湖中度嗜盐菌生物学特性研究和耐盐基因的克隆及分析
- 本研究从新疆艾比湖中分离得到一株中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-0.5,经形态学鉴定、生理生化分析和16SrDNA序列同源性比较,将它初步鉴定为地衣芽孢杆菌。Bacillus sp.XJ1-05的16SrDNA...
- 赵建朋
- 关键词:芽孢杆菌耐盐基因基因表达
- 文献传递
- 中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05α-淀粉酶基因的克隆和原核表达被引量:4
- 2009年
- 本实验室从新疆盐湖分离得到一株产α-淀粉酶中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05,根据已报道的α-淀粉酶基因(α-AMY)序列的保守区域设计引物,从中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05基因组中扩增出α-淀粉酶基因片段,将α-淀粉酶基因纯化后克隆到pGM-T载体上测序,结果表明α-淀粉酶基因片段长约1500bp,与地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis的α-淀粉酶基因序列的同源性为95%,两种序列具有一定的同源性。按正确的阅读框架将α-淀粉酶基因片段定向克隆到表达载体pET-32a上,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,α-淀粉酶基因能在大肠杆菌BL21中成功表达,确定表达蛋白的相对分子量为61kD左右,与理论推导的分子量相一致;构建的大肠杆菌工程菌,所产生的α-淀粉酶是包涵体,通过超声波粉碎仪粉碎后,测α-淀粉酶酶活为原菌的1.8倍。
- 康壮丽郝凤霞胡文革赵建朋
- 关键词:中度嗜盐菌Α-淀粉酶克隆
- 新疆艾比湖中度嗜盐菌A6的16SrDNA分析被引量:5
- 2007年
- 从新疆艾比湖分离得到中度嗜盐菌A6,该菌能够在0%~20%NaCl的条件下生长,为有芽孢的杆状菌。采用真细菌16SrDNA通用引物PCR扩增A6菌株的16SrDNA,得到的片段长度为1512bp。使用NCBI^Blast软件在Gen-bank数据库中对其进行同源性检索,A6的16SrDNA序列与多种地衣芽孢杆菌16SrDNA序列同源性高达99%。使用MEGA3.1软件构建系统发育树,A6菌株与地衣芽孢杆菌的亲缘关系最近。由此判断A6菌株属于芽胞杆菌属。结合生理生化分析及对A6菌株的甜菜碱醛脱氢酶基因和Ⅲ型乙醇脱氢酶基因的序列同源性分析,初步确定A6菌株有可能是地衣芽胞杆菌的1个新种。
- 胡文革赵建朋康壮丽郝凤霞
- 关键词:同源性分析系统发育
- 中度嗜盐菌GbsB基因的克隆、序列分析及生物信息学分析
- 2008年
- 为构建耐盐的转基因植物提供材料,根据地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformisATCC 14580的GbsB基因的核甘酸序列设计1对特异性引物,通过PCR的方法扩增由分离的中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05的GbsB基因,经T/A克隆,插入到pBS-T载体上进行序列测序,采用NCBI-BlastX软件在Genbank数据库中进行同源性检索,结果表明:得到的GbsB基因的开放阅读框(ORF)全长为1209bp,编码1个由402个氨基酸残基组成的蛋白质;其与Bacillus licheni-formisATCC 14580的GbsB基因的氨基酸序列同源性高达96%。生物信息学分析表明:该GbsB基因编码蛋白无信号肽,无跨膜区域,高亲水性,有2个乙醇脱氢酶作用位点。
- 赵建朋康壮丽郝凤霞胡文革
- 关键词:中度嗜盐菌乙醇脱氢酶基因克隆
- Bacillus sp.XJ1-05菌株GbsA基因的克隆及其生物信息学分析被引量:2
- 2008年
- 根据地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformisATCC 14580的GbsA基因(GeneID:3027576)的核甘酸序列设计1对特异性引物。通过PCR的方法扩增由本实验室分离的中度嗜盐菌Bacillus sp.XJ1-05的GbsA基因,经T/A克隆,插入到pBS-T载体上进行序列测序,结果表明得到的GbsA基因的开放阅读框(ORF)全长为1473bp。在Genbank数据库中进行同源性检索,结果表明:其与Bacillus licheniformisATCC 14580的GbsA基因的氨基酸序列同源性高达97%。生物信息学分析表明:该GbsA基因编码蛋白无信号肽,无跨膜区域,高亲水性,有2个醛脱氢酶作用位点。
- 赵建朋顾立军胡文革康壮丽郝凤霞
- 关键词:中度嗜盐菌甜菜碱醛脱氢酶基因克隆生物信息学分析