赵宝昌 作品数:88 被引量:197 H指数:7 供职机构: 大连医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省教育厅资助项目 辽宁省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 哲学宗教 更多>>
小分子G蛋白Rap1介导的细胞信号转导通路 被引量:4 2006年 Rap1属于小分子G蛋白Ras超家族成员之一,具有逆转原癌基因Ras激活突变体(K-ras)引起的细胞形态改变的功能和传递致癌信号两种相反的作用。Rap1和其他G蛋白一样,表现为无活性的GDP结合形式和有活性的GTP结合形式两种构象。通过两种构象之间的转换,起到分子开关的作用,调节细胞对外界刺激作出相应的反应。现对Rap1活性的调节及近年来有关Rap1介导的细胞信号转导通路及其对细胞行为影响的研究进行综述。 赵春艳 赵宝昌关键词:GTP结合蛋白质类 信号转导 双歧杆菌对小鼠肝癌腹水瘤细胞Ca^(2+)-ATPase及糖原磷酸化酶a的影响 被引量:3 2001年 采用青春型双歧杆菌菌液与小鼠肝癌腹水瘤细胞 HCa/16 A 3- F相互作用 ,测定其对细胞糖原磷酸化酶 a和微粒体 Ca2 + - ATPase活性的影响 ,发现两种酶的活性均明显低于对照组 ,这与细胞内其他一些钙稳态指标的变化相一致。提示双歧杆菌菌液对此腹水瘤钙稳态具有一定的影响 。 任凤 王昊人 赵宝昌关键词:青春双歧杆菌 钙稳态 白眉蝮蛇去整合素Adinbitor的基因克隆、表达及其部分生物学活性 被引量:20 2004年 为了寻找去整合素家族的新成员 ,研究其在抗血栓与抗肿瘤等方面的作用 ,从中国白眉蝮蛇毒腺中提取总RNA进行RT PCR扩增 ,获得了 2 19bp的白眉蝮蛇去整合素基因 .测序结果显示 ,其与韩国的同为蝮蛇去整合素的saxatilin的DNA序列同源性为 95 8% ,蛋白质序列同源性为 91 8% ,且蛋白质中含有去整合素的特征模体 RGD .将去整合素基因进行克隆、转化与诱导后 ,得到了该蛋白的可溶性高效表达 .经组氨酸亲和层析纯化 ,获得了分子量为 9kD的均质蛋白 ,并将其命名为adinbitor .活性测定结果显示 ,adinbitor能明显抑制由碱性成纤维细胞生长因子诱导的人脐静脉血管内皮细胞ECV30 4的增殖 ,诱导ECV30 4细胞发生凋亡 。 王继红 任凤 吴毓 田晓光 吴妍宁 赵宝昌关键词:去整合素 基因克隆 细胞增殖 细胞凋亡 血小板聚集 人白细胞介素18在毕氏酵母细胞中的分泌表达 被引量:3 2004年 目的 在酵母细胞中表达IL-18。方法 用Sac I 将pPIC9K-IL18线性化后,电转化毕氏酵母GS115,筛选后得到His+Mut+转化子,在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot 分析。结果 SDS-PAGE和Western blot印迹杂交结果证实表达蛋白的相对分子量为21 000,与预期的分子量一致。结论 在毕氏酵母中成功的表达了IL-18。 徐跃飞 吴毓 张春鹏 赵宝昌关键词:白细胞介素 毕氏酵母 N端缺失突变对核糖核酸酶抑制因子活性的影响 被引量:2 2004年 人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50 kD的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半肤氨酸.作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来胰RN白s。侵袭.HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N端、c端在空间上较为接近.用PcR方法在HRI cl〕NAS,端去除30个核普酸,并将此缺失突变的HRI的cl〕NA片段构建于质粒pPIcgK,电击转化入毕赤酵母(Pi峨i。 Pasto汀S)Gslls中,进行分泌型表达.对表达产物进行亲和层析纯化.实验结果表明,N端缺失突变的HRI与RN白s。A的亲合力较野生型HRI降低1倍,但依然具有竞争性抑制RNas。A的活性,表明HRIN端10个氨基酸残基缺失后并未丧失其抑制活性. 吴毓 赵宝昌 王继红 任风 吴妍宁 赵鹏 崔秀云关键词:核糖核酸酶抑制因子 缺失突变 毕赤酵母 蛋白质-蛋白质相互作用 融合蛋白GST-hRI的可溶性表达及对CCl_4引起的急性肝损伤的保护作用 被引量:4 2009年 目的:观察可溶性表达的融合蛋白GST-hRI对CCl4引起的急性肝损伤的保护作用。方法:构建pGEX-6p-1-hri表达质粒。在0.5 mol/L IPTG浓度下,调整温度诱导目的融合蛋白的最大可溶性表达。用Western Blotting检测GST-hRI的表达,用亲和层析法对GST-hRI进行分离纯化。将纯化后的GST-hRI腹腔注射给BALB/c小鼠,预先保护7 d后,再腹腔注射CCl4造成急性肝损伤。检测小鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平和肝脏的超氧化物歧化酶、黄嘌呤氧化酶、丙二醛、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧物酶指标,并在光镜下检测肝细胞的损伤程度。结果:0.5 mmol/L IPTG,26℃诱导表达8 h,超声破碎菌体所得到的上清中可溶性GST-hRI的表达量约占超声离心后上清总蛋白4.5%,与沉淀中的比例约为27%。与CCl4损伤组相比,GST-hRI治疗组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶和丙二醛水平明显下降(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平明显增加(P<0.05),黄嘌呤氧化酶水平基本没有变化。与hRI治疗组相比,GST-hRI治疗组的各项指标差异有统计学意义(P<0.05)。与维生素C处理组相比,GST-hRI处理组的各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:可溶性表达的融合蛋白GST-hRI具有对抗CCl4对小鼠肝损伤的作用,这为hRI的应用提供了实验基础。 杨明洁 王艇 樊建慧 王冬梅 崔秀云 赵宝昌 田余祥关键词:急性肝损伤 核糖核酸酶抑制因子 CCL4 抗氧化作用 利用钙调素对乳酸脱氢酶活性影响定量测定钙调素 1997年 Calmodulin (CaM) can activate several CaM-dependent-enzymes in the presence ofCa2+. The activative effect of CaM on lactate dehydrogenase (LDH, EC 1. 1. 1. 27) was studied.LDH was purified from bovine heart and CaM from bovine brain, respectively. Based on its activation of LDH by CaM, a quantitative assay of CaM was developed. Results of kinetic study showthat this activation belongs to "non-competitive activation". 杜国忠 赵宝昌关键词:调钙蛋白 乳酸脱氢酶 活性 基因重组白眉蝮蛇去整合素Adinbitor对人肝癌细胞系SSMC7721增殖、凋亡和侵袭的影响 2009年 [目的]研究基因重组白眉蝮蛇去整合素Adinbitor对SSMC7721细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。[方法]用Hoechst33258试剂盒染色,观察Adinbitor对细胞形态的影响;Western-blotting检测浓度梯度Adinbitor作用下Caspase-3表达情况,分光光度法考察Caspase-3活化程度;MTT法检测Adinbitor对细胞增殖的作用,Transwell及Matrigel检测其对细胞侵袭的影响。[结果]Hoechst染色显示Adinbitor可明显促进细胞凋亡。在Adinbitor作用下,胞浆Caspase-3含量减少,活化程度增高,活化倍数2.24-3.85。Adinbitor可明显抑制SSMC7721细胞增殖,IC50为0.296μmol,也可抑制细胞侵袭能力。[结论]基因重组Adinbitor可明显抑制SSMC7721细胞的增殖及侵袭,并且可通过活化Caspase-3促进细胞凋亡。 胡燕荣 刘淑清 田余祥 田晓光 于丽华 崔秀云 赵宝昌关键词:增殖 凋亡 去整合素 双歧杆菌对大肠癌细胞ccL_(187)cAMP、cGMP影响的实验研究 被引量:4 1998年 双歧杆菌对维持机体正常微生态平衡具有重要作用。本文研究了长双歧杆菌对大肠癌细胞cL187内第二信使cAMP、cGMP浓度的影响,对长双歧杆菌的对数期培养物分别进行下列处理:活菌、死菌、代谢产物作用ccL187细胞2小时后分别收集cL187细胞内的cAMP、cGMP浓度。实验表明长双歧杆菌的不同状态及代谢产物对cAMP、cGMP产生显著影响,且存在时间依赖关系,三种处理作用cL187细胞内的cAMP值分别为19205±1151nmol/L、13708±1003nmol/L、28988±123nmol/L,与对照相比表现出有意义的增高,cGMP浓度变化不明显。结果提示长双歧杆菌及其代谢产物参与ccL187细胞内的信息传递过程,且具有一定的协同作用。植物血凝素(PHA)对cL187细胞表面神经节苷脂的封闭显示cAMP的有意义变化,结果提示双歧杆菌对cl187细胞cAMP可能是通过作用于细胞神经节苷脂受体而发挥作用的。 唐立 任凤 赵宝昌关键词:双歧杆菌 信息传递 CAMP 大肠癌细胞 充分发挥整体优势搞好毕业论文工作 1994年 根据国家教委规定的医学检验专业业务培养要求中,培养学生具有“临床医学检验科学研究的初步能力”这一项要求,我们在学生毕业实习的一年中,最后三个月安排了毕业论文工作,现将我院87,88两个年级的毕业论文工作进行小结,并谈谈我们的初步体会。 张耀铮 王忠仁 赵宝昌关键词:毕业论文