解纯刚
- 作品数:7 被引量:27H指数:2
- 供职机构:浙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金浙江省科技厅重点资助项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人骨髓间充质干细胞纯化建系及临床实验研究
- 王金福黄河潘志军来晓瑜罗依王建安解纯刚席咏梅余勤寿张根郑强梁彬金洁李政道
- 该项目的主要技术:1、骨髓间充质干细胞新分离纯化体系和种子库系的建立,包括:(1)制备间充质干细胞特异性的单克隆抗体;(2)通过间充质干细胞特异性单克隆抗体制备间质干细胞磁珠分离系统;(3)建立骨髓间充质干细胞体外阔增技...
- 关键词:
- 关键词:骨髓间充质干细胞人骨髓间充质干细胞
- 冻存复苏后骨髓间充质干细胞体外扩增和多向分化潜能研究被引量:8
- 2006年
- 冻存复苏的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)被传至15代并分别诱导成软骨细胞、脂肪细胞和神经细胞,以此研究冻存干细胞的扩增和分化潜能.结果表明,复苏细胞在软骨细胞诱导液的作用下分化为软骨细胞,对甲苯胺蓝异染并通过RT-PCR检测出Ⅱ型前胶原mRNA的表达;在脂肪细胞诱导液的作用下,可检测到被诱导细胞中脂滴的产生,通过油红O染色显示出细胞核周围聚集的脂滴;在神经细胞诱导液的作用下,通过免疫组化和RT-PCR均检测出被诱导细胞具有巢蛋白和神经元特异性烯醇化酶的表达,分化细胞延伸分支,末端为典型曲张体.推断复苏的hMSCs仍是具有向软骨、脂肪和神经元多系分化的潜能性干细胞群,可以作为细胞组织工程和治疗相关疾病的一种干细胞来源.
- 项盈贾冰冰沈丹黄国平解纯刚郑强金洁王金福
- 关键词:冻存分化脂肪细胞
- 体外分阶段共培养法扩增的脐血造血干/祖细胞移植于NOD/SCID小鼠的实验研究被引量:2
- 2005年
- 研究用分阶段共培养法进行体外扩增的脐血造血干/祖细胞对NOD/SCID小鼠重建造血功能的作用,探讨新扩增技术体系对将来临床移植的可行性.分离脐血单个核细胞,分别用rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF组合(非共培养组合)和rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF+人骨髓间充质干细胞组合(共培养组合)进行脐血造血干/祖细胞的体外扩增,并对扩增细胞进行流式细胞术和细胞集落形成能力分析.在移植实验中,将经致死剂量射线照射后的NOD/SCID小鼠随机分为3组,每组10只.A组:每只移植8.5×106个用rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF+人骨髓间充质干细胞组合扩增的细胞;B组:每只移植8.5×106个用rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF组合扩增的细胞;C组:每只仅输注0.5 mL生理盐水.移植后定期眼眶底部采血,分析重建造血.12周后取存活小鼠骨髓,检测人特异Alu基因的存在率.实验结果表明,rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF+人骨髓间充质干细胞组合的共培养法显著提高了造血干/祖细胞的扩增倍数,并且有利于造血干/祖细胞的自我更新和提高细胞集落形成能力.两种组合扩增的细胞移植小鼠12 d后,小鼠的白细胞类群开始回升,25 d后基本恢复到了基数水平.在45~55 d后小鼠细胞有明显的第2个恢复期,并且共培养组合扩增细胞移植的小鼠中第2次恢复明显快于非共培养组合.12周后在两种组合移植的小鼠中检测到人特异Alu序列片段的概率分别为87.5%(7/8)和88.9%(8/9).由此可推论,分阶段共培养扩增体系有效地提高了脐血造血干/祖细胞的扩增能力和重建造血能力.
- 王金福项盈解纯刚贾冰冰
- 关键词:脐血体外扩增NOD/SCID小鼠
- 脐血间充质干细胞的生物学特征及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用被引量:18
- 2005年
- 目的探讨脐血间充质干细胞(MSC)的生物学特征及其对造血干/祖细胞体外扩增的支持作用。方法用液体培养法分离脐血贴壁细胞,采用ELISA方法检测贴壁细胞条件培养液中细胞因子的表达;用流式细胞术分析其免疫表型特征;在成软骨细胞诱导培养条件下诱导细胞分化,并用RTPCR方法检测分化后细胞原胶原Ⅱ型基因的表达。采用分阶段共培养方法观察脐血贴壁细胞对CD34+细胞体外扩增的支持作用。结果脐血单个核细胞纤维样细胞集落形成率为(3.5±0.7)/106。脐血MSC体外至少可以扩增15代。没有分化的脐血MSC表型为CD13、CD29、CD90、CD105、CD166、SH2、SH3和SH4阳性,CD45、CD34和CD14阴性;脐血MSC培养上清中干细胞因子、IL6和肿瘤坏死因子α检测阳性。在成软骨细胞诱导培养基培养条件下,脐血MSC原胶原Ⅱ型基因mRNA表达阳性。脐血MSC与CD34+细胞共掊养14d,CD34+细胞扩增率高于未共培养组4倍。结论脐血MSC具有类似于成体骨髓MSC的特征,对造血干细胞增殖有明显的支持作用。
- 王丽娟张叶萍王金福吴亦凡项盈解纯刚贾冰冰Jenny HarringtonIanK. McNiece
- 关键词:体外扩增CD34^+细胞间充质干细胞贴壁细胞
- 转THPO和FL膜外区基因骨髓间充质干细胞对脐血造血干//祖细胞的体外扩增研究
- 造血干细胞/(HSCs/)是指那些具有自我更新能力并能分化为所有血系细胞的干细胞。造血干细胞移植/(HSCT/)常被用来治疗血液系统疾病和作为血液系统恶性疾病高剂量化疗后的支持治疗。骨髓、外周血和脐带血是人类的主要造血干...
- 解纯刚
- 关键词:骨髓间充质干细胞血小板生成素脐带血体外扩增
- 文献传递