袁芳
- 作品数：22 被引量：71H指数：4
- 供职机构：山东大学齐鲁医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程自动化与计算机技术更多>>
- 美金刚对H_2O_2诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响及机制探讨
- 2013年
- 目的观察美金刚(Mem)对H2O2诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期的细胞,随机分为5组;A、B、C、D组分别加入终浓度为10、20、30μmol/L的Mem及等体积的PBS预处理2 h,A、B、C、E组再加入400μmol/L的H2O2继续培养24 h。MTT法测定细胞活性,Hoechst33342染色检测细胞凋亡,比色法检测Caspase-3相对酶活性。结果 A、B、C、D、E组细胞活性(A570值)分别为0.617 5±0.037 5、0.674 0±0.052 2、0.645 5±0.051 7、1.030 6±0.068 9、0.554 4±0.044 3,细胞凋亡率分别为35.98%±5.96%、31.48%±6.79%、32.28%±9.16%、2.04%±1.54%、45.24%±5.78%,Caspase-3相对酶活性分别为251.35±20.76、219.33±18.24、223.27±29.89、100.00±13.25、327.49±35.18,E组与D组比较,P均<0.01;A、B、C组与E组比较,P均<0.05。结论 Mem能够阻止H2O2诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,其机制可能与抑制Caspase-3的活性有关。
- 蒲蜀湘饶从磊梁兵袁芳吴培基钟真真高聪
- 关键词：美金刚SH-SY5Y细胞细胞凋亡
- 脑血流有效灌注压的无创检测及其对急性脑梗死的临床意义被引量：9
- 2014年
- 目的探索脑血流有效灌注压（effective cerebral perfusion pressure，CPPe）的无创检测方法的有效性以及急性脑梗死患者CPPe与颈内动脉血管狭窄程度的相关性。 方法本研究为前瞻性研究，收集2010年1月∽2012年1月在广州医科大学附属第二医院神经内科住院的41例发病1周内的急性脑梗死患者，所有患者均经数字减影血管造影（digital subtraction angiography， DSA）和经颅多普勒超声（transcranial Doppler ultrasonography，TCD）评估颈内动脉狭窄程度及大脑中动脉无创血压、有创血压及血流速度，根据上述检测结果计算CPPe，比较TCD、DSA评价CPPe的有效性。同时根据北美症状性颈动脉狭窄内膜切除研究（North American Symptomatic Carotid Endarterectomy Trial，NASCET）标准分为轻度狭窄组、中度狭窄组和重度狭窄组，比较各组间的血管狭窄危险因素、CPPe和美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health Stroke Scale，NIHSS）评分，以及CPPe和NIHSS评分与颈内动脉血管狭窄程度的相关性。 结果所有急性脑梗死患者的有创和无创CPPe比较，结果发现有创CPPe的中位数为56.6 mmHg，无创CPPe的中位数为57.8 mmHg，两者之间的差异无显著性（P＞0.05）。轻度狭窄组、中度狭窄组和重度狭窄组3组急性脑梗死患者的有创CPPe的中位数分别为60.6 mmHg、42.5 mmHg和1.6 mmHg；无创CPPe的中位数分别为62.2 mmHg、42.7 mmHg和0.27 mmHg；NIHSS评分的中位数分别为4、3和8；比较CPPe、NIHSS评分在各组间的差异有显著性，H值分别为26.906、26.906及11.233（P＜0.01）。相关分析显示急性脑梗死患者CPPe与DSA显示的血管狭窄程度密切相关，相关系数分别为-0.782和-0.814，差异有显著性（P＜0.01）；而NIHSS评分与DSA显示的血管狭窄程度无相关性，相关系数为0.222，差异无显著性（P＞0.05）。〈br〉 结论通过TCD无创检测并计算CPPe的新方法可以
- 梁兵袁芳梁云云傅贤解龙昌殷建瑞高庆春
- 关键词：急性脑梗死数字减影血管造影
- 3种不同类型基因导入系统转染类神经元细胞的效率比较被引量：3
- 2012年
- 目的应用3种不同类型基因导入系统携带能表达绿色荧光蛋白的pAAV-EGFP质粒转染两类神经元细胞株,并对细胞毒性和转染效果进行比较。方法 LipofectAMINE 2000、聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI,相对分子质量为25×103)及该课题组合成的PEI-聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)4.6在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞和C6胶质瘤细胞中的转染效果,通过MTT法检测细胞存活率,倒置显微镜荧光观察法和流式细胞仪法检测转染效果。结果 MTT检测发现,在C6胶质瘤细胞中,PEG-PEI 4.6的细胞存活率为83%,比PEI(70%)和LipofectAMINE 2000(73%)的细胞存活率要高(P<0.05);但Lipo-fectAMINE 2000和PEI的细胞存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05);在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中的检测结果与C6胶质瘤细胞类似。倒置显微镜观察发现,在C6胶质瘤细胞中,PEG-PEI 4.6的细胞荧光表达效果比LipofectAMINE2000和PEI要好;而在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中,LipofectAMINE 2000的荧光表达效果比另外两种复合物的效果好,同时PEG-PEI 4.6的荧光表达效果比PEI要好。流式细胞仪检测发现在C6胶质瘤细胞中,PEG-PEI 4.6的转染效率最好,为23.2%;Lipo-fectAMINE2000其次,为16.9%;PEI最差,为12.6%,三者两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中则是LipofectAMINE 2000的转染效率最好,PEG-PEI 4.6其次,PEI最差,转染效率分别为22.3%、17.2%、10.6%,三者两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LipofectAMINE 2000和PEG-PEI 4.6都可作为目前神经系统基因转染的传输载体。
- 梁兵袁芳杨宁殷建瑞蒲蜀湘解龙昌高庆春高聪
- 关键词：神经胶质瘤神经母细胞瘤脂质体转染
- 实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型脑组织硫化氢的变化被引量：3
- 2015年
- 目的观察实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）模型大鼠脑组织中硫化氢（H2S）动态变化，探讨H2S与多发性硬化（MS）的关系。方法按随机区组设计方法将SD大鼠分成对照组及模型组，每组78只。模型组制备EAE模型，对照组用生理盐水代替诱导乳剂，余措施相同。采用HE染色、尼氏染色观察2组大鼠脑组织病理变化；比较不同时间点（建模后5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60d和65d）2组大鼠平均临床评分；采用比色法检测各时间点H2S和丙二醛（MDA）水平。结果（1）HE和尼氏染色显示模型组中可见明显的炎性细胞浸润现象及血管袖套形成，对照组未发现明显改变。（2）模型组于建模后第20天及第50天出现2次发病高峰，临床评分分别为（4．0±0．55）分和（3．5±0．25）分；对照组的评分为0分。（3）模型组大鼠各时间点脑组织中H2S表达量随着发病呈逐渐下降趋势，从第10天开始低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。相反，模型组大鼠各时间点脑组织中MDA呈逐渐增加趋势，从第10天开始高于对照组，差异有统计学意义（P〈0.05）。对照组大鼠H2S和MDA水平无明显变化。（4）模型组大鼠脑组织中H2S水平的变化与临床评分、MDA水平呈负相关（r=0．960，P=0．000；r：=-0．920，P=0．000）；临床症状评分和MDA水平呈正相关（r=0．910,P=0．000）。结论H2S在EAE模型中表达明显降低，在MS中的作用机制有待进一步研究。
- 杨宁邓小莹梁兵袁芳
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎多发性硬化硫化氢
- 纳米材料PEG-PEI介导双基因促体外拟神经细胞凋亡的作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨新型纳米材料PEG-PEI介导的双基因pIRES2-EGFP/CD-5-FC和pIRES2-EGFP/TRAIL在体外对拟神经细胞模型(神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞)的联合杀伤作用。方法将PEG-PEI介导的联合基因pIRES2-EGFP/CD-5-FC和pIRES2-EGFP/TRAIL转染SH-SY5Y细胞后,采用MTT法观察其对SH-SY5Y细胞的杀伤作用,荧光显微镜下观测以及流式细胞仪检测SH-SY5Y细胞凋亡率及FPEG-PEI的转染效率。结果 N/P=15时PEG-PEI转染两种目的基因中单一基因的细胞凋亡作用最强(P<0.01);两种基因联合转染SH-SY5Y细胞时的细胞凋亡率为77%,较单一基因转染的细胞凋亡率提高了27%(P<0.01)。结论 CD-5-FC和TRAIL基因在体外联合转染对SH-SY5Y细胞的杀伤作用较单一基因更强;PEG-PEI可以作为神经细胞基因靶向传输的载体行神经系统疾病基因治疗的体内实验研究。
- 梁兵袁芳殷建瑞蒲蜀湘解龙昌高庆春高聪
- 关键词：体外转染基因治疗细胞凋亡
- 醒脑静注射液治疗急性脑出血的系统评价被引量：27
- 2014年
- 急性脑出血是严重危害人类健康的重大疾病之一。随着人们对脑出血治疗的研究进一步深人，中医中药也成为重要治疗方式。基础和临床研究均提示醒脑静注射液具有退热、改善脑毛细血管通透性、减轻脑水肿、减轻脑缺血后炎症反应及自由基损伤等作用[1-2]。本研究对2008年至2013年5月全国关于醒脑静注射液治疗急性脑出血的随机对照试验进行系统分析，主要目的是评价醒脑静注射液是否能改善脑出血患者治疗期间病死率和早期有效率，且不引起严重的药物不良反应。
- 袁芳高庆春
- 关键词：醒脑静注射液急性脑出血随机对照试验药物不良反应自由基损伤
- 乙醇对人神经母细胞瘤细胞凋亡和半胱氨酸蛋白酶-3活性的影响
- 2013年
- 目的探讨乙醇对人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞调亡和半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3活性的影响。方法使用不同浓度乙醇(50、100、200、400和800 mmol/L)处理SH-SY5Y细胞24 h,噻唑蓝比色法检测乙醇对细胞增殖的抑制作用;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态学变化;比色法检测细胞caspase-3相对活性。结果与空白对照组比较,乙醇50 mmol/L组、100 mmol/L组、200 mmol/L组、400 mmol/L组和800mmol/L组的吸光度值(A570)显著降低(P<0.05～0.01),SH-SY5Y细胞凋亡率及caspase-3活性显著增高(均P<0.01);各组间比较,差异亦有统计学意义(均P<0.001)。空白对照组SH-SY5Y细胞核较大,染色质均匀;50 mmol/L乙醇组细胞核有少许固缩,少量染色质边聚、浓缩;100 mmol/L乙醇组致密的颗粒状或条状强蓝色荧光的细胞核轻度增多;200 mmol/L乙醇组细胞核固缩增加,染色质边聚、浓染;400 mmol/L乙醇组细胞核固缩明显增加,染色质边聚、致密浓染,出现核碎裂和凋亡小体;800 mmol/L乙醇组大量细胞凋亡,碎裂的细胞核增多,出现较多的凋亡小体。结论乙醇呈剂量依赖性诱导SH-SY5Y细胞凋亡,其机制可能与caspase-3的活性增高有关。
- 蒲蜀湘饶从磊梁兵袁芳吴培基钟真真高聪
- 关键词：乙醇SH-SY5Y细胞CASPASE-3凋亡
- 帕金森病睡眠障碍的结构特点及影响因素被引量：5
- 2014年
- 目的探讨帕金森病睡眠障碍的结构特点及影响因素。方法应用多导睡眠监测仪和匹茲堡睡眠质量指数问卷(PSQI)对15例帕金森病患者(PD组)和18例年龄、性别相匹配的健康成人(对照组)行多导睡眠监测和睡眠质量评估。结果两组比较,睡眠时间、睡眠效率、3+4期睡眠时间、3+4期睡眠比、动眼睡眠期(REM)时间、2期睡眠比、睡眠潜伏期差异均具有统计学意义(P均<0.05)。睡眠破碎、慢波睡眠缺失发生率PD组分别为73.3%、80.0%,对照组分别为33.3%、22.2%,两组比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。逐步多元回归分析示PD组PSQI得分与左旋多巴剂量和病程呈线性相关(t分别为2.912、2.992,P均<0.05)。结论帕金森患者存在多种睡眠结构的改变,睡眠质量与病程、H-Y分级、左旋多巴剂量有关。
- 钟真真蒲蜀湘袁芳陈晓军高聪姚海燕何毅华
- 关键词：帕金森病多导睡眠图睡眠质量
- “参与式”教学在神经病学教学中的应用思考被引量：1
- 2011年
- 将"参与式"教学法融合入传统的课堂教学方法中,对提高神经病学教学质量有裨益。同时对可能存在的制约"参与式"教学方法实施的因素提出了解决办法。
- 袁芳梁兵高聪蒲蜀湘易咏红
- 关键词：神经病学教学改革素质教育
- 美金刚对过氧化氢诱导多巴胺能神经元氧化应激损伤的保护作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨美金刚对过氧化氢(H2O2)诱导的多巴胺能神经元氧化应激损伤的保护作用。方法用400μmol/L H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y损伤建立多巴胺能神经元氧化应激损伤模型,随机分为美金刚10、20、30μmol/L组和空白对照组,分别加入相应试剂(空白对照组加入等体积PBS);倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,比色法测定LDH释放率。结果 10、20、30μmol/L美金刚干预24 h后,SH-SY5Y细胞的吸光度值(A570)分别为0.936 5±0.033 2、0.974 9±0.030 0和0.948 7±0.033 6,空白对照组为0.924 7±0.039 8;组间比较无统计学差异(P=0.160)。经10、20、30μmol/L美金刚预处理2 h后,SH-SY5Y细胞的存活率分别为(59.92±3.64)%、(65.40±5.07)%和(62.63±5.01)%,与H2O2处理组比较有统计学差异(P<0.05或<0.01)。此外,10、20、30μmol/L美金刚预处理组SH-SY5Y细胞的LDH释放率分别为(38.70±7.88)%、(34.10±6.75)%、(35.58±8.68)%,与H2O2处理组比较均有统计学差异(P<0.05或<0.01)。结论美金刚对H2O2诱导的多巴胺能神经元氧化应激损伤具有保护作用。
- 饶从磊蒲蜀湘梁兵袁芳吴培基钟真真高聪
- 关键词：帕金森病美金刚SH-SY5Y细胞氧化应激
