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董元舒
作品数:
13
被引量:14
H指数:3
供职机构:
南开大学生命科学学院分子生物学研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
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生物学
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合作作者
陈德风
南开大学生命科学学院分子生物学...
陈雅文
南开大学生命科学学院分子生物学...
杨其伟
南开大学生命科学学院分子生物学...
赵西林
南开大学生命科学学院分子生物学...
史国利
南开大学生命科学学院分子生物学...
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1999
1篇
1998
1篇
1997
7篇
1996
1篇
1994
共
13
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研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变关系的双基因真核表达重组体的构建
1997年
本文将聚ADP核糖聚合酶基因1.4kb部分序列反向插入真核表达载体pMAMneo和pSMG中,同时12位密码子突变的活化ras癌基因也一同克隆到上述载体中,从而获得具有不同真核基因筛选标记的双基因真核表达重组体pMAMneo-Cl.4-T24,pMAMneo-Cl.4-arT24,及pSMG-Cl.4-T24,上述质粒的构建成功为研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变的关系提供了一种新的分子模型.
杨其伟
张学
陈雅文
董元舒
陈德风
关键词:
癌基因
细胞恶变
针对点突变癌基因转录物的核酶细胞内性质的研究
被引量:2
1996年
前文[1]已证实在体外(invitro)实验接近生理环境的条件下,本室设计、合成并克隆到的核酶能够高效选择性的定点切割T24-ras活化癌基因转录物。在此基础上,为阐明该核酶在体内(invivo)的生理活性,本文又进一步把核酶基因片段克隆在真核表达质粒pSMG上,并将重组质粒以磷酸钙沉淀法转染由T24-ras基因诱导的转化细胞系。在细胞和分子水平上检测了核酶在真核细胞内的生物学活性:表现为各恶性转化细胞系的形态特征逆转,生长速度减慢,并呈现出重叠生长减弱恢复接触抑制的趋势,细胞凝集行为接近正常、软琼脂集落形成能力下降;同时,引物延伸实验结果也表明:在体内实验条件下,核酶能够特异性切割点突变T24-ras癌基因转录物,抑制癌变细胞的恶性行为,使其得到一定程度的逆转。
刘戈
陈雅文
赵西林
董元舒
陈德风
关键词:
核酶
体内活性
癌基因
转录物
识别序列外DNA甲基化对限制性核酸内切酶PvuⅡ酶切活性影响的研究
被引量:1
1996年
构建了重组质粒pSV2gpt-SV40ori-antisense-ras(简称P1),利用这一重组体进一步证实了识别序列外DNA甲基化对限制性核酸内切酶PvuⅡ切割活性的抑制作用,并对这一抑制作用进行了定量研究。结果表明:邻近PvuⅡ识别位,点的DNA甲基化可降低PvuⅡ对该位点酶切活性的70%左右。
陈德风
刘强
赵西林
董元舒
李青
关键词:
DNA甲基化
核酸内切酶
全文增补中
利用反义RNA探索外源基因丢失的分子机理
1998年
利用反义RNA技术研究了调控PARP酶基因的表达对外源基因整合稳定性的影响。将PARP基因cDNA的部分序列反向插入到真核表达载体pSMG中,将重组质粒分别导入携带有外源基因的细胞中,地塞米松诱导反义PARP基因的表达后,进行Southern杂交检测。结果表明,外源基因仍保留在基因组中,这意味着外源基因的丢失并不是由于单一PARP酶活性降低所致。
杨其伟
赵立青
董元舒
陈雅文
陈德风
关键词:
反义RNA
基因丢失
基因
点突变ras癌基因全cDNA真核表达重组体的构建及诱导NIH3T3细胞转化的研究
1996年
将活化癌基因T24-ras的全cDNA序列正向插入真核载体pMAMneo,构建成重组质粒pMAMneo-T24-ras.将该质粒转染NIH3T3细胞,通过药物筛选,建成细胞系3T3(T24).Southern杂交证明外源T24-ras基因已整合于受体细胞染色体中.3T3(T24)细胞表现出形态学方面的明显变化:具失去接触抑制能力,且在裸鼠体内致瘤等恶性行为.本文构建的T24-ras基因真核表达重组体和建立的转化细胞系可用于肿瘤的诊断、预防、治疗及抗肿瘤药物的筛选、评估等研究.
董元舒
孙丙刚
杨其伟
陈雅文
李青
陈雄伟
陈德风
关键词:
RAS癌基因
DNA转染
针对点突变癌基因T24-ras转录物的核酶性质研究
1996年
通过改变核酶体外反应的各种条件,对针对点突变癌基因T24-ras转录物的核酶R8的性质进行了系统研究,结果表明:R8切割底物反应的最适pH值约为8.2,最适温度为50℃,反应必须有镁离子参加,生理环境中常见的阴离子对反应没有影响,一些变性剂能够促进反应的进行,R8切割底物的反应为二级反应。
董元舒
赵西林
孙宝勇
陈德风
关键词:
癌基因
核酶
点突变
带有CMV、CEA启动子的腺病毒载体介导TK基因在肿瘤细胞中的表达特性
被引量:3
1999年
TK基因一GCV系统是最有希望在临床上用于肿瘤基因治疗的方法之一。为了提高基因靶向表达的效率,使之可以应用于体内实验,我们构建重组腺病毒AdCMVTK和带有CMV、CEA两个启动子的AdCMVCEATK,在五种癌细胞中进行了体外实验。发现腺病毒介导的TK基因赋予癌细胞GCV敏感性比对照组高2~3个数量级,并使感染病毒和未感染病毒细胞比例为110时仍产生较强的“旁观效应”。实验表明PG肺癌,CAn结肠癌,HeLa细胞是腺病毒介导的TK基因的理想靶细胞。
冯宇新
房欣
史国利
董元舒
王文俊
陈德风
关键词:
P53基因
腺病毒载体
CEA
CMV
应用核酶降解活化癌基因转录物的研究
陈德风
董元舒
赵西林
刘戈
史国利
该项目研究了能高效切割T<,24>-ras转录物而不损伤正常C-Ha-ras mRNA的核酶R<,8>在体外的最适反应条件,预测了生理环境中各种因素对R<,8>反应的影响,并检测了核酶在细胞内的生物学活性。为利用核酶R<...
关键词:
关键词:
核酶
基因疗法
针对点突变癌基因核酶基因治疗动物实验研究
史国利
赵立青
董元舒
张丽
丁顺利
该项目利用病毒性载体将特异切割点,突变ras基因的核酶R<,8>导入突变ras基因转化的INH3T3细胞及致瘤裸鼠,研究结果表明R<,8>核酶能有效地抑制细胞内点,突变ras基因的表达,并使转化细胞的致瘤能力丧失,而包装...
关键词:
关键词:
核酶
基因疗法
动物实验
肿瘤细胞抑制
细胞内聚腺苷二磷酸核糖基化水平与外源基因整合稳定性的关系初探
董元舒
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